乳腺浸潤性癌中磷酸化細胞外信號凋節激酶與CXC趨化因子配體14的表達及臨床診斷意義

那瀚勻

（丹東市第一醫院，病理科，遼寧 丹東 118000）

乳腺癌是全球女性常見的惡性腫瘤，占女性惡性腫瘤死因中的首位[1]。據2010年國際癌癥研究所發布的數據顯示，全球每年乳腺癌的新發病例達167.1萬，死亡52.2萬，發展中國家乳腺癌的發病率稍低于歐美等發達國家[2]。而在我國，近10年里乳腺癌的發病率呈升高趨勢，發病率約為37.8/10萬，病死率約為9.2/10萬[3]。近些年對于乳腺癌分子機制的研究取得一定的進展，為乳腺癌的早期診斷及靶向治療提供了越來越多的可能性。細胞外信號凋節激酶（P-ERK）對機體的多種生理活動具有重要的調控作用，P-ERK是其活性形式。相關研究表明，P-ERK具有調節細胞周期、促進細胞增殖、分化、抑制細胞凋亡等作用[4-5]。CXC趨化因子配體14（CXCL14）是CXC類趨化因子家族中的一員，具有趨化自然殺傷細胞、巨噬細胞、B細胞、單核細胞核、不成熟樹突狀細胞以及抗血管生成等作用[6-7]。本研究旨在探討乳腺浸潤性癌中P-ERK與CXCL14的表達及臨床診斷意義，報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 收集2018年1月至2019年4月47份乳腺浸潤性癌手術或穿刺活檢組織標本及30份癌旁正常乳腺組織標本，術前均未接受過放、化療及免疫治療。所有標本一經離體，即經福爾馬林固定，并包埋入石蠟，4 μm連續切片，備用。

1.2 方法 采用免疫組化SP法檢測標本中P-ERK與CXCL14的表達情況。SP試劑盒為福州邁新公司產品；兔抗人P-ERK單克隆抗體為英國Abcam公司產品；兔抗人CXCL14單克隆抗體為北京歐盟公司產品。操作按試劑盒說明進行，包括脫蠟、水化，高壓抗原修復，3% H2O2孵育，山羊血清封閉，滴加一抗室溫孵育1.0 h，二抗室溫孵育0.5 h，DAB顯色，蘇木素復染，鹽酸乙醇分化，脫水、二甲苯透明、封片等操作。結果判定：由2位觀察者采用雙盲法對結果進行判定，顯微鏡400倍視野下，20個視野，P-ERK為細胞質或細胞核染色，CXCL14為細胞質染色，計數500～1 000個細胞中的陽性細胞，陽性細胞數所占的比例為0～5%為（-），占6%～25%為（+），占26%～50%為（++），＞50%為（+++）。

1.3 統計學方法 采用SPSS 18.0統計軟件分析處理數據，計數資料以率表示，行χ2檢驗；計量資料以（±s）表示，行t檢驗，相關性分析采用非參數Spearman等級相關檢驗；P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 P-ERK與CXCL14在不同乳腺組織中的表達情況 P-ERK在乳腺癌組織中的表達陽性率明顯高于正常乳腺組織，而CXCL14在乳腺癌組織中的表達陽性率明顯低于正常乳腺組織，差異有統計學意義（P＜0.05）。相關性分析顯示，P-ERK與CXCL14的表達呈負相關（r=-0.426，P＜0.05）。見表1。

表1 P-ERK與CXCL14在不同乳腺組織中的表達情況[n（%）]

2.2 P-ERK與CXCL14與乳腺浸潤性癌臨床病理特征的關系 P-ERK在TNMⅠ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期中的表達陽性分別為44.0%（11/25）、63.6%（14/22），在中高分化、低分化中的表達陽性分別為57.6%（19/33）、43.9%（6/14），在有淋巴結轉移、無淋巴結轉移中的表達陽性分別為71.4%（15/21）、38.5%（10/26），P-ERK在TNM Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移中的表達陽性率明顯高于TNM Ⅲ～Ⅳ期、無淋巴結轉移，差異有統計學意義（P＜0.05）。CXCL14在TNM Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期中的表達陽性分別為40.0%（10/25）、22.7%（5/22），在中高分化、低分化中的表達陽性分別為33.3%（11/33）、28.6%（4/14），在有淋巴結轉移、無淋巴結轉移中的表達陽性分別為71.4%（5/21）、38.5%（10/26），CXCL14在TNM Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移中的表達陽性率明顯低于TNM Ⅲ～Ⅳ期、無淋巴結轉移，差異有統計學意義（P＜0.05）。

3 討論

ERK信號途徑因可正性調控的腫瘤生長而成為近年研究的熱點。研究表明，ERK的過度磷酸化對惡性腫瘤腫瘤的發生及侵襲、轉移產生了重要作用[8]。在宮頸癌中，ERK信號通路可通過參與Ras基因突變而促進腫瘤細胞增殖，在宮頸腫瘤向宮頸浸潤癌進展的這一過程中，P-ERK的表達逐漸增強[9]。體外試驗表明，GPR30-EGFR-ERKl/2信號通路可能是雙酚A誘導乳腺癌細胞增殖的通路之一[10]。動物實驗表明，P-ERK密切參與了乳腺癌細胞成瘤及侵襲、轉移的過程[11]。本研究結果顯示，P-ERK在乳腺癌組織中的表達陽性率明顯高于正常乳腺組織，且P-ERK在TNM Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移中的表達陽性率明顯高于TNM Ⅲ～Ⅳ期、無淋巴結轉移，再次提示P-ERK參與了乳腺浸潤性癌的發病過程，并能預測乳腺浸潤性癌的惡性程度，對乳腺浸潤性癌的診斷及術前評估有所幫助。

CXCL14在正常組織中一般呈高表達。研究表明，CXCL14表達缺失與多種惡性腫瘤的生長密切相關[12]。CXCL14可能通過宿主—腫瘤的免疫反應來達到抗腫瘤的目的[13]。CXCL14可通過抑制實體瘤新生血管的生成發揮抗腫瘤作用，CXCL14低表達有助于腫瘤血管生成，從而促進腫瘤細胞的增值、侵襲及轉移[14-15]。本研究結果顯示，CXCL14在乳腺癌組織中的表達陽性率明顯低于正常乳腺組織，同時CXCL14在TNM Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移中的表達陽性率明顯低于TNM Ⅲ～Ⅳ期、無淋巴結轉移。上述結果說明，CXCL14同樣對乳腺浸潤性癌的發生、發展有重要意義。相關性分析顯示，P-ERK與CXCL14的表達呈負相關（r=-0.426），提示通過調控ERK信號通路可能對CXCL14的表達有調節作用，從而發揮抗腫瘤作用。

綜上所述，乳腺浸潤性癌中P-ERK呈過度表達，而CXCL14表達下調，且二者呈負性相關；二者對乳腺浸潤性癌的生物學行為有預測價值，對乳腺浸潤性癌的診斷有潛在的前景。