淫羊藿苷通過抑制NLRP3炎性小體和Caspase－1通路減輕骨關節炎

史紀元　姬樂　武世勛　劉時璋　易智　傅薔

摘要 目的：考察淫羊藿苷在治療骨關節炎中的潛在價值，以及淫羊藿苷對核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3（NLRP3）炎性小體和半胱天冬酶-1（Caspase-1）的調控作用。方法：本研究通過脂多糖（LPS）誘導大鼠膝關節軟骨細胞建立體外骨關節炎模型，通過碘乙酸單鈉處理SD大鼠建立體內骨關節炎模型。通過乳酸脫氫酶漏出實驗檢測細胞毒性，通過MTT實驗檢測細胞活力。通過qRT-PCR檢測NLRP3 mRNA的表達，通過Western Blotting檢測NLRP3、IL-1β、IL-18、MMP-1、MMP-13、Collagen Ⅱ、Caspase-1、ASC和GSDMD的蛋白表達。用免疫熒光法和免疫組化法檢測軟骨細胞和大鼠軟骨中的NLRP3表達;番紅O/固綠染色評價大鼠軟骨病變。結果：與LPS組比較，LPS+ICA組LDH的漏出率、IL-1β、IL-18、MMP-1、MMP-13、NLRP3、Caspase-1、ASC和GSDMD的表達水平明顯降低，而Collagen Ⅱ明顯升高（P<0.05）。與LPS+ICA+pcDNA3.1-NC組比較，LPS+ICA+pcDNA3.1-NLRP3組的乳酸脫氫酶漏出率及NLRP3炎性小體相關蛋白表達水平明顯升高（P<0.05）。與對照組比較，OA組大鼠軟骨組織中NLRP3陽性細胞數量顯著增加，而OA+ICA組的NLRP3陽性細胞數量明顯降低（P<0.05）。與OA組比較，OA+ICA組的NRLP3、IL-1β、IL-18、MMP-1、MMP-13、Caspase-1、ASC和GSDMD的蛋白表達水平明顯降低，而Collagen的蛋白表達水平明顯升高（P<0.05）。結論：淫羊藿苷通過抑制NLRP3和Caspase-1信號轉導來抑制脂多糖誘導的軟骨細胞損傷和細胞焦亡，從而減輕大鼠骨關節炎。

關鍵詞 骨關節炎;淫羊藿苷;細胞焦亡;NLRP3炎性小體;半胱天冬酶-1;軟骨;脂多糖;乳酸脫氫酶

Abstract Objective：To investigate the potential value of icariin in the treatment of osteoarthritis and the regulatory effect of Icariin on nucleoside binding oligomerization domain like receptor protein 3（NLRP3） and caspase-1.Methods：In this study，lipopolysaccharide（LPS） was used to induce rat knee chondrocytes to establish an in vitro osteoarthritis model，and SD rats were treated with monosodium iodoacetate to establish an in vivo osteoarthritis model.The cytotoxicity was detected by the lactate dehydrogenase leakage test，and the cell viability was detected by the MTT test.The expression of NLRP3 mRNA was detected by qRT-PCR，and the protein expression of NLRP3，IL-1β，IL-18，MMP-1，MMP-13，collagen Ⅱ，Caspase-1，ASC and GSDMD was detected by Western Blotting.Immunofluorescence and immunohistochemical methods were used to detect the expression of NLRP3 in chondrocytes and rat cartilage.Safranin O/Fast Green staining evaluated cartilage lesions in rats.Results：Compared with LPS group，the LDH leakage rate and the expression levels of IL-1β，IL-18，MMP-1，MMP-13，NLRP3，Caspase-1，ASC，and GSDMD in LPS+ICA group were significantly reduced，while collagenⅡ was increased（P<0.05）.Compared with the LPS+ICA+pcDNA3.1-NC group，the lactate dehydrogenase leakage rate and the expression level of NLRP3 inflammasome-related protein in the LPS+ICA+pcDNA3.1-NLRP3 group were significantly increased（P<0.05）.Compared with the control group，the number of NLRP3 positive cells in the cartilage tissue of the OA group increased significantly，while the number of NLRP3 positive cells in the OA+ICA group was significantly reduced（P<0.05）.Compared with the OA group，the protein expression levels of NRLP3，IL-1β，IL-18，MMP-1，MMP-13，Caspase-1，ASC and GSDMD in the OA+ICA group were significantly reduced，while the protein expression levels of collagen Ⅱ were significantly increased（P<0.05）.Conclusion：Icariin inhibits lipopolysaccharide-induced chondrocyte damage and pyrolysis by inhibiting NLRP3 and Caspase-1 signaling，thereby reducing osteoarthritis in rats.

