甘肅栽培肉蓯蓉質量分析*

蘇學秀，楊世琴，張富嫻，賈存勤，楊 麗，陳小娟，滕澤學△

（1.甘肅省白銀市藥品檢驗檢測中心，甘肅 白銀 730900；2.甘肅匯勤生物科技有限公司，甘肅 白銀 730600）

肉蓯蓉為列當科植物肉蓯蓉Cistanche deserticolaY.C.Ma 的干燥帶鱗葉的肉質莖，有補腎陽、益精血、潤腸通便功效，主治腎陽不足、精血虧虛、陽痿不孕、腰膝酸軟、筋骨無力、腸燥便秘［1］。肉蓯蓉主要含有苯乙醇苷、環烯醚萜及苷、木脂素、多糖等成分［2］，其中松果菊苷和毛蕊花糖苷等苯乙醇苷類成分具有補腎陽作用［3］，常作為控制肉蓯蓉質量的指標性成分。本研究中對甘肅栽培肉蓯蓉藥材樣本的初加工方法進行了優選，并采用高效液相色譜法測定了其中松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量以及醇溶性浸出物總量，采用電感耦合等離子體質譜法測定其重金屬及有害元素（鉛、鎘、汞、砷、銅）的殘留量［4－9］，以評價肉蓯蓉的整體質量。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1260 型高效液相色譜儀（包括四元泵、自動進樣器、柱溫箱、檢測器）、8800 型電感耦合等離子體質譜儀（安捷倫科技有限公司）；101A－2 型電熱鼓風干燥箱（上海瑯軒儀器有限公司）；FA／JA 型電子天平（梅特勒儀器有限公司）；ETHOS UP 型消解儀（北京萊伯泰科公司，配備智能樣品處理器）；KQ－100DB 型超聲波情況儀（昆山市超聲儀器有限公司）；電熱蒸鍋（周村鑫旭電器廠，功率為2 100 W）。

1.2 試藥

松果菊苷對照品（批號為111670－201907，含量為91.8%），毛蕊花糖苷對照品（批號為111530－201713，含量為92.5%），均購自中國食品藥品檢定研究院；鉛、鎘、砷、銅標準液（10 μg／mL，安捷倫科技公司），汞標準液（1 000 μg／mL，中國計量科學研究院）；甲醇、硝酸為色譜純，甲酸、過氧化氫均為分析純，水為超純水；肉蓯蓉藥材為2018 年10 月采挖于甘肅省酒泉市、張掖市、武威市和白銀市肉蓯蓉種植基地，經賈存勤正高級工程師鑒定為正品。

2 方法與結果

2.1 產地加工

藥材樣品制備：取肉蓯蓉鮮品，去掉頂部［1］，用軟毛刷刷洗干凈，瀝干水分，以切片（段）曬干、陰干、烘干、微波干燥、蒸制及整枝蒸制方式制備藥材樣品［10－13］。

2.2 水分測定

取28 批藥材樣品，每批3 份，按2020 年版《中國藥典》中有關烘干法的水分測定方法測定水分，并計算每批的平均值。結果見表1。

表1 28 批次藥材樣品水分、含量、醇溶性浸出物總量測定結果（%，n＝3）Tab.1 Determination results of moisture，content and total extract in 28 batches of medicinal materials（%，n＝3）

2.3 含量測定

2.3.1 色譜條件

色譜柱：AgilentXDB－C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：甲醇（A）－0.1%甲酸水溶液（B），梯度洗脫（洗脫程序見表2）；柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL／min；檢測波長：330 nm；進樣量：10 μL。

2.3.2 溶液制備

稱取松果菊苷對照品、毛蕊花糖苷對照品各適量，精密稱定，加50%甲醇，制成每1 mL 各含0.2 mg 的混合對照品溶液［1］。取藥材樣品粉末約1 g，精密稱定，置100 mL 棕色容量瓶中，精密加入50 %甲醇50 mL，密塞，搖勻，稱定質量，浸泡30 min，超聲（功率250 W，頻率35 kHz）處理40 min，放冷，再稱定質量，加50%甲醇補足減失的質量，搖勻，靜置，取上清液，濾過，取續濾液，即得供試品溶液［1］。

2.3.3 方法學考察

系統適用性試驗：精密吸取2.3.2 項下混合對照品溶液、供試品溶液各適量，按2.3.1 項下色譜條件進樣測定，記錄色譜圖。結果理論板數按松果菊苷峰、毛蕊花糖苷峰計均應不低于3 000，分離度均大于1.5，基線分離良好。詳見圖1。

1.松果菊苷 2.毛蕊花糖苷A.混合對照品溶液 B.供試品溶液圖1 高效液相色譜圖1.echinacoside 2.verbascosideA.Mixed reference sulution B.Test solutionFig.1 HPLC chromatograms

線性關系考察：精密吸取松果菊苷、毛蕊花糖苷混合對照品溶液2，5，10，15，20 μL 進樣測定。以峰面積積分值為縱坐標（Y）、進樣量為橫坐標（μg，X）進行線性回歸，得回歸方程，松果菊苷為Y1＝1.40×106X1－7.53×103（r＝1.000 0，n＝5），毛蕊花糖苷為1.94×106X－1.28×103（r＝1.000 0，n＝5）。結果表明，松果菊苷、毛蕊花糖苷進樣量分別在0.392 5～3.925 4 μg和0.388 9～3.888 7 μg 范圍內與峰面積積分值線性關系良好。

