微生物學實驗室菌種使用保存與管理方法研究

李卓

摘要：做好對菌種的保護與管理工作，主要目的在于保護菌株，并保留其自身具備的遺傳性特點。本文以微生物學實驗室菌種使用保存與管理為探討主題，從建立菌種登記和管理程度、嚴格管控菌種傳代、運用科學方法保存常用菌種等方面分析實施使用管理與保護工作的具體方法，總結菌種管理工作的實踐經(jīng)驗，為微生物學實驗室菌種保管工作的優(yōu)化發(fā)展提供有效參考。

關鍵詞：微生物學;菌種;使用

1建立菌種登記和管理程序

在保存與應用菌種時，工作人員應全面了解并掌握材料的來源情況，明確其適應的存儲方法，按照微生物實驗室的規(guī)范要求做好菌種的管理工作，確保提升其在整個保存過程中的穩(wěn)定性。首先，管理人員應準確詳細地登記菌種的具體來源，著重研究材料的溯源問題，規(guī)范整個管理程序，對于每個菌種，為其設定獨有的編號，在將其正式納入到保存系統(tǒng)前，需初步記載菌種的各項基本信息。其次，加強管理菌種的接收工作，選用科學合理的方式保存菌種。對于普通的原始菌種，大多數(shù)實驗室使用的是玻璃瓶裝的凍干粉，且附帶有相應的資料信息。在購買完所需的菌種后，工作人員應嚴格記錄瓶的數(shù)量，以及上方標識的名稱等關鍵信息，在適宜的位置上粘貼標簽，然后將其直接放置于溫度適宜的容器內(nèi)，進行保存處理。在需要使用時，再將其及時取出即可。通常情況下，普通瓶裝凍干粉的使用期限在五年左右。最后，是復活菌種環(huán)節(jié)，在應用原始菌種材料時，實驗人員應該預先復活處理凍干的菌種，其涉及到的作業(yè)流程主要包括以下幾部分：在初始階段需要做好復活的準備工作，采用無菌習慣，吸取適量的也，然后將其置于安瓶環(huán)境中進行培養(yǎng)，通過輕輕旋轉(zhuǎn)，有效地融入液體與凍干粉，確保完全溶解菌種，接下來，將其向試管中進行轉(zhuǎn)移，參照菌種所屬的類型，以及所需的生存條件，針對性的調(diào)整其所處環(huán)境，確保菌種復活后，得到良好的培養(yǎng)條件。在菌種復活的實際生長過程中，很可能會發(fā)生液體渾濁等現(xiàn)象，因而在實際培養(yǎng)的階段內(nèi)，若出現(xiàn)嚴重的感染問題，則應采用有效的滅菌技術處理被污染的培養(yǎng)物，明確導致出現(xiàn)污染現(xiàn)象的具體原因，分離菌類，重新篩選菌落[1]。

2嚴格管控菌種傳代工作

在我國有關的管理制度中，對微生物菌種傳代與保存的全流程作業(yè)規(guī)范提出了明確要求，要切實保障菌種傳代工作的順利完成，需重點把握以下操作要點：首先，是復溶與接種處理菌種，工作人員在對其進行培養(yǎng)時，應嚴格參照說明書上標明的具體要求，完成對菌種的復壯處理后，向平板上予以直接轉(zhuǎn)移，營造適宜的室溫環(huán)境，培養(yǎng)菌種。然后，是轉(zhuǎn)移和分離單個菌落，以此形成第二代菌落。在鑒定菌種的過程中，工作人員還需運用適宜的技術方法，在第一時間內(nèi)對菌種進行特性鑒定，然后從中選擇出適宜的菌落，妥善轉(zhuǎn)移并放置到甘油冷凍管內(nèi)，作為工作菌種。在傳代操作的整個過程中，第二代菌種是被從正常保存的菌種，第三代菌種則為工作菌種。一般情況下，工作人員需要冷凍保存處理二代菌種，選擇并應在適宜溫度的環(huán)境下培養(yǎng)三代菌種，并將其直接應用到一系列的實驗過程中。若是需要在低溫、冷凍等環(huán)境條件下保存第三代菌種，則應及時滅菌處理二代菌種，并將其及時丟棄，在完成以上處理流程后，接下來培養(yǎng)第四代、第五代菌種時，均需重新開啟安瓶。對于微生物實驗工作來說，只有嚴格參照規(guī)范化系統(tǒng)化的菌種傳代作業(yè)流程，才能提高菌種的使用效率，確保其得到妥善科學的保存管理[2]。