Keywords Osteoarthritis; Icariin; Pyroptosis; NLRP3 inflammatory corpuscle; Caspase-1; Cartilage; Lipopolysaccharide; Lactate dehydrogenase

中圖分類號：R284;R684文獻標識碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2021.18.009

骨關節炎（Osteoarthritis，OA）是一種常見的慢性退行性關節骨疾病，主要特征是關節僵硬和軟骨退化。隨著人口老齡化的加劇，OA的發病率逐年升高。目前，OA的藥物治療效果并不理想，因此需要開發更安全、耐受性更好的OA治療藥物[1]。軟骨病變在OA的發展過程中扮演重要角色，包括氧化應激、炎癥反應、細胞凋亡、軟骨基質損失和自噬。動物模型的研究表明，生長因子（如TGF-β和Wnt3a）以及信號分子（如β-catenin、Smad3和HIF-2α）均參與OA的發展[2-4]。此外，炎癥和細胞外基質（ECM）的丟失被認為是OA軟骨損傷的重要驅動因素[5]。了解這些因素的變化規律可能為OA提供有效的治療方法。

細胞焦亡（Pyroptosis）是抑制依賴于半胱天冬酶-1（Caspase-1）且伴有炎癥介質釋放的程序性細胞死亡。細胞焦亡可以導致IL-1β和IL-18的產生以及巨噬細胞的裂解[6-7]。與細胞凋亡和簡單細胞壞死不同，細胞焦亡過程是促炎性的，并由核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3（NLRP3）炎性小體和Caspase-1信號通路介導。最近的研究表明，NLRP炎性小體NLRP1和NLRP3參與介導脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）誘導的成纖維樣滑膜細胞的凋亡[8]。抑制這2種NLRP炎性小體導致凋亡相關細胞因子顯著減少，表明NLRP1和NLRP3炎性小體可能在OA的發病中起重要作用。另一項研究表明，兔膝骨性關節炎模型關節軟骨中NLRP3的水平升高，表明炎性小體參與了OA的發病過程[9]。但是，NLRP3介導的細胞焦亡在OA中的作用和潛在機制仍然未知。

淫羊藿是一種傳統中草藥，已被用于OA的治療中。據報道，淫羊藿可以顯著緩解OA并降低兔OA模型中尿激酶型纖溶酶原激活物（uPA）、uPA受體（uPAR）和尿激酶型纖溶酶原激活物抑制劑的表達水平[10]。淫羊藿提取物淫羊藿苷（Icariin，ICA）具有抗骨質疏松和抗炎作用[11]。研究表明，淫羊藿苷通過抑制核因子κB信號通路的自噬而抑制OA炎癥和軟骨細胞凋亡[12-13]。此外，淫羊藿苷通過抑制IL-1β誘導的軟骨肉瘤細胞中MAPK信號通路相關分子發揮軟骨保護作用[14]。但是，淫羊藿苷緩解OA的分子機制及其與NLRP3炎性小體的關系尚未完全了解。本研究旨在考察淫羊藿苷在治療OA方面的潛在作用機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 雄性SD大鼠來自陜西省人民醫院實驗動物中心[SYXK（陜）2016-006]，7周齡，體質量為221～254 g。將大鼠飼養在標準實驗室條件下：室溫22～26 ℃、濕度45%～55%、光照12 h光暗循環，不限制飲食。本研究經過陜西省人民醫院醫學倫理委員會審核（倫理審批號：2019-0836），符合動物倫理原則。

