武彩紅,邱樹磊,劉劍華,劉 莉,袁 橙,陸 輝*,劉 浩
(1.江蘇農牧科技職業學院,江蘇泰州 225300;2.泰州醫藥高新技術產業開發區鳳凰畜牧獸醫站,江蘇泰州 225300)
養豬業是畜禽養殖的重要組成部分,經濟新常態下,我國養豬業正朝著規模化、智能化和特色化方向發展。但當前我國養豬業正面臨三大瓶頸,豬只飼養效率低、免疫力低和對激素、抗生素過度依賴。自抗生素作為飼料添加劑被應用于養殖業已70多年,雖促進了養殖業的快速發展,但也帶來了動物耐藥、動物性食品質量安全、生態環境污染等一系列問題,嚴重威脅人類健康和生命(王蕾蕾和許金新,2021)。在這樣的背景下,農業農村部194號公告要求,我國從2020年1月1日起退出除中藥外的所有促生長類藥物飼料添加劑品種。
隨著飼料禁抗的推行,豬病特別是腸道疾病易發,而仔豬抵抗力低,腸道發育尚未完全,更易發生腹瀉(陳維和譚濤,2021)。母豬健康狀態及免疫功能是影響哺乳仔豬健康成長的重要因素(郭劍英等,2014)。因此,為維持和提高養豬生產效益,如何突破養豬業瓶頸,選擇合適的替抗方案備受關注。中藥作為添加劑具有獨特優勢,具有來源天然、功能多樣、安全可靠、經濟環保等特點。許多研究表明,中草藥及其提取物具有抗菌、抗病毒,提高動物機體免疫力等作用(馬洪第等,2011)。因此,本試驗在臨產母豬日糧中添加復方中藥,研究其對母豬免疫力及仔豬腹瀉的影響。
1.1 試驗動物和分組 試驗將12只健康、臨產前1個月母豬隨機分為4組,每組3只,1組為對照組,每天飼喂正常日糧;2~4組分別為低、中和高劑量復方中藥組,在日糧中分別添加0.3、0.6和0.9 g/kg復方中藥。試驗期內,母豬及仔豬的日常管理均按照日常飼養管理執行。
分別在試驗開始后第0、10、20和30天母豬空腹耳緣靜脈采集血液,將其分為2份,一份用于分離血清,-20℃保存,用于體液免疫指標測定;另一份為EDTA抗凝血,用于細胞免疫指標測定。
1.2 復方中藥組方及制備 主藥博落回、澤瀉、泡桐花、馬齒莧、葛根、黃芪等按照一定比例混合后粉碎,然后于溫箱中烘干后分裝,密封、避光保存備用。
1.3 方法
1.3.1 體液免疫測定方法 按照豬IgG ELASA檢測試劑盒說明書測定特異性IgG含量。
1.3.2 細胞免疫測定方法 參照武彩紅等(2017)方法,抗凝血經裂解、離心和固定處理后,采用流式細胞儀測定外周血淋巴細胞亞群CD3+含量和CD4+/CD8+值。
1.3.3 仔豬腹瀉評價方法 出生后14d為仔豬腹瀉試驗期。仔豬腹瀉率為腹瀉仔豬數占供試總仔豬數的百分率;腹瀉指數為仔豬糞便評分與供試總仔豬數的比值。對仔豬腹瀉評分參照顏誠等(2012)方法,外觀條形或粒狀糞便,評為0分;軟糞、成形,評為1分;稠狀、不成形、糞水無分離現象,評為2分;不成形、糞水分離,評為3分。
1.4 數據處理 試驗數據采用SPSS統計軟件中的ANOVA進行統計分析。
2.1 日糧中添加復方中藥對母豬血清IgG含量的影響 由圖1可見,添加復方中藥后第10天,各給藥組血清IgG含量與對照組無顯著差異(P>0.05);至第20和30天時,所有給藥組血清IgG含量均顯著高于對照組(P<0.05),但在第20和30天時,低、中劑量組較高劑量組均增加明顯。

圖1 日糧中添加復方中藥對母豬血清IgG含量的影響
2.2 日糧中添加復方中藥對母豬CD3+含量和CD4+/CD8+值的影響 由圖2可知,添加復方中藥后第10天,各給藥組血液CD3+含量與對照組無顯著差異(P>0.05);至第20和30天時,所有給藥組血液CD3+含量均顯著高于對照組(P<0.05),但以中劑量組較低、高劑量組升高更為明顯。

