趙江源 何燕

【摘要】目的：分析對(duì)比急性髓系白血病患者中采取不同方法學(xué)檢測(cè)MPO陽(yáng)性率。方法：從2019年6月至2021年6月我院收治的急性髓系白血病患者中抽選33例作為主要研究對(duì)象，所有患者均分別接受免疫組織化學(xué)、流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，對(duì)比不同方法學(xué)檢測(cè)MPO陽(yáng)性率。結(jié)果：免疫組織化學(xué)法聯(lián)合流式細(xì)胞學(xué)法檢查MPO陽(yáng)性率為96.97%，免疫組織化學(xué)法檢查MPO陽(yáng)性率為66.67%，流式細(xì)胞學(xué)法檢查MPO陽(yáng)性率為87.88%，免疫組織化學(xué)法聯(lián)合流式細(xì)胞學(xué)法檢查明顯高于免疫組織化學(xué)法，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：急性髓系白血病患者中采取免疫組織化學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、流式細(xì)胞學(xué)聯(lián)合檢測(cè)MPO陽(yáng)性率高，能夠?yàn)楹罄m(xù)疾病治療提供有效依據(jù)，臨床應(yīng)用價(jià)值高，值得推廣。

【關(guān)鍵詞】不同方法學(xué)檢測(cè);急性髓系白血病;MPO陽(yáng)性率

急性髓系白血病屬于白血病的一種，主要由于骨髓、外周血、其他組織中髓系原始細(xì)胞克隆性增生所致，該疾病通常需要進(jìn)行放療、化療治療，但是治療的預(yù)后效果不佳。所以臨床上針對(duì)急性髓系白血病需要堅(jiān)持早診斷早治療原則，所以選擇相應(yīng)的檢驗(yàn)方式是非常重要的。本文主要分析對(duì)比急性髓系白血病患者中采取不同方法學(xué)檢測(cè)MPO陽(yáng)性率，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1臨床資料

從2019年6月至2021年6月我院收治的急性髓系白血病患者中抽選33例作為主要研究對(duì)象，其中男性患者18例，女性患者15例，患者最大年齡88歲，最小年齡19歲，平均年齡（51.36±2.79）歲。

1.2方法

本次研究所選患者均分別接受免疫組織化學(xué)、流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，具體操作如下：1）免疫組織化學(xué)法檢測(cè)。提前準(zhǔn)備好Bouin氏固定液，然后取患者病灶部位的組織，將其進(jìn)入Bouin氏固定液中過(guò)夜，然后取出組織，再將其置入 EDTA 脫鈣液中進(jìn)行脫鈣，時(shí)間在4小時(shí)到5小時(shí)左右。完成病灶組織處理后，需要用流水將其沖洗干凈，時(shí)間控制在15分鐘左右，完成沖洗后，將病灶組織放入脫水機(jī)中進(jìn)行常規(guī)脫水、透明，完成后進(jìn)行石蠟包埋，再進(jìn)行切片，厚度控制在3μm左右。完成切片后，進(jìn)行烤片，溫度設(shè)置為72℃、時(shí)間為1小時(shí)，脫蠟選擇二甲苯，脫水選擇梯度乙醇，其中脫蠟十分鐘每缸 ，總共用2缸，脫水分別選擇100%乙醇、95%乙醇和75%乙醇，每次兩分鐘。完成后，再進(jìn)行PBS洗，次數(shù)為5次，完成后進(jìn)行高壓修復(fù)，再重復(fù)5次PBS洗，然后選擇3%雙氧水進(jìn)行溫室孵育，時(shí)間為10分鐘，再加入兔抗人 MPO 多克隆抗體，溫度調(diào)節(jié)到37攝氏度，時(shí)間為1小時(shí)，完成染色后，再進(jìn)行5次PBS ，二抗為20分鐘，三抗為10分鐘。最后進(jìn)行5分鐘到10分鐘的DAB顯色和2分鐘復(fù)染，選擇自來(lái)水沖洗，然后進(jìn)行分化、脫水、透明、封片，完成染色，再進(jìn)行中性粒細(xì)胞MPO陽(yáng)性檢測(cè)。2）流式細(xì)胞學(xué)法檢測(cè)。抽取1.5毫升骨髓液，將枸櫞酸鈉加入試管中進(jìn)行抗凝處理，再取兩支試管，分別加入50μL EDTA 抗凝骨髓液、10μL CD45 - PerCP -Cy5.5單抗，加入2毫升溶血素進(jìn)行避光處理，時(shí)間為15分鐘，然后進(jìn)行離心處理，轉(zhuǎn)速為1500r/min，時(shí)間為10分鐘，去除上層清液，加入100μL 固定液進(jìn)行15分鐘溫室孵育，然后進(jìn)行標(biāo)本處理，最后再利用BD FACS cantoⅡ流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。

