B族鏈球菌顯色培養(yǎng)在產(chǎn)前篩查中的應(yīng)用及孕婦妊娠結(jié)局預(yù)測價值

孫 雷,孫繼文,邵 坤

安徽省阜陽市婦女兒童醫(yī)院檢驗科，安徽阜陽 236000

B族鏈球菌(GBS)感染是現(xiàn)階段臨床中導(dǎo)致出現(xiàn)新生兒感染甚至死亡的重要原因[1]。新生兒GBS感染可分為早發(fā)型和晚發(fā)型，出生1周內(nèi)出現(xiàn)稱為早發(fā)型，1周后至90 d內(nèi)出現(xiàn)稱為晚發(fā)型[2]。有研究指出，腦膜炎、敗血癥、肺炎等多種嚴(yán)重性疾病均是新生兒GBS感染可能引發(fā)的并發(fā)癥[3]。此外，有報道指出孕婦產(chǎn)前亦可引發(fā)GBS感染，其主要癥狀包括早產(chǎn)、絨毛膜羊膜炎、死胎等，產(chǎn)后可能出現(xiàn)肺炎及敗血癥[4]。有文獻(xiàn)表明低體質(zhì)量兒、羊膜早破、泌尿系統(tǒng)感染等均與孕晚期GBS感染密切相關(guān)，因而臨床中及時有效地檢出GBS感染具有十分重要的意義，而傳統(tǒng)的血平板分離鑒定法，其檢測耗時長、技術(shù)要求高、操作復(fù)雜，并且存在一定比例的假陽性，因而臨床中亟待尋找快捷有效的檢測GBS的方案[5]。顯色培養(yǎng)檢測GBS結(jié)果更為精確，操作更為便捷，有利于臨床推廣應(yīng)用，近年來本院逐步推廣顯色培養(yǎng)檢測GBS，并取得了較高的臨床應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年1月至2020年3月在本院住院分娩并行顯色培養(yǎng)法檢測GBS的164例孕產(chǎn)婦作為研究對象，年齡23～44歲，平均(28.93±5.81)歲，初產(chǎn)婦92例，經(jīng)產(chǎn)婦72例，孕周35～27周，平均(36.28±1.93)周。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)單胎宮內(nèi)妊娠；(2)檢查前兩周內(nèi)無抗菌藥物使用史；(3)B超檢查結(jié)果顯示胎兒存活；(4)知情且簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并心、肝、腎等重要臟器疾病；(2)合并出現(xiàn)腫瘤；(3)有妊娠期高血壓綜合征等妊娠期并發(fā)癥；(4)生殖道感染其他致病菌；(5)拒絕配合或主動申請退出本研究者。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2方法 由產(chǎn)科醫(yī)師在無外陰消毒且不作清潔處理的情況下，使用無菌拭子采集所有孕婦陰道下1/3分泌物，并在取樣后60 min內(nèi)送檢。將拭子插入培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中以5% CO2、35 ℃培養(yǎng)18～24 h，若培養(yǎng)基呈胡蘿卜色則判定為GBS陽性，將未顯胡蘿卜色的培養(yǎng)基分別轉(zhuǎn)種于血平板和二分格平板，繼續(xù)在同等條件下培養(yǎng)18～24 h，血平板可疑菌落行儀器鑒定確認(rèn)后判定為GBS陽性，二分格平板出現(xiàn)菌落β 溶血且呈胡蘿卜色則判定為GBS陽性，其余均判定為GBS陰性。

1.3觀察指標(biāo) 依照GBS檢測結(jié)果將孕產(chǎn)婦分為GBS陽性組和GBS陰性組，詳細(xì)記錄所有孕婦妊娠結(jié)局和新生兒結(jié)局，包括胎膜早破、宮內(nèi)感染、早產(chǎn)、產(chǎn)后出血、新生兒窒息、新生兒肺炎、新生兒上呼吸道感染、新生兒敗血癥等。

2 結(jié) 果

2.1GBS陽性與陰性孕婦一般資料調(diào)查結(jié)果 GBS陽性組孕產(chǎn)婦年齡、孕周及產(chǎn)次與GBS陰性組孕婦差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 GBS陽性與陰性孕婦一般資料調(diào)查結(jié)果