1.1.2 試劑 淫羊藿苷（北京索萊寶科技有限公司，貨號：I8760），胰蛋白酶（Invitrogen公司，美國，貨號：90305），Ⅱ型膠原酶（Invitrogen公司，美國，貨號：17101015），Dulbecco′s改良的Eagle培養基中（DMEM）（Invitrogen公司，美國，貨號：A4192101），Lipofectamine 2000試劑盒（Invitrogen公司，美國，貨號：11668019），Trizol試劑（Invitrogen公司，美國，貨號：15596018），無血清Opti-MEM（Gibco公司，美國，貨號：31985062），脂多糖（Sigma公司，美國，貨號：Sigma-L2630），MTT試劑盒（上海碧云天生物技術有限公司，貨號：ST316），乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒（上海碧云天生物技術有限公司，貨號：C0016），雙辛可寧酸蛋白質測定試劑盒（上海碧云天生物技術有限公司，貨號：P0010S），Caspase-1活性檢測試劑盒（ImmunoChemistry公司，美國，貨號：19D40），多聚甲醛溶液（Santa Cruz公司，美國，貨號：sc-281692），番紅O/固綠染色試劑盒（南京森貝伽生物科技有限公司，貨號：SBJ-0276），Triton購自（Sigma Aldrich公司，德國，貨號：303135），NLRP3（Abcam公司，英國，貨號：ab263899），IL-1β（Abcam公司，英國，貨號：ab234437），IL-18（Abcam公司，英國，貨號：ab207323），MMP-1（Abcam公司，英國，貨號：ab134184），MMP-13（Abcam公司，英國，貨號：ab51072），collagend（Abcam公司，英國，貨號：ab188570），Caspase-1（Abcam公司，英國，貨號：ab207802），ASC（Abcam公司，英國，貨號：ab151700），GSDMD（Abcam公司，英國，貨號：ab219800），GAPDH（Abcam公司，英國，貨號：ab8245），HRP標記的二抗IgG（Abcam公司，英國，貨號：ab205719），二氨基聯苯胺（DAB）（武漢艾美捷科技有限公司，貨號：4800-30-07），RIPA緩沖液（北京普利萊基因技術有限公司，貨號：C1053-100），牛血清白蛋白（吉諾生物醫藥技術有限公司，貨號：GNM-15270），高敏型ECL化學發光檢測試劑盒（南京諾唯贊生物科技有限公司，貨號：E412-01），RT Master Mix（Takara公司，日本，貨號：RR036A），SYBR Select Master Mix（賽默飛世爾科技有限公司，美國，貨號：4472913）。

1.2 方法

1.2.1 軟骨細胞的分離和培養 處死各組大鼠后分離膝關節并切取關節表面軟骨。磷酸鹽緩沖液（PBS）洗滌后，將軟骨用2.0 g/L的胰蛋白酶在37 ℃下消化30 min。然后加入含有0.2%后型膠原酶的培養皿中在37 ℃培養，每隔1 h取上清通過篩網過濾軟骨細胞，將得到的單細胞懸液以3 000×g離心10 min。然后將細胞置于完整的Dulbecco′s改良的Eagle培養基中（DMEM）在37 ℃、5% CO2培養箱中孵育。每隔2 d更換培養液，達到80%融合后進行傳代培養。

1.2.2 軟骨細胞轉染 將全長NLRP3序列構建到pcDNA3.1中，并將重組的質粒命名為pcDNA3.1-NLRP3。將空載質粒用作陰性對照（pcDNA3.1-NC）。將細胞以3×105/孔的密度接種在6孔板中。當細胞融合度達到80%時，使用Lipofectamine 2000試劑盒用不同的質粒轉染細胞。將4 μg質粒和10 μL Lipofectamine 2 000分別用200 μL無血清Opti-MEM稀釋。將2種稀釋液在室溫下靜置5 min并均勻混合。混合物放置20 min后添加到培養孔中，然后在37 ℃、5% CO2的培養箱中培養。6 h后更換完全培養基，48 h后收集細胞。

1.2.3 軟骨細胞分組及脂多糖（LPS）誘導 將軟骨細胞分為對照組、LPS組和LPS+淫羊藿苷組（LPS+ICA組）。對照組細胞不進行LPS處理，LPS組和LPS+ICA組細胞應用LPS處理。將LPS加入PBS緩沖液中配成10 μg/mL的LPS母液。然后將LPS加入細胞培養基中，濃度為20 ng/mL。將第1代大鼠軟骨細胞消化制備細胞懸液，然后按照以1×105/mL接種于含有10%胎牛血清培養基（2 mL）的6孔板中，培養24 h后棄去培養基并用PBS洗滌，加入LPS培養基中培養24 h。LPS+ICA組細胞在LPS處理的基礎上加用淫羊藿苷處理（100 μmol/L），用于后續研究。

