魚藤酮與3種新煙堿類殺蟲劑桶混對煙粉虱和煙蚜的聯(lián)合毒力

毛曉紅，陳 鵬，曹長代，白婷婷，張秀霞，張安盛

（1山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所/山東省植物病毒學(xué)重點實驗室，濟(jì)南 250100；2山東日照煙草有限公司，山東日照 276826)

0 引言

煙粉虱Bemisiatabaci(Gennadius)和煙蚜Myzus persicae(Sulzer)均是危害山東煙草的重要害蟲。煙粉虱屬同翅目，粉虱科[1]；煙蚜屬同翅目，蚜科[2]。2種害蟲都是通過汲取植物汁液，導(dǎo)致煙株生長緩慢；均可分泌蜜露，并誘發(fā)煤煙病；均會傳播病毒病等多種病害，嚴(yán)重影響煙葉的質(zhì)量，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[3-5]。

自2000年以來，山東煙區(qū)煙粉虱危害嚴(yán)重[6-7]，且常年與煙蚜混合發(fā)生[8]。近年來，煙草生產(chǎn)中對煙粉虱和煙蚜的防治上存在用藥單一、隨意桶混等現(xiàn)象，不僅防控效果差，而且還導(dǎo)致煙粉虱和煙蚜抗藥性增強、煙葉農(nóng)藥殘留超標(biāo)、品質(zhì)下降等后果。研究結(jié)果表明，煙粉虱對有機磷類等農(nóng)藥已產(chǎn)生抗藥性[9]，煙蚜對有機磷類[10]、擬除蟲菊酯類[11-14]等農(nóng)藥也產(chǎn)生不同程度的抗藥性，嚴(yán)重影響了人們身體健康，同時也引發(fā)一系列的環(huán)境、生態(tài)和社會問題。

魚藤酮屬于無公害農(nóng)藥范疇，是一種廣譜性植物源殺蟲劑，對800多種害蟲具有防治效果[15]。魚藤酮主要是通過影響昆蟲的呼吸作用起到殺蟲的作用，其作用位點較多，能很好的克服害蟲的抗藥性[15-16]。魚藤酮具有完善的降解機制，降解徹底，無殘留，對環(huán)境影響小，對哺乳動物低毒，對害蟲的天敵和農(nóng)作物安全[17]。新煙堿類殺蟲劑是一類后突觸煙堿乙酰膽堿受體(nAChRs)激動劑，主要作用于昆蟲神經(jīng)后突觸煙堿乙酰膽堿受體。新煙堿類殺蟲劑具有較高的殺蟲活性，但對哺乳動物低毒，與其他殺蟲劑很少或無交互抗性。煙草生產(chǎn)過程中，煙粉虱和煙蚜繁殖能力強，危害較為嚴(yán)重，常規(guī)的藥劑已經(jīng)難以對2種害蟲都起到較好的防治效果。

本研究的目的是通過測定室內(nèi)魚藤酮與新煙堿類藥劑（噻蟲嗪、噻蟲胺、噻蟲啉）對煙粉虱和煙蚜的聯(lián)合毒力，并測定桶混藥劑應(yīng)用于田間的實際效果，從而篩選出對煙粉虱和煙蚜防治具有增效作用的桶混比例，為田間煙粉虱和煙蚜的共同防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器設(shè)備

人工氣候箱：型號RXZ型，寧波江南儀器制造廠生產(chǎn)，溫度(25±1)℃、相對濕度70%±5%、光照L:D=16:8；養(yǎng)蟲盒：直徑6 cm，高7 cm，盒蓋有直徑1.5 cm×1.5 cm十字型通氣孔；

直行管：直徑2.4 cm，高10 cm。

1.2 材料

1.2.1 供試藥劑 供試藥劑為6%魚藤酮微乳劑（北京三浦百草綠色植物制劑有限公司）、20%噻蟲胺懸浮劑（河北威遠(yuǎn)生化農(nóng)藥有限公司）、2%噻蟲啉微囊懸浮劑（山東國潤生物農(nóng)藥有限責(zé)任公司）、25%噻蟲嗪水分散粒劑（先正達(dá)（蘇州）作物保護(hù)有限公司），以上產(chǎn)品均為市場購買。

1.2.2 供試蟲源 煙粉虱成蟲和煙蚜成蚜均采自山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所溫室內(nèi)的煙草植株（煙草均未接觸任何農(nóng)藥）。

