血管內皮生長因子、轉錄因子-21在宮頸癌中的表達及對放療敏感性的影響

弋振營，徐志巧，楊艷萍，李寧，申鳳乾，田永巍

開封市中心醫院腫瘤科，河南 開封 475000

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤，占生殖系統惡性腫瘤50%以上，發病率僅次于乳腺癌，病死率居女性惡性腫瘤首位。目前，宮頸癌病因尚未完全明確，但臨床認為，其與環境、吸煙、多孕多產、人乳頭瘤病毒感染等因素有關。多數宮頸癌患者缺乏典型的臨床癥狀，確診時多已屬于中晚期，錯過了最佳的手術治療時機，放療成為此類患者重要的治療方案，但由于不同個體對放療的敏感性不同，放療療效存在差異，因此，放療無法使所有患者均獲益，尋求敏感的預測宮頸癌放療療效的標志物，對預測患者臨床療效、開展個體化治療、改善患者的預后十分重要。血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是血管生成相關的特異性生長因子，宮頸惡性腫瘤增殖生長后能被激活，其活性能提高腫瘤細胞對放療的抵抗力，既往諸多研究證實，腫瘤組織中VEGF陽性表達患者的放療療效更差，認為其與放療抵抗有一定聯系。轉錄因子-21（transcription factor-21，TCF-21）是一種抑癌因子，與腫瘤生長密切相關，在肺癌、胃癌等多種腫瘤組織中低表達，有研究表明，TCF-21高表達可增加腫瘤細胞的放療敏感性，促進細胞凋亡。既往關于宮頸癌組織中VEGF與放療敏感性的相關報道較多，但TCF-21對宮頸癌放療敏感性影響的文獻報道卻較少，因此，本研究探討宮頸癌組織中VEGF、TCF-21對放療敏感性的預測價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2019年1月開封市中心醫院收治的宮頸癌患者。納入標準：①符合《宮頸癌診斷與治療指南》（第四版）中關于宮頸癌的診斷標準，均經病理學或細胞學檢查證實；②國際婦產科聯盟（International Federation of Gynecology and Obstetrics，FIGO）分期為Ⅱb～Ⅲb期；③卡氏功能狀態（Karnofsky performance status，KPS）評分≥70分；④具有放療指征，具有可測量的病灶；⑤病歷及隨訪資料完整。排除標準：①合并其他原發惡性腫瘤；②合并血液系統或免疫系統疾病；③急性或慢性感染，或心、腦、肝、腎等重要器官嚴重功能障礙；④合并精神疾病；⑤生存期不足3個月；⑥哺乳期或妊娠期女性。依據納入和排除標準，本研究共納入120例宮頸癌患者，年齡33～58歲，平均（47.09±9.11）歲；病理類型：鱗狀細胞癌89例，腺癌31例；FIGO分期：Ⅱb期29例，Ⅲa期58例，Ⅲb期33例；分化程度：低分化28例，中分化62例，高分化30例。

1.2 放療方法

所有患者均接受放療，采用模擬定位機確定放療部位后，使用西門子Primus直線加速器（具有6MV高能X線）對患者進行全盆腔不規則前后野等中心放療，并行直腸鉛擋，補充腔內放療，盆腔前后野位置55 Gy，盆腔中央部位25 Gy；若宮旁浸潤出現團塊，野外照射劑量為10～15 Gy；若陰道浸潤出現團塊狀，照射劑量為32～48 Gy，每周放療1次，共放療5次。

1.3 免疫組化法檢測宮頸癌組織中VEGF、TCF-21表達情況

取120例宮頸癌患者的宮頸癌組織，40 g/L的多聚甲醛溶液固定，時間＞24 h，完成后脫水、包埋、切片6片，每片4 μm，其中1片進行蘇木素-伊紅染色，其他切片進行免疫組化法染色，常規脫蠟處理后 微 波爐 加 熱 96℃，10～15 min，參考GK500705-DAKO-免疫組化檢測試劑盒說明書完成其他步驟，抗體選擇兔抗VEGF多克隆抗體及兔抗TCF-21多克隆抗體。免疫組織化學染色后細胞質或胞膜染成棕褐色或棕黃色即判定為VEGF、TCF-21表達陽性。