1.2.4 細胞活力 將大鼠軟骨細胞接種在96孔板中（1×104個細胞/孔），并用不同濃度的淫羊藿苷（0、1、10、20、50、100和200 μmol/L，純度>98%）處理細胞24 h。然后，將20 μL MTT（5 mg/mL）添加到每個孔中，并在37 ℃下孵育4 h。除去上清液后，向每個孔中加入150 μL二甲基亞砜。然后搖動10 min，使用酶標儀檢測570 nm處光密度（OD）值。

1.2.5 乳酸脫氫酶漏出率檢測 通過細胞上清中的乳酸脫氫酶（LDH）漏出率來評價細胞毒性，LDH采用比色法通過乳酸脫氫酶細胞毒性檢測試劑盒測定。

1.2.6 免疫熒光 在蓋玻片上培養軟骨細胞48 h，用4%多聚甲醛溶液固定，然后用含5%驢血清和0.1% Triton的PBS封閉溶液處理。隨后，將樣品與多克隆抗大鼠NLRP3抗體（1∶500）在4 ℃孵育過夜，然后用PBS洗滌3次并與抗大鼠IgG二抗（1∶200）和DAPI在室溫下孵育1 h。通過共聚焦顯微鏡觀察圖像。

1.2.7 動物分組及OA大鼠模型 雄性SD大鼠適應性飼養1周后，將大鼠隨機分為3組，對照組、OA組（OA組）和淫羊藿苷組（OA+ICA組），每組10只。通過注射碘乙酸鈉（MIA）誘導大鼠OA模型。將MIA溶于0.9%氯化鈉溶液中，終濃度為60 mg/mL。分別將50 μL MIA溶液注入OA組和淫羊藿苷組大鼠右膝關節腔內。對照組大鼠注射50 μL 0.9%氯化鈉溶液。建模2周后，淫羊藿苷組大鼠每天按照50 mg/kg的劑量（0.5 mL）灌胃淫羊藿苷溶液，其他組灌胃等體積生理鹽水。共治療2周。然后處死大鼠，分離軟骨組織。

1.2.8 番紅O/固綠染色 將大鼠軟骨下骨的軟骨切塊（1.0 cm×1.0 cm×0.5 cm）并用中性甲醛溶液固定3 d，然后在30%的甲酸溶液中脫鈣14 d，常規梯度乙醇脫水，石蠟包埋在并切成5 μm厚的切片。按照生產商說明，將切片用Weigert鐵蘇木素染色，然后用水漂洗并置于0.2%固綠溶液中1 min，在1%乙酸乙酯溶液中放置30 s，0.1%的番紅O溶液孵育15 min。然后將樣品脫水，透明，中性樹膠封片。正常的軟骨呈紅色，背景呈綠色。

1.2.9 免疫組織化學 將大鼠軟骨下骨的石蠟包埋組織切片在二甲苯中脫蠟并用梯度乙醇脫水。在檸檬酸鈉緩沖液中回收抗原后，將切片與抗大鼠NLRP3抗體（1∶1 000）在4 ℃孵育過夜。用PBS洗滌3次后，將切片與生物素化的IgG（1∶500）在37 ℃下孵育30 min，然后用PBS洗滌3次。將切片用二氨基聯苯胺（DAB）進行著色3 min。從每個切片中隨機選擇5個典型視野進行觀察并在光學顯微鏡下計數陽性染色細胞。

1.2.10 Western Blotting分析 使用含蛋白酶抑制劑的冰RIPA緩沖液裂解細胞。使用雙辛可寧酸蛋白質測定試劑盒（BCA試劑盒）對蛋白質進行定量。用10% SDS-PAGE分離等量的蛋白質（20 μg），并轉移到聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上，將膜在5%牛血清白蛋白中室溫封閉2 h。然后將膜與一抗在4 ℃下孵育過夜。一抗如下：NLRP3（1∶1 000）、IL-1β（1∶3 000）、IL-18（1∶3 000）、MMP-1（1∶1 000）、MMP-13（1∶1 000）、collagen如（1∶3 000）、Caspase-1（1∶2 000）、ASC（1∶2 000）、GSDMD（1∶1 000）和GAPDH（1∶2 000）。用TBST洗滌3次后，將膜與HRP標記的相應山羊抗兔二抗IgG（1∶3 000）室溫下孵育1 h。TBST洗滌3次后，用高敏型ECL化學發光檢測試劑盒觀察免疫反應蛋白。使用ImageJ軟件量化每個條帶的密度。