1.2.3 供試作物 供試煙草品種為‘NC55’。

1.3 方法

1.3.1 毒力測定 采用葉片浸漬法。在預(yù)試驗基礎(chǔ)上，將供試藥劑用蒸餾水稀釋成7～8個系列濃度，用來測定單劑致死中濃度(LC50)；假設(shè)經(jīng)毒力測定后魚藤酮LC50為a，噻蟲胺、噻蟲嗪、噻蟲啉LC50為b，將魚藤酮分別與噻蟲胺、噻蟲嗪、噻蟲啉按有效成分質(zhì)量比為a:9b、3a:7b、5a:5b、7a:3b、9a:b配成組分不同的桶混組合，按上述方法稀釋成7～8個系列濃度，用來測定不同藥劑桶混的LC50。

煙粉虱毒力測定：用直徑為2.4 cm打孔器將新鮮煙草葉片打成葉碟，在藥液中浸藥10 s（以浸清水為空白對照），將葉片置于吸水紙上晾干后，用鑷子夾入事先加入1 mL瓊脂的玻璃管中，每管1片；將供試煙粉虱成蟲吸入吸蟲器，移入玻璃管中，每處理重復(fù)4次（以清水浸葉為空白對照，每次重復(fù)30～40頭。用棉塞將玻璃管封口后倒置于人工氣候箱中，48 h后檢查煙粉虱死亡數(shù)量，以毛筆尖輕觸蟲體不能爬動者視為死亡。

煙蚜毒力測定：將帶有無翅成蚜的葉片（或嫩莖）用鑷子夾住，剔除僵蚜、有翅蚜、若蚜，在藥液中浸泡10 s（以浸清水為空白對照），用濾紙吸取多余藥液并晾干，而后放入墊有濕潤濾紙的養(yǎng)蟲盒中，盒蓋封口。將養(yǎng)蟲盒放入人工氣候箱中，48 h后觀察并記錄煙蚜死亡和存活數(shù)量。每處理重復(fù)4次，每次重復(fù)供試煙蚜30～35頭。

1.3.2 田間藥效試驗

（1）試驗地概況

試驗地為山東省日照市莒縣棋石鎮(zhèn)龍家官莊村(35.84°N,118.92°E)煙田，煙草品種為‘NC55’。煙草種植時間為2019年4月29日，株行距為120 cm×50 cm，種植密度18000～21000株/hm2。

（2）試驗處理

根據(jù)室內(nèi)篩選的對煙粉虱和煙蚜均具有增效效果的桶混組合進(jìn)行田間試驗。

6%魚藤酮微乳劑與20%噻蟲胺懸浮劑桶混比例3:20，13:25，14:25時，其防治煙粉虱每hm2制劑用量分別為54mL和45mL，108mL和26mL，113mL和25mL；其防治煙蚜每hm2制劑用量分別為26 mL和22 mL，54 mL和13 mL，58 mL和12 mL。

6%魚藤酮微乳劑與25%噻蟲嗪水分散粒劑桶混比例63:10，133:1時，其防治煙粉虱每hm2制劑用量分別為141 mL和5 g，67 mL和0.57 g；其防治煙蚜每hm2制劑用量分別為71 mL和2.6 g，158 mL和0.29 g。

（3）噴藥時間與用水量

幾種藥劑桶混防治煙粉虱用藥時間：2019年7月14日；其防治煙蚜用藥時間：2019年6月18日；用水量900 kg/hm2。

（4）調(diào)查方法和時間

試驗每小區(qū)采取5點取樣法，每小區(qū)取樣10株煙草；藥前調(diào)查蟲口基數(shù)，藥后1、3、7、10天調(diào)查殘存活蟲數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

用SPSS計算各處理LC50，用孫云沛法[18]計算藥劑組合物共毒系數(shù)(CTC)，混劑實際毒力指數(shù)(ATI)，混劑理論毒力指數(shù)(TTI)，毒力指數(shù)(TI)，分別見公式(1)、(2)、(3)、(4)。

式中共毒系數(shù)大于120，為增效作用；共毒系數(shù)為80～120，為相加作用；共毒系數(shù)小于80為拮抗作用。

田間試驗結(jié)果采用鄧肯氏新復(fù)極差法進(jìn)行方差分析，計算更正防效。見公式(5)、(6)。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測定結(jié)果

各藥劑對煙草煙粉虱和煙蚜的毒力測定結(jié)果（表1）表明，不同藥劑對煙粉虱和煙蚜的毒力存在差異性。4種藥劑對煙粉虱毒力大小順序為：噻蟲嗪＞噻蟲啉＞噻蟲胺＞魚藤酮，其中，噻蟲嗪毒力最高，LC50值為0.764 mg/L；其次為噻蟲啉0.917 mg/L；噻蟲胺、魚藤酮毒力低LC50值分別為9.417、12.287 mg/L。4種藥劑對煙蚜毒力大小順序為：噻蟲啉＞魚藤酮＞噻蟲嗪＞噻蟲胺，噻蟲啉毒力最高，LC50值為0.761 mg/L；其次魚藤酮、噻蟲嗪毒力相近，LC50值分別是2.626、2.993 mg/L；噻蟲胺毒力最低，LC50值是4.228 mg/L。

