不同妊娠狀態伊犁馬血清激素變化規律研究

袁鑫鑫，姚新奎,2,3，曾亞琦,2，王建文,2，孟 軍,2*，任萬路,2，王川坤,2，那貝·達尼亞爾

（1.新疆農業大學動物科學學院，新疆烏魯木齊 830052；2.新疆農業大學馬產業研究院，新疆烏魯木齊 830052；3.新疆馬繁育與運動生理重點實驗室，新疆烏魯木齊 830052）

新疆育馬業正處于加速轉型時期，擴大馬匹繁育生產規模，提高幼駒的培育水平和母馬繁殖成活率十分關鍵[1]。盡管馬獸醫學有所進步，但晚期胎兒死亡率高、流產等不良妊娠結局仍然是育馬業的主要問題[2]。在飼養環節，母馬與胎兒或胚胎的正常聯系受到損壞，從而使母馬妊娠停止而流產[3]。盧亞賓等[4]研究發現伊犁馬在妊娠前期發生流產時，血液中雌二醇（E2）、孕酮（P）波動較大，可作為診斷母馬早期是否受孕的依據。張秀坤等[5]研究發現三河馬在妊娠前期常由于內分泌調節作用紊亂而發生流產。陳敦金等[6]研究發現，母體甲狀腺（T4）水平與流產等不良妊娠結局相關，是一項重要的檢測指標。Marinescu 等[7]研究發現，產前壓力會導致孕婦皮質醇（COR）升高，并且與胎兒神經發育中斷、胎盤異常、自然流產或早產有關。王蘊慧等[8]研究發現，孕婦妊娠期胰島素（INS）水平增加會導致不良妊娠結局增加。因此，依據血清激素的變化可判斷妊娠母馬是否處于健康狀態，胎兒是否正常發育[9]。

目前，在妊娠馬中研究較多的為妊娠早期血清激素變化與妊娠結局的關系，而對于不同妊娠階段及產后多種激素的變化情況研究較少。本研究通過對流產伊犁馬與正常分娩伊犁馬在妊娠第205、318 天及產后第2 天血清相關激素水平進行檢測，探究伊犁馬在妊娠期間血清激素水平的變化，為伊犁馬在妊娠期發生不良妊娠結局相關研究提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 試驗于2019 年12 月—2020 年6 月進行，選取伊犁哈薩克自治州昭蘇馬場內21 匹懷孕及7 匹空懷伊犁馬，經馬場獸醫檢查馬匹狀態為健康，懷孕馬妊娠時間均為妊娠第203 天，年齡范圍在4～12 歲。試驗所選母馬均集中統一飼養管理，膘情相近，妊娠狀況良好。

1.2 試驗方法 根據母馬妊娠結局及妊娠狀態，將5 匹流產及16 匹正常分娩母馬分為流產組及正常分娩組；7匹空懷母馬為對照組。流產組或正常分娩組中流產母馬發生于妊娠第315～357 天。試驗采用靜脈不抗凝采血法，分別在妊娠第205、318 天及產后第2 天對母馬進行頸靜脈采血，每次采血5 mL，采集的血液立即以3 000 r/min離心20 min 后，取上層血清置于-20℃冰箱中待測。樣品送北京北方生物技術研究所檢測，通過XH6080 放免儀采用放射性免疫法分別檢測血清中INS、COR、P、T4、E2含量。

1.3 統計分析 試驗結果用Excel 軟件進行數據整理，使用SPSS 26.0 分析軟件對各組間血清激素指標運用One-Way ANOVA 方差分析以及Duncan's 多重比較。結果以平均值±標準誤來表示。

2 結果

2.1 不同妊娠狀態母馬血清激素水平變化 由表1 可知，妊娠第205 天空懷組COR 含量高于流產組和正常分娩組（P＜0.01），但流產組和正常分娩組無顯著差異。妊娠第205 天流產組和正常分娩組的E2含量高于空懷組（P＜0.01），而INS、P、T4含量無顯著變化。妊娠第318 天隨著胎兒發育，空懷組INS 含量高于流產組和正常分娩組（P＜0.01），COR 含量在各組間無顯著差異，流產組P 含量高于空懷組（P＜0.05），空懷組T4含量高于正常分娩組（P＜0.05）和流產組（P＜0.01），流產組和正常分娩組的E2含量高于空懷組（P＜0.01）。空懷組由于不存在分娩情況故不進行對比。產后第2 天正常分娩組T4高于流產組（P＜0.01），INS、COR、P、E2含量在流產組和正常分娩組之間無顯著性差異。

表1 空懷、流產及正常分娩母馬血清激素水平含量

2.2 5 種血清激素在妊娠時期的變化 如圖1-A 所示，空懷組INS 含量在妊娠第205、318 天無顯著差異，流產組INS 含量在產后第2 天高于妊娠第318 天（P＜0.05），正常分娩組妊娠第205 天INS 含量高于妊娠第318 天和產后第2 天。空懷組COR 含量在妊娠第205 天高于妊娠第318 天和產后第2 天（P＜0.01），流產組COR含量在產后第2 天出現升高（P＞0.05），正常妊娠組COR 含量在妊娠第205、318 天及產后第2 天均無顯著差異（圖1-B）。空懷組P 含量在妊娠第205、318 天無顯著差異，流產組、正常分娩組P 含量呈現先上升后下降的趨勢（圖1-C）。空懷組和正常分娩組的T4含量呈上升趨勢，流產組呈下降趨勢，各組T4含量在各個時期無顯著差異（圖1-D）。空懷組、流產組和正常分娩組的E2含量在整個時期內均呈下降趨勢，流產組E2含量為妊娠第205 天＞妊娠第318 天＞產后第2 天（P＜0.01），正常分娩組E2含量在妊娠第205 天高于妊娠第318 天及產后第2 天（P＜0.01）、妊娠第318 天高于產后第2 天（P＜0.05），空懷組下降不顯著（圖1-E）。

