血清miR-141-3p、IL-35、IL-10聯合診斷前列腺癌的價值

張 勇，劉劍新，田長海，韓孝洲，劉 旺，于 澎，邱 瑾，鄢 陽

1.上海中醫藥大學附屬上海市中西醫結合醫院泌尿外科，上海 200082;2.同濟大學附屬上海第十人民醫院泌尿外科，上海 200072

前列腺癌是出現在前列腺的上皮性惡性腫瘤，是目前泌尿內科中男性較為常見的癌癥之一，并且其發病率隨著年齡的增加而升高[1]。前列腺癌是一種進展較為緩慢的癌癥，在早期并不會出現明顯不良反應，逐漸發展至中后期時，患者可出現尿頻、尿急、尿痛、腰痛、排尿困難等癥狀[2]。早期前列腺癌是能夠治愈的，但是隨著病情的加重，到達中晚期時，治療效果和預后效果極差。因此對于前列腺癌的早期篩查與診斷是極為重要的[3]。目前臨床上對于前列腺癌的篩查主要是前列腺特異性抗原，但是其特異度較低，所以需要尋找更加有效的實驗室標準。血清微小RNA-141-3p(miR-141-3p)是一種成熟的miRNA，有研究表示，miR-141-5p在前列腺癌組織內表達會上調，但對于miR-141-3p的研究較少[4]。白細胞介素-35(IL-35)是一種新型炎性因子，能夠介導免疫逃逸并促進腫瘤的發生，還能夠影響其他細胞因子的分泌，進而參與到腫瘤的發展當中[5]。有研究表示，前列腺癌患者體內IL-10會存在不同程度的改變[6]。所以本研究選取2017年9月至2020年9月上海中醫藥大學附屬上海市中西醫結合醫院(下稱本院)疑似前列腺癌患者181例以及同期體檢的健康人群91例的臨床資料進行分析，研究血清miR-141-3p、IL-35、IL-10聯合診斷前列腺癌的臨床價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年9月至2020年9月本院收治的疑似前列腺癌患者181例作為實驗組，另選取同期健康體檢人群91例作為對照組。其中實驗組年齡45～72歲，平均(56.24±10.14)歲，體質量55～68 kg，平均體質量(60.54±3.05)kg，對照組年齡45～71歲，平均(56.08±10.23)歲，體質量55～68 kg，平均體質量(60.98±3.89)kg。實驗組納入標準：(1)患者年齡>18歲；(2)患者精神意志正常；(3)患者能夠接受血清miR-141-3p、IL-35、IL-10檢測；(4)患者資料完整。實驗組排除標準：(1)患者年齡<18歲；(2)患者存在心肌梗死、腦梗死等重大疾病；(3)患者存在心、肺、腎等重要器官障礙；(4)患者存在嚴重凝血功能障礙；(5)患者中途死亡或退出。兩組患者年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。本研究所有患者及其家屬知情且簽署知情同意書，本研究已經本院倫理委員會批準。

1.2方法 患者入院后均進行細胞穿刺活檢，通過組織病理學確診為前列腺癌患者82例，均符合《前列腺癌臨床診療學》[7]中前列腺癌病理學診斷標準；其余99例患者診斷為良性前列腺病變：硬化性腺病21例、腎源性腺瘤32例、基底細胞增生18例、前列腺硬化19例、不典型性腺瘤樣增生9例，均符合《前列腺診斷病理學》[8]中診斷標準。IL-35、IL-10檢測方法：抽取患者空腹靜脈全血3.5 mL，高速離心分層，分離血清，送至檢驗科，IL-35選取上海晶抗生物工程有限公司的人IL-35酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒采用夾心法；IL-10選取上海酶聯生物科技有限公司的IL-10 ELISA試劑盒，采用固相夾心法進行檢測。IL-35前列腺癌陽性標準：>135.10 pg/mL，前列腺良性增生陽性標準：>48.93 pg/mL；IL-10前列腺癌陽性標準：>124.89 pg/mL，前列腺良性增生陽性標準：>45.11(pg/mL)。miR-141-3p檢測方法：抽取患者空腹靜脈血3.5 mL，采用Invitrogen公司的miRNA試劑盒對RNA總量進行提取，測量RNA濃度，采用實時轉染實驗，選取Ribo Bio公司的anti-miR-NC核苷酸，參考Lipofectamine 2000轉染步驟進行轉染視野，轉染效率以熒光顯微鏡計算熒光素所標記的細胞百分比。miR-141-3p前列腺癌陽性標準：>54.96%，前列腺良性增生陽性標準：>13.40%。

1.3觀察指標 對比3組患者血清miR-141-3p、IL-35、IL-10；檢測前列腺癌組血清miR-141-3p、IL-35、IL-10陽性檢出率，繪制曲線下面積(AUC)分析血清miR-141-3p、IL-35、IL-10定量聯合前列腺癌與良性前列腺病變檢測的診斷價值。

2 結 果

2.13組患者血清miR-141-3p、IL-35、IL-10比較 相比于對照組，前列腺癌組和良性前列腺病變組血清miR-141-3p、IL-35、IL-10水平顯著更高；相比于良性前列腺病變組，前列腺癌組血清miR-141-3p、IL-35、IL-10顯著更高，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組患者血清miR-141-3p、IL-35、IL-10對比