1.3觀察指標(biāo)

本次研究主要以不同方法學(xué)檢測(cè)急性髓系白血病MPO陽(yáng)性率作為觀察指標(biāo)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用spss30.0處理，用x2檢驗(yàn)，當(dāng)p小于0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

免疫組織化學(xué)法聯(lián)合流式細(xì)胞學(xué)法檢查MPO陽(yáng)性率為96.97%，免疫組織化學(xué)法檢查MPO陽(yáng)性率為66.67%，流式細(xì)胞學(xué)法檢查MPO陽(yáng)性率為87.88%，免疫組織化學(xué)法聯(lián)合流式細(xì)胞學(xué)法檢查明顯高于免疫組織化學(xué)法，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3討論

急性髓系白血病是髓系腫瘤，患者患病后身體免疫功能會(huì)受到很大的影響，臨床上針對(duì)急性髓系白血病的研究非常多，為了更好的保證疾病治療效果，還需要選擇科學(xué)、合理的監(jiān)測(cè)方式進(jìn)行疾病檢測(cè)，通過(guò)有效的檢測(cè)確定患者病情，然后制定相應(yīng)的治療方案。免疫組織化學(xué)、流式細(xì)胞學(xué)是臨床上常見(jiàn)的兩種檢測(cè)方式，其中免疫組織化學(xué)法檢測(cè)主要通過(guò)組織染色的方式進(jìn)行檢測(cè)分析，可以在一定程度上檢測(cè)MPO陽(yáng)性率，但是單純采取免疫組織化學(xué)法是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，臨床上還需要將流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)法聯(lián)合進(jìn)行檢驗(yàn)。流式細(xì)胞學(xué)主要是骨髓檢測(cè)，通過(guò)有效的處理之后，利用自動(dòng)化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，影響因素少，準(zhǔn)確率高。

研究結(jié)果顯示，免疫組織化學(xué)法聯(lián)合流式細(xì)胞學(xué)法檢查明顯高于免疫組織化學(xué)法，明免疫組織化學(xué)法聯(lián)合流式細(xì)胞學(xué)法檢查具有較高的檢查準(zhǔn)確率。該研究結(jié)果與王偉偉，徐元宏在免疫表型及非髓系分化抗原表達(dá)分析：對(duì)急性髓細(xì)胞白血病的診斷和預(yù)后判定有應(yīng)用價(jià)值中相關(guān)研究結(jié)果相似度高。

綜上所述，急性髓系白血病患者中采取免疫組織化學(xué)、流式細(xì)胞學(xué)聯(lián)合檢測(cè)MPO陽(yáng)性率高，能夠?yàn)楹罄m(xù)疾病治療提供有效依據(jù)，臨床應(yīng)用價(jià)值高，值得推廣。

參考文獻(xiàn)

[1] 鄭瑞， 章鴦， 陳葆國(guó)，等. 不同方法學(xué)檢測(cè)急性髓系白血病MPO陽(yáng)性率的比較及意義[J]. 醫(yī)學(xué)研究雜志， 2019， 48（03）：88-90+94.

[2] 王偉偉，徐元宏. 免疫表型及非髓系分化抗原表達(dá)分析：對(duì)急性髓細(xì)胞白血病的診斷和預(yù)后判定有應(yīng)用價(jià)值[J]. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)， 2020， 40（11）：109-114.

作者簡(jiǎn)介：

趙江源（1988.02.11——），女，漢族，貴州貴陽(yáng)人，職稱(chēng)：技師，學(xué)歷：本科，研究方向：血液方面。

通訊作者

何燕，貴州醫(yī)科大學(xué)，分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。