元寶楓油βCD包合物的制備工藝及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

吳麗君 喬天蘭 黃鑫康 馬遠(yuǎn)濤

摘?要：目的：本研究?jī)?yōu)選元寶楓油β環(huán)糊精（βCD）包合物的包合方法，為元寶楓油的開(kāi)發(fā)利用提供參考依據(jù)。方法：分別采用單因素考察和正交實(shí)驗(yàn)法，以元寶楓油和βCD投料比、包合時(shí)間、包合溫度等為考察因素，以制劑外觀、包封率、神經(jīng)酸含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選元寶楓油βCD包合物的最佳包合工藝。結(jié)果：元寶楓油βCD包合物的最優(yōu)包合條件：元寶楓油：βCD=1∶8，包合溫度50℃，包合時(shí)間80min。優(yōu)選的最佳元寶楓油βCD包合物包封率均在70%以上，每1g包合物中含神經(jīng)酸1.60mg左右。經(jīng)紫外可見(jiàn)分光光譜法驗(yàn)證、顯微成像觀察，制劑外觀形態(tài)符合要求。結(jié)論：元寶楓油β環(huán)糊精（βCD）包合物的包合工藝設(shè)計(jì)合理、制劑質(zhì)量穩(wěn)定，后期可開(kāi)發(fā)元寶楓油βCD包合物的口服、外用制劑，為臨床應(yīng)用提供新制劑。

關(guān)鍵詞：元寶楓油;βCD包合物;正交實(shí)驗(yàn);氣相色譜法;神經(jīng)酸

元寶楓油源自槭樹(shù)科槭屬（Acer）植物元寶楓[1]（Acer?truncatumBge）干燥種仁，2011年3月被原衛(wèi)生部批準(zhǔn)作為新資源食品[2，3]。元寶楓油中不飽和脂肪酸含量90%以上，亞油酸含量約37%，其中神經(jīng)酸含量約5%[47]。β環(huán)糊精包合物（βCylodextrin?inclusion）是將藥物包于β環(huán)糊精大環(huán)形的分子空穴中形成分子包合物，可增加藥物的溶解度、穩(wěn)定性，掩蓋不良?xì)馕叮岣呱锢枚取Ｒ虼耍菊撐难芯恐苽湓獙殫饔挺颅h(huán)糊精包合物，并對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，發(fā)揮神經(jīng)酸促進(jìn)受損神經(jīng)組織修復(fù)和再生，提高腦神經(jīng)的活躍程度，防止腦神經(jīng)衰老的作用[37]。

1?實(shí)驗(yàn)部分

1.1?試藥與儀器

氣相色譜儀：7890AGC;馬爾文激光粒度儀：ZEN3600;倒置熒光顯微鏡：I×73;紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：Cary60;臺(tái)式高速離心機(jī)：TG1650WS;數(shù)控超聲波清洗器：KH7200DB;萬(wàn)分之一電子天平：ALC210.4。

元寶楓油;神經(jīng)酸標(biāo)準(zhǔn)品：批號(hào)D2450010，純度≥98%;β環(huán)糊精（βCD）;無(wú)水乙醇、正己烷、丙二醇、甲醇：分析純;濃硫酸;純化水等。

1.2?元寶楓油βCD包合物的制備

稱(chēng)取一定量βCD，按1∶20（g/mL）比例加入純化水，于恒溫水浴鍋中加熱、攪拌使溶解，制備βCD溶液。將其轉(zhuǎn)移至超聲儀中，逐滴加入0.5mL元寶楓油，設(shè)定超聲溫度、時(shí)間、功率，進(jìn)行超聲。待冷卻后放入置于冰箱冷藏24h，減壓抽濾得白色粉末，烘箱干燥60℃，5h，粉碎，即得元寶楓油βCD包合物。