表1 幾種藥劑對煙粉虱和煙蚜室內(nèi)毒力測定結(jié)果

2.2 幾種藥劑組合物對煙粉虱的室內(nèi)聯(lián)合毒力測定結(jié)果

由表2可見，魚藤酮與噻蟲胺桶混中，當(dāng)魚藤酮與噻蟲胺組分比分別為3:20、14:25、13:25、76:23時，桶混藥劑對煙粉虱均具有明顯的增效作用，其CTC分別為167.14、120.47、154.58和154.27；組分比為12:1時，對煙粉虱的CTC僅為78.73（小于80），呈拮抗作用。魚藤酮與噻蟲啉桶混，按有效成分57:10、67:5和31:1配比對煙粉虱的CTC分別為144.64、151.12和166.47，有增效作用；按有效成分3:2和120:1配比對煙粉虱的CTC分別為92.95和109.06，具有相加作用。魚藤酮與噻蟲嗪桶混時，當(dāng)魚藤酮與噻蟲嗪組分比分別為63:10、74:3、57:1、133:1和512:1時，對煙粉虱均具有明顯的增效作用，CTC分別為 155.99、166.00、158.49、138.29和220.57。

表2 魚藤酮與3種新煙堿類殺蟲劑對煙粉虱的室內(nèi)聯(lián)合毒理測定

2.3 幾種藥劑組合物對煙蚜的室內(nèi)聯(lián)合毒力測定結(jié)果

魚藤酮與噻蟲胺桶混（表3），當(dāng)魚藤酮與噻蟲胺組分比為3:20、14:25和13:25時，對煙蚜具有明顯的增效作用，CTC分別為293.81、1001.76和167.93；當(dāng)組分比為76:25時，對煙蚜有相加作用，CTC為92.33；當(dāng)組分比為12:1時，對煙蚜有拮抗作用，CTC為38.91。魚藤酮與噻蟲啉桶混（表3），按有效成分120:1配比的CTC為179.18，對煙蚜具有增效作用；按有效成分3:2、57:10、67:5和31:1配比的CTC為34.50～68.03，均小于80，對煙蚜具有拮抗作用。魚藤酮與噻蟲嗪桶混，組分比分別為63:10和133:1時，對煙蚜的CTC分別為531.55和132.22，具有增效作用；組分比為61:25時，對煙蚜的CTC為114.94，具有相加作用；組分比分別為7:3和9:1時，對煙蚜的CTC分別為75.53和56.76，具有拮抗作用。

表3 魚藤酮與3種新煙堿類殺蟲劑對煙蚜的室內(nèi)聯(lián)合毒理測定

2.4 田間藥效試驗結(jié)果

通過室內(nèi)毒力測定結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)魚藤酮與噻蟲胺組分比為3:20、14:25和13:25，與噻蟲嗪組分比為63:10和133:1時，桶混藥劑對煙粉虱和煙蚜同時具有增效作用，但與噻蟲啉桶混未見有共同增效作用的配比。將選出的5種對煙粉虱和煙蚜有共同增效作用的桶混藥劑組合進(jìn)行田間藥效試驗，田間防效見表4、5。

表4 魚藤酮與噻蟲胺桶混對煙粉虱的田間防治效果

續(xù)表4

表5 魚藤酮與噻蟲嗪桶混對煙粉虱和煙蚜的田間防治效果

由表4可見，藥后1～10天調(diào)查，6%魚藤酮微乳劑與20%噻蟲胺懸浮劑3個比例的桶混的試驗中，藥后1天對煙粉虱的更正防效在70%以上，對煙蚜的更正防效均在80%以上，對煙粉虱和煙蚜的速效性顯著優(yōu)于6%魚藤酮微乳劑單劑速效性。藥后3天和7天，3個比例的桶混對煙粉虱和煙蚜的防效均在90%以上。藥后10天，3個比例的桶混對煙粉虱的防效在88%以上，其對煙蚜的防效在93%以上，3個比例的桶混對煙粉虱和煙蚜的防治持效性顯著優(yōu)于20%噻蟲胺懸浮劑單劑。

由表5可見，6%魚藤酮微乳劑與25%噻蟲嗪水分散粒劑2個比例的桶混的試驗中，藥后1天對煙粉虱的更正防效在74%以上，對煙蚜的更正防效均在81%以上，對煙粉虱和煙蚜的速效性顯著優(yōu)于6%魚藤酮微乳劑。藥后3天和7天，2個比例的桶混對煙粉虱和煙蚜的防效均在86%以上。藥后10天，2個比例的桶混對煙粉虱的防效在90%以上，其對煙蚜的防效在96%以上，2個比例的桶混對煙粉虱和煙蚜的防治持效性顯著優(yōu)于25%噻蟲嗪水分散粒劑。