圖2 日糧中添加復方中藥對母豬CD3+含量的影響
由圖3可知,添加復方中藥后,低劑量組僅在第30天CD4+/CD8+值顯著高于對照組(P< 0.05),高劑量僅在 20d時 CD4+/CD8+值顯著高于對照組(P<0.05),而中劑量組在用藥后各測定日齡CD4+/CD8+值均顯著高于對照組(P<0.05)。

圖3 日糧中添加復方中藥對母豬CD4+/CD8+的影響
2.3 日糧中添加復方中藥對仔豬腹瀉的影響從圖4可知,低劑量給藥組仔豬腹瀉率為12.49%,與對照組仔豬腹瀉率(14.76%)無顯著差異(P>0.05);中劑量組和高劑量組仔豬腹瀉率分別為9.78%和11.4%,均顯著低于對照組(P<0.05);給藥組間相比,中劑量組仔豬腹瀉率顯著低于其他兩組,也存在顯著差異(P<0.05)。

圖4 日糧中添加復方中藥對仔豬腹瀉率的影響
從圖5可知,各組間仔豬腹瀉指數均存在統計學差異(P<0.05)。低、中、高劑量組仔豬腹瀉指數分別為0.30、0.19和0.26,均顯著低于對照組(0.41,P<0.05)。各給藥組之間仔豬腹瀉指數也具有統計學差異(P<0.05)。

圖5 日糧中添加復方中藥對仔豬腹瀉指數的影響
初生仔豬消化器官未發育完全,體溫調節機能不全,免疫力低下,很容易受到致病因子侵襲,生產實踐中尤以仔豬腹瀉最為常見,不僅影響仔豬存活率,而且嚴重影響其后期的生長性能,成為制約養豬業健康發展的主要疾病之一。母豬健康狀況很大程度決定了仔豬體況,因此,許多學者提出“母源療法”(王榮梅等,2015;蘇榮勝等,2014;顏誠,2012;盤春秀,2007)。本試驗根據臨產母豬及初始仔豬的生理特點,根據中藥藥性及功效,選用主藥博落回、澤瀉、泡桐花、馬齒莧、葛根、黃芪等組成復方中藥添加于臨產前母豬飼料中,借此提高母豬免疫力,預防仔豬腹瀉,提高生產性能。
3.1 日糧中添加復方中藥對母豬免疫力的影響機體免疫反應包括細胞免疫和體液免疫。IgG反映機體全身免疫狀態,是體液免疫最具代表性的指標之一。研究表明,當機體受到外界病原侵襲時,免疫球蛋白會結合抗原或病原菌對機體產生保護作用,其中IgG對機體發揮重要作用(Sheila等,2019)。細胞免疫通過T淋巴細胞介導,CD3+、CD4+、CD8+為T淋巴細胞的3個主要亞群。其中CD3+代表動物機體外周血T淋巴細胞總數(武彩紅等,2017),是T淋巴細胞的特異性表面標志。CD4+細胞和CD8+細胞分泌具有抗病毒特性的細胞因子,產生抗體等多種途徑為機體提供保護性免疫(屈雪琪等,2011),其二者比值反映了機體的免疫防御能力(屈雪琪等,2001)。
本試驗通過給臨產母豬飼喂復方中藥,各給藥組都在一定程度上表現為血液中IgG含量及CD3+含量增加,CD4+/CD8+值增高,說明該復方中藥可有效提高母豬的免疫力。
3.2 日糧中添加復方中藥對仔豬腹瀉的影響仔豬腹瀉容易虛脫,嚴重則會引發死亡,在養豬業危害中居首位。本研究基于“母源療法”和“子病治母”理論,于臨產母豬日糧中添加復方中藥,以期達到“未病先防”功效。腹瀉率和腹瀉指數分別反映仔豬腹瀉發生的比列和嚴重程度(顏誠等,2012),本研究將二者相結合用于評價仔豬腹瀉狀況。研究發現,在臨產母豬日糧中添加復方中藥可有效降低腹瀉率和腹瀉指數,且中劑量復方中藥組效果更明顯。說明在母豬日糧中合理添加復方中藥可在一定程度上改善仔豬腹瀉的發病及發病程度。