1.2.11 qRT-PCR 使用Trizol試劑從軟骨細胞和軟骨組織中提取總RNA，并用RT Master Mix反轉錄為cDNA。使用SYBR Select Master Mix在ABI StepOnePlus實時熒光定量PCR儀上進行RT-PCR。反應程序如下：95 ℃變性30 s，60退火1 min，95 ℃延伸5 s。引物序列如下：NLRP3正向（5′-GTTGTGGGGAGAGGCAAACT-3′）和反向（5′-CACTGGACCTCGGACTGGAGTTA-3′），GAPDH正向（5′-CAACGACGGAGTGTTCAAACG-3′）和反向（5′-CCGACTCCAGACAGTACAT-3′）。使用GAPDH作為內部對照，通過2-△△Ct法計算基因相對表達。

1.3 統計學方法 采用SPSS 18.0統計軟件進行分析，所有實驗至少進行3次重復。計量資料用均值±標準差（±s）表示。通過單因素方差分析及Tukey檢驗進行組間差異比較。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 脂多糖對軟骨細胞中炎癥介質和膠原蛋白的影響 與對照組細胞比較，LSP組大鼠軟骨細胞中NRLP3的mRNA表達水平顯著升高（P<0.05）。脂多糖孵育24 h后，與對照組比較，LPS組大鼠軟骨細胞中NRLP3、IL-1β、IL-18、MMP-1和MMP-13蛋白表達水平顯著升高，而CollagenⅡ的表達明顯降低（P<0.05）。見圖1。

2.2 淫羊藿苷抑制脂多糖誘導的軟骨細胞損傷 結果顯示，淫羊藿苷以濃度依賴性的方式降低了大鼠軟骨細胞活力（P<0.05）。乳酸脫氫酶（LDH）的漏出為細胞焦亡的主要指標。與對照組比較，LPS組的LDH漏出率明顯升高;與LPS組比較，LPS+ICA組LDH的漏出率明顯降低（P<0.05）。與LPS組比較，LPS+ICA組的IL-1β、IL-18、MMP-1和MMP-13的蛋白表達水平明顯降低，而CollagenⅡ明顯升高（P<0.05）。見圖2。

2.3 淫羊藿苷抑制脂多糖誘導的NLRP3和Caspase-1信號通路 與對照組比較，LPS組大鼠軟骨細胞中NLRP3的表達水平明顯升高（P<0.05）。與LPS組比較，LPS+ICA組的NLRP3的表達水平明顯降低（P<0.05）。與對照組比較，LPS組中Caspase-1、ASC和GSDMD的表達水平明顯升高（P<0.05）。與LPS組比較，LPS+ICA組的Caspase-1、ASC和GSDMD的表達水平明顯降低（P<0.05）。見圖3。

2.4 淫羊藿苷通過抑制NLRP3信號抑制大鼠軟骨細胞焦亡 結果顯示，轉染了pcDNA3.1-NLRP3的大鼠軟骨細胞中的NLPR3 mRNA表達水平顯著高于陰性對照組（pcDNA3.1-NC）（P<0.05）。與LPS+ICA+pcDNA3.1-NC組比較，LPS+ICA+pcDNA3.1-NLRP3組的乳酸脫氫酶漏出率明顯升高（P<0.05），焦亡相關蛋白NLRP3、Caspase-1、ASC和GSDMD表達水平明顯升高（P<0.05）。見圖4。

2.5 淫羊藿苷通過抑制NLRP3減輕大鼠OA損傷番紅O/固綠染色結果表明，與對照組比較，OA組中大鼠軟骨破壞嚴重，番紅O明顯失染，OA+ICA組大鼠的軟骨破壞程度較小。免疫組化染色結果顯示，與對照組比較，OA組大鼠軟骨組織中NLRP3陽性細胞數量顯著增加;與OA組比較，OA+ICA組大鼠軟骨組織中NLRP3陽性細胞數量明顯減少（P<0.05）。見圖5～6。