3 結(jié)論

室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，不同單劑對煙粉虱和煙蚜的殺蟲效果不同，4種藥劑對煙草煙粉虱的毒力大小順序為噻蟲嗪＞噻蟲啉＞噻蟲胺＞魚藤酮；對煙蚜的毒力大小順序為噻蟲啉＞魚藤酮＞噻蟲嗪＞噻蟲胺。截至目前，噻蟲胺、噻蟲啉和噻蟲嗪對煙粉虱和煙蚜的的毒力測定已有相關(guān)研究。李偉等研究結(jié)果顯示噻蟲胺對煙蚜和煙粉虱的LC50值分別為2.191 mg/L和4.212 mg/L，本試驗結(jié)果在其置信區(qū)間內(nèi)，可能因飼養(yǎng)的煙蚜與煙粉虱不同結(jié)果稍有差異[19]。蘭亦全等[20]研究了噻蟲啉對煙蚜的LC50值為1.96 mg/L，本試驗LC50為0.761 mg/L，其差異性可能與飼養(yǎng)條件和試驗溫度有關(guān)。噻蟲啉對煙粉虱的室內(nèi)毒力尚未見報道。何玉仙等研究了噻蟲嗪對煙粉虱和煙蚜的室內(nèi)毒力，其LC50分別為0.6254 mg/L和3.03 mg/L，與本試驗結(jié)果相近[21-22]。

魚藤酮與噻蟲胺、噻蟲啉和噻蟲嗪有效成分比進(jìn)行桶混，通過孫云沛的共毒系數(shù)法最終確定12組對煙粉虱有增效作用的桶混組合和6組對煙蚜有增效作用的桶混組合。結(jié)合室內(nèi)毒力測定，最終篩選出5種對煙粉虱和煙蚜有共同增效作用的桶混藥劑組合，并進(jìn)行田間藥效試驗。結(jié)果顯示，6%魚藤酮微乳劑與20%噻蟲胺懸浮劑桶混，藥后1、3、7、10天對煙粉虱和煙蚜的防治效果達(dá)70%以上；6%魚藤酮微乳劑與25%噻蟲嗪水分散粒劑桶混，藥后1、3、7、10天對煙粉虱和煙蚜的防治效果達(dá)74%以上，其速效性優(yōu)于6%魚藤酮微乳劑的防治效果，持效性優(yōu)于化學(xué)殺蟲劑的防治效果。新煙堿類的作用靶標(biāo)和作用方式與魚藤酮不同，因此它們之間也不存在靶標(biāo)交互抗性[23]。2類殺蟲劑的桶混，彌補了植物源農(nóng)藥的見效慢和新煙堿類殺蟲劑持效期短的問題。因此，這2類殺蟲劑桶混藥劑的應(yīng)用，既體現(xiàn)了化學(xué)藥劑的速效性，又解決了化學(xué)藥劑持效性的問題，同時降低使用生物農(nóng)藥的用藥成本，延緩抗藥性的產(chǎn)生。

4 討論

隨著國家和人民對煙葉質(zhì)量要求越來越高，煙葉安全生產(chǎn)勢在必行。但化學(xué)農(nóng)藥的不合理使用，嚴(yán)重影響煙葉安全生產(chǎn)[24]。科學(xué)合理的施藥方法是減少環(huán)境污染和發(fā)揮藥物最大活性的基礎(chǔ)[25]。其中殺蟲劑混配與輪換是治理害蟲抗性的重要工具，實際生產(chǎn)中殺蟲劑的合理混配比輪換藥劑更有效[26-27]。因此本試驗選用近年來田間防治煙粉虱和煙蚜的常用藥劑噻蟲胺、噻蟲啉、噻蟲嗪和對環(huán)境友好的植物源殺蟲劑魚藤酮進(jìn)行混配，以期能夠找到最佳防治配比，用于田間煙粉虱和煙蚜的有效防治。

生物防治作為一種安全有效的防治手段，越來越受到人們的關(guān)注[28]。魚藤酮植物源殺蟲劑低毒、無污染等優(yōu)點，代表了新時代綠色農(nóng)藥的理念，應(yīng)用前景極其廣闊。由于藥劑桶混聯(lián)合毒力是在室內(nèi)環(huán)境下進(jìn)行的，田間防治效果較好，但是也會受到溫度、濕度等影響。因此，在后續(xù)研究中，還需繼續(xù)進(jìn)行煙粉虱和煙蚜的毒力和抗藥性等方面的研究，進(jìn)一步驗證植物源殺蟲劑與新煙堿類殺蟲桶混的防治效果，為煙草生產(chǎn)者提供科學(xué)用藥。