2.2孕產(chǎn)婦妊娠結(jié)局調(diào)查結(jié)果 GBS陽性組孕婦不良妊娠結(jié)局率明顯高于GBS陰性組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 孕產(chǎn)婦妊娠結(jié)局調(diào)查結(jié)果(n)

2.3新生兒結(jié)局調(diào)查結(jié)果 本組研究結(jié)果顯示，GBS陽性組新生兒窒息、肺炎、敗血癥和上呼吸道感染等不良結(jié)局率明顯高于GBS陰性組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

表3 新生兒結(jié)局調(diào)查結(jié)果(n)

2.4GBS感染與妊娠結(jié)局和新生兒感染的關(guān)系 GBS感染是導(dǎo)致孕婦不良妊娠結(jié)局和新生兒感染的獨立性危險因素(P<0.05)，見表4。

表4 GBS感染與妊娠結(jié)局和新生兒感染的關(guān)系

2.5GBS感染預(yù)測妊娠結(jié)局和新生兒感染的關(guān)系 使用GBS感染預(yù)測妊娠結(jié)局和新生兒感染時均具有較高特異度，且預(yù)測妊娠結(jié)局和新生兒感染時差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表5。

表5 GBS感染預(yù)測妊娠結(jié)局和新生兒感染的關(guān)系(%)

3 討 論

妊娠期婦女其陰道上皮細(xì)胞糖原水平異常上升，乳酸濃度顯著升高，產(chǎn)生適合耐酸微生物生長的環(huán)境而導(dǎo)致其大量繁殖，破壞陰道內(nèi)微環(huán)境，妊娠期陰道黏膜損傷，機(jī)體免疫功能降低，病原菌入侵后機(jī)體的抵抗能力下降，增加陰道細(xì)菌感染概率[6]。GBS是臨床中較為常見的一種條件致病菌，在厭氧環(huán)境中存活，屬于無乳鏈球菌屬于革蘭陽性菌，且患者多合并念珠菌感染[7]。既往有研究發(fā)現(xiàn)圍生期母嬰感染與鏈球菌密切相關(guān)，且鏈球菌感染也極易導(dǎo)致嬰幼兒敗血癥、腦膜炎的發(fā)生[8]。GBS對絨毛膜組織有極強地穿透力和吸附力，GBS感染婦女易出現(xiàn)不良妊娠結(jié)局，GBS是妊娠期孕婦生殖道感染的主要致病菌之一，可能導(dǎo)致孕婦生殖道合并其他感染的概率顯著升高。有研究指出，GBS感染會導(dǎo)致早產(chǎn)、胎膜早破、孕婦感染、宮內(nèi)胎兒生長受限、新生兒感染甚至宮內(nèi)胎兒死亡等不良妊娠結(jié)局[9]。若GBS感染不及時進(jìn)行合理、有效地治療，可能導(dǎo)致新生兒智力發(fā)育遲緩、視聽覺喪失等遠(yuǎn)期后遺癥。孕婦攜帶GBS是目前臨床中導(dǎo)致新生兒晚發(fā)感染的重要因素之一[10]。感染GBS后，新生兒伴隨出現(xiàn)腦積水、智障、耳聾等神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥可能性顯著升高，對新生兒的生長發(fā)育及心理發(fā)育均造成嚴(yán)重不良影響[11]。因此臨床中應(yīng)對GBS感染給予高度的重視，加強早期篩查，并采取合理方案進(jìn)行干預(yù)[12]。