1.4 觀察指標和評價標準

①依據實體瘤療效評價標準（response evaluation criteria in solid tumor，RECIST）評估宮頸癌患者的放療療效：完全緩解（complete response，CR），CT、MRI等影像學檢查未見腫瘤或僅見條索狀影；部分緩解（partial response，PR），影像學檢查顯示腫瘤明顯縮小，腫瘤最大垂直直徑乘積減少≥30%；疾病穩定（stable disease，SD），影像學結果無明顯變化，腫瘤最大垂直直徑乘積減少＜30%或增大＜20%；疾病進展（progressive disease，PD），影像學結果顯示有新腫瘤灶出現，腫瘤最大垂直直徑乘積增大≥20%。有效率（%）=（完全緩解+部分緩解）例數/總例數×100%。②所有患者放療后行外周靜脈采血3～5 ml，以3000 r/min離心15 min，離心半徑15 cm，收集血清，于-20℃低溫保存，采用酶聯免疫吸附法檢測血清腫瘤標志物水平，包括鱗狀細胞癌相關抗原（squamous cell carcinoma-related antigen，SCC-Ag）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）、糖類抗原 72-4（carbohydrate antigen 72-4，CA72-4）。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 VEGF、TCF-21表達情況的比較

120例宮頸癌患者宮頸癌組織中，VEGF陽性表達83例，陽性表達率為69.17%（83/120），TCF-21陽性表達34例，陽性表達率為28.33%（34/120）。

2.2 放療療效的比較

VEGF陽性表達宮頸癌患者的放療總有效率為63.86%（53/83），明顯低于VEGF陰性表達患者的97.30%（36/37），差異有統計學意義（

χ

=14.938，

P

＜0.01）。TCF-21陽性表達宮頸癌患者的放療總有效率為94.12%（32/34），明顯高于TCF-21陰性表達患者的60.47%（52/86），差異有統計學意義（

χ

=13.141，

P

＜0.01）。（表1、表2）

表1 不同VEGF表達情況宮頸癌患者的放療療效[ n（%）]*

表2 不同TCF-21表達情況宮頸癌患者的放療療效[ n（%）]*

2.3 血清腫瘤標志物的比較

VEGF陽性表達宮頸癌患者血清SCC-Ag、CEA、CA72-4水平均明顯高于VEGF陰性表達患者，TCF-21陽性表達宮頸癌患者血清SCC-Ag、CEA、CA72-4水平均明顯低于TCF-21陰性表達患者，差異均有統計學意義（

P

＜0.01）。（表3、表4）

表3 不同VEGF表達情況宮頸癌患者血清腫瘤標志物水平的比較（±s）

表4 不同TCF-21表達情況宮頸癌患者血清腫瘤標志物水平的比較（±s）

3 討論

宮頸癌好發于中年女性，調查研究顯示，中國每年新增宮頸癌病例高達10萬例，且隨著生活習慣和飲食結構的變化，宮頸癌的患病率呈逐年上升及年輕化趨勢。早期診療是改善患者預后的關鍵，放療中晚期宮頸癌患重要的輔助治療手段，提高放療敏感性對改善放療療效至關重要。陸曉和冼磊的研究指出，肺腺癌細胞中TCF-21過表達后，放療可迅速減小裸鼠成瘤體積，促進腫瘤細胞凋亡，表明TCF-21表達能夠促進腫瘤細胞凋亡，增加放療敏感性。VEGF是重要的血管內皮生長因子，具有促進血管內皮細胞增殖、增加血管通透性、維持血管完整的作用。腫瘤細胞生長、增殖過程中需要氧及營養成分，可自行分泌促血管生成因子，以促進腫瘤新生血管生成，而VEGF能夠促進腫瘤細胞的增殖及轉移，加重病情。既往多項研究指出，VEGF在肺癌、大腸癌、肝癌等惡性腫瘤中均成高表達，具有促進腫瘤細胞增殖、轉移的作用，能夠預測腫瘤患者的臨床療效及預后。