2.6 淫羊藿苷減輕OA大鼠中NLRP3介導的炎癥反應和細胞焦亡并增加膠原蛋白的形成 結果表明，與OA組比較，OA+ICA組大鼠軟骨中NRLP3、IL-1β、IL-18、MMP-1、MMP-13、Caspase-1、ASC和GSDMD的蛋白表達水平明顯降低，而CollagenⅡ的蛋白表達水平明顯升高（P<0.05），與體外軟骨細胞實驗的結果一致。見圖7。

3 討論

OA是一種進行性和惡化性的關節疾病，目前臨床中所應用的藥物如對乙酰氨基酚、非甾體抗炎藥等只能緩解疼痛，而無法治愈該病。炎癥和細胞凋亡與OA的發展有關[15-16]。淫羊藿提取物淫羊藿苷（Icariin，ICA）具有抗氧化、抗神經炎和抗凋亡作用，在治療如腫瘤、阿爾茨海默病、腦缺血、抑郁、糖尿病和帕金森病等多種疾病中療效顯著[17]。對于OA，研究顯示，淫羊藿苷通過多種機制發揮抗骨質疏松和抗OA作用，包括抑制核因子κB信號通路及抑制MMP1、MMP3和MMP13的表達[18-21]。

NLRP3炎性小體已被證明通過刺激炎癥介質和降解酶與各種關節炎疾病的發病機制相關[22]。最近的一項研究報道了NLRP1和NLRP3炎小體在成纖維樣滑膜細胞炎癥和凋亡中發揮重要作用，這表明NLRP1和NLPR3炎性小體可能參與OA的進展[8]。另外，NLRP3可能作為OA的潛在生物標志物，據報道，姜黃素或雌二醇抑制NLRP3炎性小體可下調炎癥介質并阻止OA進展[23]。在本研究中，淫羊藿苷通過抑制NLRP3炎性小體信號轉導減弱了脂多糖誘導的炎癥和細胞焦亡，而NLRP3的過表達降低了淫羊藿苷的保護作用。這些結果充分證實了NLRP3炎性小體在OA中的病理學作用，并且抑制NLRP3的表達可實現對OA的治療作用。

細胞焦亡是一種炎癥激活引起的Caspase-1依賴性程序性細胞死亡，可導致細胞溶解和胞質內含物釋放到細胞外環境[24]。Gasdermin D（GSDMD）是Gasdermin（GSDM）家族的成員，可被Caspase-1裂解并釋放N末端結構域，其在質膜上寡聚形成用于釋放如IL-1β和IL-18等底物的孔道[25]。Caspase-1介導的細胞焦亡在多種疾病的調節中起作用，例如多發性硬化、視網膜炎、神經系統疾病等。此外，Caspase-1的缺乏可降低慢性關節炎的關節病理改變[26]。與細胞凋亡和簡單細胞壞死不同，細胞焦亡過程是促炎性的，并由NLRP3炎性小體介導。最近的研究表明，NLRP炎性小體NLRP1和NLRP3參與介導脂多糖誘導的成纖維樣滑膜細胞的凋亡[8]。抑制這2種NLRP炎性小體導致凋亡相關細胞因子顯著減少，表明NLRP1和NLRP3炎性小體可能在OA的發病機制中起重要作用[27]。另一項研究表明，兔膝骨性關節炎模型關節軟骨中NLRP3的水平升高，表明炎性小體參與了OA的發病過程[9]。本研究進一步證明，脂多糖誘導了軟骨細胞中NLRP3的表達，并促進了Caspase-1的激活。因此，淫羊藿苷可能通過干擾脂多糖介導的NLRP3和Caspase-1信號轉導途徑來緩解OA。

總之，NLRP3炎性小體在OA的發病中起關鍵作用。本研究表明，淫羊藿苷通過抑制NLRP3和Caspase-1信號轉導來抑制脂多糖誘導的軟骨細胞損傷和細胞焦亡，從而減輕大鼠OA。表明淫羊藿苷在OA治療中具有較好的保護作用，有望成為新的OA治療藥物。

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（2020-07-09收稿 責任編輯：楊覺雄）