精密度試驗：精密吸取2.3.2 項下混合對照品溶液10 μL，按2.3.1 項下色譜條件，連續進樣6 次，測定。結果松果菊苷、毛蕊花糖苷峰面積積分值的RSD分別為0.24%和0.22%（n＝6），表明儀器精密度良好。

穩定性試驗：精密吸取2.3.2 項下供試品溶液10 μL，室溫下分別于0，3，5，7，9，24 h 時進樣測定。結果松果菊苷、毛蕊花糖苷峰面積積分值的RSD分別為0.28%和0.30%（n＝6），表明供試品溶液在24 h 內穩定。

重復性試驗：稱取肉蓯蓉（編號24）粉末1 g，6 份，精密稱定，依法制備供試品溶液，按2.3.1 項下色譜條件進樣測定，計算含量。結果松果菊苷、毛蕊花糖苷含量平均值分別為1.18%和0.18%，RSD分別為0.06%和0.48%（n＝6），表明方法重復性良好。

加樣回收試驗：取已知含量的樣品粉末9 份，每份0.5 g，精密稱定，加入高中低質量濃度的單一對照品溶液，按供試品制備方法制備溶液，按2.3.1 項下色譜條件進樣測定，記錄峰面積并計算。結果松果菊苷、毛蕊花糖苷加樣回收率分別為104.78%和99.37%，RSD分別為0.20%和1.66%（n＝9）。

2.3.4 樣品含量測定

取28 批藥材樣品各適量，分別按2.3.2 項下方法制備供試品溶液，供試品溶液各10 μL，按2.3.1 項下色譜條件進樣測定，平行測定3 次，計算松果菊苷、毛蕊花糖苷含量及總量。同法取84 份藥材樣品粉末，按2020 年版《中國藥典（四部）》中的浸出物測定方法，以稀乙醇為溶劑測定醇溶性浸出物總量［14］。每批樣品的平均值按干燥品計。結果見表1。

2.4 重金屬及有害元素殘留量測定

取蒸制陰干、烘干及自然陰干3 種初加工方法處理的12 批藥材樣品，按2020 年版《中國藥典（四部）》通則2321，采用電感耦合等離子體質譜儀（射頻功率：1550W；載氣流速：0.99 L／min；輔助氣體流速：0.90 L／min；等離子體流速：15.00 L／min；矩管水平位置－0.20 mm、垂直位置0.10 mm；蠕動泵轉速：0.1 r／s；霧化氣溫度：2.02 ℃；采樣深度：8 mm）測定鉛、鎘、砷、汞、銅含量［14］。結果見表3。

表3 12 批藥材樣品中鉛、鎘、汞、砷、銅含量測定結果（mg／kg）Tab.3 Determination results of lead，cadmium，mercury，arsenic and copper in 12 batches of Cistanches Herba（mg／kg）

3 討論

3.1 含量

藥材樣品中松果菊苷和毛蕊花糖苷含量平均值排序如下，蒸制整枝品＞蒸制切片品＞整枝陰干品＞切片烘干品＞切段曬干品＞切片微波品＞切片陰干品，除切片陰干和切片微波干燥樣品含量較低外，其余初加工樣品皆為藥典標準（不得少于0.30%）［1］的2～8 倍；其中酒泉市金塔縣的藥材樣品在各種加工處理方法下的含量均高于藥典標準8 倍，且高于其他產地加工品。

3.2 醇溶性浸出物總量

各方法加工后樣品醇溶性浸出物總量平均值，蒸制整枝品（56.12%）、蒸制切片品（56.50%）、整枝陰干品（56.14%）、切段曬干品（55.77%）、切片烘干品（56.74%）、切片微波品（56.04%）、切片陰干品（56.35%）均無顯著差異，且均高于2020 年版《中國藥典（一部）》規定的“應不得少于35.0%”［1］。

3.3 重金屬及有害元素殘留量

12 批藥材樣品中重金屬及有害元素殘留量測定結果顯示，鉛、鎘、汞、砷、銅檢測值均明顯小于2020 年版《中國藥典（一部）》的規定值［1］。

3.4 加工方法評價

本研究結果顯示，初加工方法對肉蓯蓉藥材樣品中主要活性成分松果菊苷和毛蕊花糖苷的含量有顯著影響［15－20］，除切段曬干、切片陰干品及切片微波干燥樣品2 個成分含量較低但可達到2020 年版《中國藥典》規定的水平外，其余加工藥材樣品高于2020 年版《中國藥典》規定限度的2～8 倍不等；切段曬干和切片陰干品含量偏低與未進行加熱殺霉保苷處理有關，切片陰干可能還與切片較薄（3～4 mm）有關，切片微波干燥樣品含量較低可能與切片較薄（3～4 mm）及微波照射時間短（5 min）有關，有待進一步研究；蒸制整枝的指標性成分含量最高，建議作為肉蓯蓉的初加工方法推廣應用；酒泉市金塔縣的各種初加工品含量皆高于其他產區，這可能與該區域的自然環境（位于鼎新盆地）適合肉蓯蓉的生產有關，有待進一步研究。初加工方法和產地對醇溶性浸出物總量無顯著影響，皆達到2020 年版《中國藥典》規定限度。肉蓯蓉重金屬及有害元素污染程度較低，安全性高。

3.5 小結

甘肅栽培肉蓯蓉質量可達到藥典標準，安全性高，可供藥用，建議甘肅省大力發展肉蓯蓉種植業；蒸制整枝的指標性成分含量最高，建議作為肉蓯蓉的初加工方法推廣應用；酒泉地區質量較優，建議作為酒泉地區的優勢產業大力開發。本研究為甘肅栽培肉蓯蓉的初加工優選、質量評價提供了科學的依據。