1.3?含量測(cè)定方法

元寶楓油中神經(jīng)酸藥理活性最強(qiáng)，因此采用氣相色譜法建立元寶楓包合物中神經(jīng)酸的含量測(cè)定方法[8]。色譜柱：DB5（30m×0.25mm×0.25μm），載氣：高純氮?dú)猓M(jìn)樣器溫度：270℃，氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）檢測(cè)器溫度：320℃，分流比：20∶1，程序升溫：初始溫度為200℃，以2℃/min升至230℃，再以8℃/min升至終溫270℃，保持10min。神經(jīng)酸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為y=29.1x0.18（r=0.9998），精密度、重復(fù)性和穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)考察結(jié)果RSD<2%，加樣回收率95%～105%，RSD<3%，符合要求。

1.4?元寶楓油包合物的質(zhì)量評(píng)價(jià)

建立包合物質(zhì)量評(píng)價(jià)體系：顯微成像分析觀察元寶楓油包合物的外觀形態(tài);紫外分光光度分析包合情況;氣相色譜法測(cè)定元寶楓包合物中神經(jīng)酸的含量;馬爾文激光粒度儀測(cè)定粒徑及Zeta電位;高速離心法考察物理穩(wěn)定性。

2?結(jié)果與討論

2.1?制備工藝的優(yōu)化

2.1.1?單因素考察實(shí)驗(yàn)

取元寶楓油0.5mL，預(yù)設(shè)βCD與元寶楓油的配比為8∶1，包合溫度50℃，包合時(shí)間60min，超聲功率80W為包合工藝流程中相應(yīng)的常規(guī)量，以元寶楓油與βCD的配比（4∶1、6∶1、8∶1、10∶1、12∶1）、包合溫度（30℃、40℃、50℃、60℃、70℃）、包合時(shí)間（20min、40min、60min、80min、100min）及超聲功率（40W、60W、80W、100W、120W）4個(gè)單因素變量替換工藝流程中相應(yīng)的常規(guī)量，按照1.2.項(xiàng)下元寶楓油βCD包合物的制備方法制備包合物，并計(jì)算其包封率。

由圖1、2、3、4可知，βCD與元寶楓油的配比（g/mL）、包合溫度、包合時(shí)間及超聲功率對(duì)包合物的包封率均具有一定影響，綜合考慮影響大小、βCD的性質(zhì)及實(shí)驗(yàn)條件，選用βCD與元寶楓油配比、包合溫度和包合時(shí)間為影響因素設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，優(yōu)選元寶楓油βCD包合物的制備工藝。

2.1.2?正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化元寶楓油包合工藝

以βCD與元寶楓油配比、包合溫度、包合時(shí)間為影響因素，以包封率為考察指標(biāo)設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)因素水平見(jiàn)表1，正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2，方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。

由表2、表3結(jié)果可知，5號(hào)包封率最高。βCD：元寶楓油配比對(duì)包封率影響顯著（p<0.05），由各因素F值大小可知，各因素影響作用的主次順序?yàn)锳>B>C，即βCD：元寶楓油>包合溫度>包合時(shí)間。

綜上因素及包合物外觀分析，確定元寶楓油βCD包合物最佳包合工藝為A2B2C3，即βCD與元寶楓油配比為8∶1，包合溫度為50℃，包合時(shí)間為80min。

2.1.3?元寶楓油最優(yōu)包合工藝參數(shù)的驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

為檢驗(yàn)元寶楓油βCD包合物最佳包合工藝的可靠性，進(jìn)行4組重復(fù)實(shí)驗(yàn)。元寶楓油βCD包合物包封率均在70%以上，產(chǎn)率約為75%。采用氣相色譜法測(cè)定元寶楓油βCD包合物中神經(jīng)酸含量，每1g元寶楓油βCD包合物含神經(jīng)酸1.60mg。4組重復(fù)實(shí)驗(yàn)包封率、得率及神經(jīng)酸含量均與正交實(shí)驗(yàn)最優(yōu)結(jié)果一致，較為穩(wěn)定。結(jié)果表明，正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化獲得的最佳工藝參數(shù)可靠有效。