本研究結果顯示，120例宮頸癌患者中，VEGF陽性表達83例，陰性表達37例，VEGF陽性表達宮頸癌患者的放療總有效率為63.86%，明顯低于VEGF現陰性表達患者的97.30%，提示VEGF陽性表達患者對放療的敏感性更低，放療療效更差。有研究表明，乏氧細胞是腫瘤細胞放療敏感性下降的重要原因，缺氧能使腫瘤細胞的部分基因及蛋白合成或表達上調，其中包括VEGF，而基因或蛋白的變化可使腫瘤細胞適應缺氧環境，增加自身侵襲性及對放化療的抗拒性，因此，放化療敏感性降低，療效變差。同時，本研究結果顯示，120例宮頸癌患者中，TCF-21陽性表達34例，陰性表達86例，TCF-21陽性表達宮頸癌患者的放療有效率為94.12%，明顯高于TCF-21陰性表達患者的60.47%，表明TCF-21陽性表達能夠提高放療敏感性及療效。既往研究表明，TCF-21在腎癌、乳腺癌、膀胱癌等惡性腫瘤組織中表達下調，且與腫瘤細胞的多種生物學特性相關，與本研究結果基本相符，證實了

TCF-21

是一種抑癌基因，能夠抑制腫瘤細胞增殖并促進其凋亡。腫瘤細胞的凋亡與多種基因的嚴格調控密切相關，是一系列蛋白的復雜調控結果，蛋白激酶B（protein kinase B，PKB，又稱AKT）信號通路在多種組織及器官中發揮生物學調控作用，并參與細胞生長、凋亡及腫瘤細胞對放療敏感性等過程，TCF-21能夠抑制AKT信號通路，提高宮頸癌細胞對放療的敏感性，促進腫瘤細胞凋亡，因此，TCF-21陽性表達患者的放療療效更佳。

SCC-Ag、CEA及CA72-4均是腫瘤細胞或腫瘤宿主細胞的代謝產物，其水平反映腫瘤進展，相關研究指出，宮頸癌患者中SCC-Ag、CEA、CA72-4水平均明顯高于健康者，可作為病情評估的特異性指標。本研究選取上述三個指標評估放療療效，結果顯示，VEGF陽性表達宮頸癌患者的放療有效率為63.86%，明顯低于VEGF陰性表達患者的97.30%；TCF-21陽性表達宮頸癌患者的放療有效率為94.12%，明顯高于TCF-21陰性表達患者的60.47%。提示VEGF及TCF-21均與放化療療效密切相關，但VEGF陽性表達宮頸癌患者的血清SCC-Ag、CEA、CA72-4水平均明顯高于VEGF陰性患者，TCF-21陽性表達宮頸癌患者血清SCC-Ag、CEA、CA72-4水平均明顯低于TCF-21陰性表達患者，進一步驗證了上述研究，表明TCF-21陽性表達能夠提高放療敏感性及療效，降低血清腫瘤標志物水平，而VEGF陽性表達則會降低放療敏感性及療效。但本研究仍存在一些不足，如未對患者進行長期隨訪，尚有待廣大學者進一步延長隨訪時間，以驗證TCF-21、VEGF的表達對宮頸癌患者遠期療效的影響。

綜上所述，TCF-21可促進宮頸癌細胞凋亡，對放療誘導的宮頸癌細胞凋亡有協同作用，增加了宮頸癌患者對放療的敏感性；VEGF能夠增加宮頸癌細胞侵襲性及放療抵抗性，降低放療敏感性。