2.2前列腺癌組血清miR-141-3p、IL-35、IL-10陽性檢出率 miR-141-3p診斷前列腺癌陽性率91.46%(75/82)；IL-35診斷前列腺癌陽性率87.80%(72/82)；IL-10診斷前列腺癌陽性率85.36%(70/82)。見表2。

表2 前列腺癌組血清miR-141-3p、IL-35、IL-10陽性檢出率(n)

2.3血清miR-141-3p、IL-35、IL-10定量聯合前列腺癌與良性前列腺病變檢測的診斷價值分析 從各個指標的檢測結果分析，三者聯合檢測明顯優于單個檢測的診斷效率，三者聯合檢測前列腺癌的靈敏度為96.30%、特異度為95.30%，AUC為0.975。三者聯合檢測良性前列腺病變的靈敏度為41.40%、特異度為87.90%，AUC為0.620。見表3、4。見圖1、2。

表3 血清miR-141-3p、IL-35、IL-10定量聯合診斷前列腺癌診斷價值分析

圖1 血清miR-141-3p、IL-35、IL-10定量聯合檢測前列腺癌ROC曲線

表4 血清miR-141-3p、IL-35、IL-10定量聯合診斷良性前列腺病變診斷價值分析

圖2 血清miR-141-3p、IL-35、IL-10定量聯合檢測良性前列腺病變ROC曲線

3 討 論

前列腺癌是發生于前列腺上皮細胞的惡性腫瘤，主要以前列腺腺泡異常并且出現異常生長為特征的病理性改變[9-10]。前列腺癌的發病率隨著男性年齡升高而增加，所以對于前列腺癌的早期診斷與篩查較為重要。近年來，前列腺癌的早期敏感血清學指標是臨床上研究的重點[11-13]。

miRNA是近年來新發現的單鏈小分子RNA，往往在轉錄后對基因的表達進行調控。miRNAs能夠與靶miRNA的3端非翻譯區進行不完全的互補配對，以達到抑制基因表達，在細胞的生長發育、凋亡分化當中起到重要的作用[14]。miR-141屬于miR-200的一種，是人類的12號染色體，在腫瘤組織內容易出現突變、染色體缺失以及易位等[15]。有研究表明，miR-141在前列腺癌組織內表達上升，同時在前列腺癌患者血清內也能夠檢查到[16]。miR-141-3p是miRNA-141剪切后生成的成熟產物，能夠靶向表皮生長因子受體進而對游途徑蛋白進而對骨肉瘤細胞的生長與轉移進行抑制。本研究表明，與對照組比較，前列腺癌組和良性前列腺病變組血清miR-141-3p水平顯著更高；與良性前列腺病變組比較，前列腺癌組血清miR-141-3p顯著更高，差異有統計學意義(P<0.05)。說明，前列腺癌患者體內miR-141-3p水平會顯著提高，而在良性前列腺病變當中也會有所提高。本研究結果表示，miR-141-3p診斷前列腺癌陽性率91.46%(75/82)。說明，miR-141-3p對于前列腺癌的診斷價值較高。miR-141-3p在前列腺癌中表達提高，對KLF9的表達進行抑制從而促進前列腺癌的增殖與分化[17]。IL-35是一新的趨化因子，已被證實在肺癌、胰腺癌和咽癌當中發揮著作用。IL-35是通過人體特殊的信號通路與T細胞表面的受體相結合，進而分泌新的免疫細胞。本研究結果表示，相比于對照組，前列腺癌組和良性前列腺病變組血清IL-35水平顯著更高；相比于良性前列腺病變組，前列腺癌組血清IL-35顯著更高，差異有統計學意義(P<0.05)。說明IL-35是能夠作為篩查前列腺疾病的血清指標，尤其是前列腺癌最為敏感。本研究結果表示，IL-35診斷前列腺癌陽性率陽性率為87.80%(72/82)。因為IL-35是屬于IL-12的一種，是由T淋巴細胞分泌而成，所以IL-35是能夠被當做腫瘤免疫的首要因子[18]。IL-10是一種Th2類因子，是人類免疫反應中較為重要的炎癥抑制細胞因子的一種，主要由單核巨噬細胞分泌，同時又主要作用于單核巨噬細胞[19]。本研究表示，與對照組比較，前列腺癌組和良性前列腺病變組血清IL-10水平顯著更高；與良性前列腺病變組比較，前列腺癌組血清IL-10顯著更高，差異有統計學意義(P<0.05)。有研究報道，惡性腫瘤能夠促使患者自身合成并分泌免疫抑制因子，使Th1逐漸傾向于Th2型免疫，進而使IL-10劇烈升高[20]。本研究結果表示，IL-10對前列腺癌的檢出率為85.36%(70/82)。說明IL-10對于前列腺癌的診斷價值較高。本研究結果表示，3個指標聯合檢測明顯優于單個檢測的檢出率，3個指標聯合檢測前列腺癌的靈敏度、特異度，AUC線下面積均顯著高于聯合檢測良性前列腺病變。說明，3種指標的聯合檢測適用于前列腺腫瘤的檢測。

綜上所述，血清miR-141-3p、IL-35、IL-10聯合診斷前列腺癌的靈敏度、特異度均較高，適合臨床上對于前列腺癌的早期診斷。