圖1 5 種血清激素在妊娠時期的變化

3 討論

3.1 不同妊娠狀態母馬血清激素對比分析 E2、P 水平增加是妊娠前期母馬完成胚胎附植并建立妊娠的標志[10]，本試驗中妊娠第205 天流產組和正常分娩組母馬的E2含量均極顯著高于空懷組，說明在妊娠前期母馬已成功完成胚胎附植并建立妊娠，導致E2水平升高[11]。Canisso[12]等監測了18 匹母馬在妊娠第100 天至馬駒足月體內E2的水平變化規律，發現在妊娠中期E2含量維持較高水平，與本試驗妊娠第205 天正常懷孕組和流產組的E2水平相似，這可能是此時胚胎在母馬體內正常生長，與空懷馬相比雌激素水平明顯升高。COR在應激狀態下可迅速升高，持續應激因素存在時血液中COR 會長時間地維持在較高水平[13]。本試驗中空懷組母馬可能在妊娠第205 天產生了應激，從而引發血清COR 含量升高。妊娠后期母馬已適應胎兒的生長發育[14]，胎兒營養需求量也隨胎齡的增加而增長，母體進入妊娠后期激素也處于不斷變化的一個狀態[15]。INS 是機體內唯一能使血糖降低的激素[16]，處于妊娠后期的妊娠母馬INS 含量極顯著低于空懷母馬，可能是妊娠后期母馬會優先將葡萄糖輸送給胎兒，保障胎兒對營養物質的需求，因此導致了母馬血液中的葡萄糖維持在較低水平，INS 含量也因此降低[17]。正常懷孕母馬在妊娠后期E2與P 水平均高于未懷孕母馬激素水平。此外，T4具有促進胎兒的腦、生殖器官和骨骼正常發育的作用，而在妊娠中后期胎兒還未能自身合成，需要母體供給[18]。因此本試驗中妊娠第318 天試驗組母馬血清T4水平降低，可能正是由于母馬將部分激素供給胎兒所致。研究發現，分娩啟動時，子宮內環境發生很大變化，就生殖激素而言，分娩時孕激素含量降低，雌激素含量急劇增加，分娩后孕激素、雌激素則迅速下降，產后INS、COR 含量均無顯著性變化[19-22]。T4含量在整個生命周期中變化很大，而T4分泌失衡可對生命健康造成嚴重不良影響[23]。而在本試驗中，流產組分娩后第2 天T4水平極顯著低于正常分娩組，可能是由于在妊娠后期流產組母馬出現病理現象導致甲狀腺激素分泌紊亂，內分泌失調，最終造成流產[24]。因此在妊娠后期可通過測定妊娠母馬體內甲狀腺激素含量，監測母馬妊娠狀況。

3.2 血清激素在妊娠期及產后的變化 母馬妊娠期血清激素水平的正常調控是保障胎兒能夠正常發育及分娩的必要條件，同時，母體本身的健康狀況亦是能否正常分娩的關鍵[25]。懷孕伊犁馬在整個妊娠期內，血液中INS、COR、P、T4和E2濃度存在動態變化過程。有研究發現，妊娠母馬血清INS 水平隨著妊娠時間的增加而下降[26]。本試驗中，隨著妊娠時間增加，正常分娩組和流產組INS 水平下降，可能是由于妊娠后期胎兒快速發育，需要從母體吸收大量葡萄糖作為營養物質，因此導致母體血清中葡萄糖含量降低，胰島素含量也因此而下降。但流產組的INS 含量在產后顯著升高，說明母體內存在大量葡萄糖，胎兒在子宮內長時間沒能獲得充足營養物質，導致胎兒發育不良，母馬最終流產。本試驗中，正常妊娠組在整個妊娠期COR 含量處于穩定狀態，而流產母馬COR 含量在產后第2 天出現升高，可能是在流產前母馬受到了應激，從而引起COR 含量升高，最終流產[27]。P 在母馬維持正常妊娠的過程中具有非常重要的作用，其水平變化對妊娠結局的預測具有重要的應用價值[28]。有研究監測了雌性藍狐在妊娠期血清中P 的變化規律，發現在妊娠后期達到最高，而在產后達到最低[29]。趙鵬鵬等[30]也檢測到圍產期雌性大熊貓分娩前P達到最高值后出現迅速下降，分娩完成后E2、P 下降至最低，此趨勢與本試驗結果一致。母體T4缺乏將會造成流產等不良妊娠結局的發生[22]。本試驗中，監測到流產母馬血清甲狀腺激素在整個妊娠期內呈現下降趨勢，這可能由于懷孕母馬出現甲狀腺功能減退導致母馬流產。

4 結論

本試驗結果顯示，伊犁馬血清激素含量在妊娠第205、318 天及產后第2 天均有不同變化，空懷母馬血清中除COR 含量外其余激素均無顯著性變化；正常分娩母馬INS 和E2含量在妊娠第205、318 天及產后第2天處于下降趨勢，T4含量處于上升趨勢，COR 含量無明顯變化，而P 含量出現先升高后下降的趨勢；流產母馬在產后第2 天的INS 和COR 含量相對于正常分娩組異常升高，而T4含量下降，此外P 和E2含量與正常妊娠組沒有顯著性變化。因此，在妊娠期間應定期對母馬進行血清激素等妊娠檢查，通過血清激素變化判斷胎兒是否在母馬體內正常生長發育，根據母馬血清激素變化及時采取相應措施，以防止母馬與胎兒或胚胎的正常聯系受到損壞導致不良妊娠結局。