本研究采用顯色培養(yǎng)檢測對GBS進(jìn)行檢測，檢測過程中通過增菌顯色培養(yǎng)基可直接對結(jié)果進(jìn)行判定，若結(jié)果為陰性則繼續(xù)使用血平板和二分格平板對可疑菌落進(jìn)行鑒定，可用過瓊脂誘導(dǎo)GBS轉(zhuǎn)化為β溶血型，提高GBS的檢出率[13-14]。GBS 運送增菌顯色培養(yǎng)基可有效縮短檢測時間，降低漏檢率，提高GBS 檢出率，成本更低且結(jié)果判讀更簡便，可有效提高圍產(chǎn)期婦女的GBS感染檢出率，起到高效輔助臨床的作用[15]。對研究結(jié)果深入探討發(fā)現(xiàn)，GBS陽性組不良妊娠結(jié)局率明顯高于GBS陰性組，GBS陽性組新生兒不良結(jié)局率明顯高于GBS陰性組。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，GBS感染是導(dǎo)致孕婦不良妊娠結(jié)局和新生兒感染的獨立性危險因素。結(jié)果提示不良妊娠結(jié)局和新生兒不良結(jié)局均與GBS 感染密切相關(guān)，分析認(rèn)為妊娠期婦女免疫力降低，機(jī)體防御能力減弱，而GBS可逆行導(dǎo)致感染出現(xiàn)，經(jīng)炎癥細(xì)胞吞噬處理后GBS可與細(xì)菌蛋白水解酶協(xié)同作用直接進(jìn)行侵襲，降低胎膜張力并引起胎膜早破的發(fā)生。

生殖道中GBS定植后其對絨毛膜具有較強的穿透力和吸附作用，進(jìn)而產(chǎn)生上行對胎膜造成感染，通過細(xì)菌產(chǎn)生的蛋白水解酶和炎癥細(xì)胞的吞噬作用直接進(jìn)行侵襲[16]。此外，GBS感染后可能導(dǎo)致孕產(chǎn)婦出現(xiàn)胎膜局部張力減低，導(dǎo)致患者出現(xiàn)胎膜早破[17]。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，胎膜早破后會導(dǎo)致產(chǎn)道內(nèi)GBS與新生兒接觸概率顯著增加，因而在影響新生兒GBS感染出現(xiàn)胎膜早破的獨立性危險因素。此外，新生兒GBS疾病與胎膜早破是陰道GBS定植發(fā)病的重要且常見的中介變量，但現(xiàn)階段胎膜早破與產(chǎn)道內(nèi)GBS感染間的因果關(guān)系以及作用機(jī)制仍未被證實和揭示，有待持續(xù)追蹤分析。一般情況下，GBS感染后會導(dǎo)致孕婦出現(xiàn)陰道菌群失調(diào)，導(dǎo)致原有的生理平衡被打破，引起陰道菌群結(jié)構(gòu)出現(xiàn)改變。此外，不良妊娠結(jié)局與陰道菌群平衡結(jié)構(gòu)失衡密切相關(guān)[16]。但目前孕婦出現(xiàn)陰道菌群改變與新生兒GBS相關(guān)疾病的發(fā)生等是否存在必然聯(lián)系或獨立性影響因素仍未明確，且支原體、人乳頭瘤病毒、衣原體等陰道常見的病原體、正常菌群或致病菌等其他菌群是否與GBS密切相關(guān)也是近年來臨床研究的熱點問題之一。GBS可釋放前列腺素、細(xì)胞因子、蛋白水解酶等多種活性因子，刺激子宮收縮，并可能導(dǎo)致早產(chǎn)。此外，GBS穿膜能力較強，感染胎盤絨毛膜引起宮內(nèi)感染、絨毛膜羊膜炎，降低胎兒儲備能力，降低胎兒機(jī)體免疫力，改變宮內(nèi)微環(huán)境，誘發(fā)胎兒窘迫，增加剖宮產(chǎn)概率。此外，GBS感染還可能導(dǎo)致新生兒出現(xiàn)窒息、肺炎、感染等不良結(jié)局的出現(xiàn)，因而在臨床中應(yīng)予以高度重視。孕婦生殖道內(nèi)若出現(xiàn)GBS定植是影響妊娠期孕婦及新生兒不良預(yù)后的獨立性危險因素，并且可采集陰道分泌物對GBS情況進(jìn)行檢測。

綜上所述，顯色培養(yǎng)可有效檢測GBS，且GBS感染是導(dǎo)致妊娠期婦女不良妊娠結(jié)局和新生兒感染的獨立性危險因素，在臨床中應(yīng)予以足夠的重視。但本研究并未對新生兒進(jìn)行長期追蹤以分析其遠(yuǎn)期隨訪結(jié)局，有待后續(xù)追蹤分析。