3運用科學方法保存常用菌種

保存處理微生物菌種，營造適宜的存儲環(huán)境，需要把握以下基本準則：（1）保持環(huán)境不變的情況下，科學有效地保護菌種，避免其形態(tài)發(fā)生改變。（2）當菌種處于不死狀態(tài)下時，應確保其仍然可以保持自身的生存活力，避免其出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。（3）為菌種的純潔性提供可靠保障，避免外部環(huán)境、人為操作等因素污染菌種，亦或是使其活性受到不利影響。（3）菌種所屬的類型不同，其對環(huán)境提出的條件與要求也會存在較大差異，通常情況下，工作人員需結合實驗室內(nèi)的實際環(huán)境條件，了解并把握不同類型菌種的生長特點，以及對應的適宜有效的保存方式，做好對常用菌種的保存與管理工作，提高各項保管與存放方法的實效性[3]。

測定并識別菌落，根據(jù)所檢測菌種的技術資料，每個稀釋度取不同類型的代表菌落，通過涂片、染色、鏡檢等技術手段，確認有效菌。計算菌落，以出現(xiàn)20-300個菌落數(shù)的稀釋度的平板為計數(shù)標準，分別統(tǒng)計有效活菌數(shù)目和雜菌數(shù)目。

4總結菌種管理工作經(jīng)驗

無論是在實驗活動過程中使用菌種，還是對其實施系統(tǒng)化的管理與保護，均需要對質(zhì)量檢驗工作的貫徹落實提高重視，對于管理人員而言，不僅需要明確具體的項目目標與實踐方案，還需深入掌握完善化的作業(yè)規(guī)程，在完成一系列的使用、保存與管理工作后，及時地總結在自身實踐操作過程中的經(jīng)驗，以及存在的不足，這是全面提升微生物學實驗室管理工作水平的有效措施，也是切實推動菌種使用保存與管理工作高效發(fā)展的必要路徑。在正式實施各環(huán)節(jié)的管理工作時，工作人員應著重加強對有效期的把握，針對性地提高各環(huán)節(jié)的作業(yè)效率。通過實踐調(diào)研以及研究各項數(shù)據(jù)資料可以分析，甘油冷凍管的最佳冷凍時間在兩年左右，因此需結合實驗室的實際情況，以每兩年為基準，對其進行一次轉(zhuǎn)接計算。要完成第四代的轉(zhuǎn)接工作，工作人員需要采用正確的方法長期保存一支凍干管。當前，此種方法被廣泛應用于酵母菌、細菌等菌種的傳代處理中，要實現(xiàn)對真菌等其他類型細菌的科學傳代管理，還需積極引入并應用其他有效方法。

與其他微生物相比，菌種是一種特殊標準品，且在大部分標準說明下，許多品種的菌種被歸納為病原菌，因此，在實驗室處理此類特殊菌種時，需注重區(qū)分這些菌種和其他品種。例如，根據(jù)菌株對其他動物的傳染力度、致病力等為參照點，劃分并分類處理菌種，然后依托于專業(yè)的機構給予的技術幫助，提高對菌種的保存與管理成效。在正常環(huán)境下，實驗人員需在生物安全柜中運用專業(yè)的技術手段操作處理裸露在外的菌種，并做好有關實驗操作的記錄工作。

結束語：深入研究菌種的使用保存與管理方法，是全面提高微生物學實驗管理工作水平的必要路徑。在現(xiàn)代科學技術創(chuàng)新發(fā)展的時代背景下，微生物處理技術獲得有利的發(fā)展契機，推動菌種保管工作的規(guī)范化、流程化發(fā)展，意在貼合當前技術進步的發(fā)展趨勢，穩(wěn)定優(yōu)化微生物研究工作質(zhì)量，助力我國科學研究工作的現(xiàn)代化發(fā)展。

參考文獻：

[1]呂曉寧，段夢媛.淺析城市級公共空間設計對提升城市品質(zhì)的重要作用——以大校場機場跑道公園方案征集活動為例[J].城市環(huán)境設計，2020（06）：224-227.

[2]王瑤.人工智能背景下交互設計在城市公共空間中的應用研究[J].居舍，2020（36）：69-72.