血清人附睪蛋白4、糖類抗原724、糖類抗原125和羅馬指數(shù)在卵巢癌風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中的應(yīng)用分析

吳秋花 蔡云祥

據(jù)估計(jì)，2018年全球有29萬(wàn)卵巢癌新病例和18.4萬(wàn)卵巢癌相關(guān)死亡病例［1］，晚期患者的5年生存率只有20%～40%，卵巢癌的有效篩查與盡早發(fā)現(xiàn)可影響疾病預(yù)后，高靈敏度及高特異性的診斷工具必不可少［2］。血清CA125檢測(cè)是卵巢癌篩查中最常用的方法［3］，但CA125水平受各種生理因素及子宮內(nèi)膜異位癥等良性腫瘤的影響［4］。研究發(fā)現(xiàn)，HE4在卵巢癌組織中過(guò)度表達(dá)［5］，CA724水平在各種卵巢黏液性癌中異常升高［6］。近年來(lái)，一項(xiàng)國(guó)外多中心研究采用CAl25和HE4的檢測(cè)值建立卵巢癌風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)模型（ROMA），可用于預(yù)測(cè)絕經(jīng)前后的卵巢癌風(fēng)險(xiǎn)。CA724鑒別診斷卵巢癌的敏感性雖低于CA125，但不受月經(jīng)周期或妊娠的影響［7］。本研究旨在評(píng)估CA125、HE4和CA724的臨床有用性，以及羅馬（ROMA）指數(shù)對(duì)卵巢癌的鑒別診斷價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 收集2017年1月至2018年9月于本院住院并擬行手術(shù)治療的盆腔腫物患者血清樣本64例，根據(jù)術(shù)后石蠟切片病理結(jié)果分為卵巢癌組（31例）和卵巢良性腫瘤組（33例）。其中，卵巢良性腫瘤組包括子宮肌瘤8例、卵巢囊腫6例、成熟型囊性畸胎瘤4例、未明確分類良性腫瘤15例，患者年齡21～73歲，平均41歲；卵巢癌組患者年齡24～71歲，平均52歲。另收集同期于本院健康體檢女性的血清樣本40例作為對(duì)照，健康女性的年齡為18～80歲，平均48歲，體檢時(shí)不在月經(jīng)期，無(wú)心、肝、肺、胃等重要臟器的疾患，肝、腎功能正常，無(wú)腫瘤家族史及痛經(jīng)史。絕經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)：年齡≥60歲或年齡<60歲，自然閉經(jīng)≥12個(gè)月且FSH、雌激素水平處于絕經(jīng)期范圍內(nèi)。

1.2 研究方法 （1）標(biāo)本采集：采集所有研究對(duì)象空腹靜脈血5 mL，血液樣本置于血清分離管中，送至實(shí)驗(yàn)室后30 min離心，-70 ℃下儲(chǔ)存?zhèn)溆谩＃?）血清CA125、HE4和CA724水平檢測(cè)：使用羅氏電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（Cobas E602分析儀）及其配套試劑，嚴(yán)格按照儀器和試劑的說(shuō)明書及項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行檢測(cè)。CA125的測(cè)量范圍為0.6～5000 IU/mL，HE4的測(cè)量范圍為15～1500 pmoL/L，CA724的測(cè)量范圍為0.2～300 IU/mL。（3）ROMA指數(shù)計(jì)算：使用羅氏電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀自帶軟件，根據(jù)CA125和HE4的分析結(jié)果，計(jì)算絕經(jīng)前和絕經(jīng)后患者的ROMA值。ROMA值（%）=exp（PI）/［1+exp（PI）］×100%，其中PI計(jì)算如下：①絕經(jīng)前PI=-12.0+2.38×LN（HE4）+0.0626×LN（CA125）；②絕經(jīng)后PI=-8.09+1.04×LN（HE4）+0.732×LN（CA125）。

1.3 觀察指標(biāo) （1）根據(jù)說(shuō)明書建議，CA125的正常參考值為<35 U/mL，HE4的正常參考值為（絕經(jīng)前）<92.1 pmoL/L、（絕經(jīng)后）<121 pmoL/L，CA724≤6.9 IU/mL。（2）根據(jù)軟件說(shuō)明書ROMA指數(shù)（絕經(jīng)前）參考值<11.4%，ROMA指數(shù)（絕經(jīng)后）值<29.9%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料不符合正態(tài)分布，以［M（P25，P75）］表示，多組比較采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，兩組之間比較采用Dunn-Bonferroni檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以［n（%）］表示，采用χ2檢驗(yàn)和RXC表χ2檢驗(yàn)，靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值以及陰性預(yù)測(cè)值采用配對(duì)χ2檢驗(yàn)；以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn)繪制ROC曲線。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組的血清學(xué)指標(biāo)及ROMA指數(shù)比較 三組的各項(xiàng)指標(biāo)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；組間兩兩比較，卵巢癌組的各項(xiàng)指標(biāo)高于其他兩組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1和圖1。

表1 三組的血清學(xué)指標(biāo)及ROMA指數(shù)比較［M（P25，P75）］

圖1 各項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)及ROMA指數(shù)組間比較

2.2 血清CA125、HE4、CA724與ROMA指數(shù)診斷一致性比較 CA125的檢驗(yàn)結(jié)果與ROMA指數(shù)的一致性比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；CA724和HE4與ROMA指數(shù)在檢驗(yàn)結(jié)果一致性上比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 血清CA125、HE4、CA724與ROMA指數(shù)診斷一致性比較

2.3 血清CA125、HE4、CA724及ROMA指數(shù)鑒別診斷卵巢癌的應(yīng)用價(jià)值 CA724和HE4的靈敏度最低，均為41.94%；ROMA指數(shù)+CA724+CA125和ROMA指數(shù)+CA724+CA125+HE4的靈敏度最高，均為87.10%；兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=47.621，P<0.05）。ROMA指數(shù)+CA724+CA125和ROMA指數(shù)+CA724+CA125+HE4的特異性最低，均為82.19%；HE4的特異性最高（100%）；兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=36.582，P<0.05）。各指標(biāo)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=12.546/22.337，P>0.05）。見(jiàn)表3。

表3 血清CA125、HE4、CA724及ROMA指數(shù)鑒別診斷卵巢癌的應(yīng)用分析［n（%）］

2.4 四項(xiàng)指標(biāo)鑒別診斷卵巢癌的ROC曲線評(píng)價(jià) 四項(xiàng)指標(biāo)的最佳截?cái)嘀捣謩e為：ROMA=11.385%，CA125=23.4 IU/mL，CA724=8.65 IU/mL，HE4=58.065 pmoL/L。曲線下面積最大的指標(biāo)組合是，ROMA指數(shù)+CA125（AUC=0.951，95%CI：0.908～0.995），ROMA指數(shù)+CA125+HE4（AUC=0.951，95%CI：0.907～0.994），其所對(duì)應(yīng)的靈敏度和特異性分別為97%、83.1%。曲線下面積最小的是，CA724（AUC=0.719，95%CI：0.611～0.826），靈敏度和特異性分別為36.4%、97.2%。見(jiàn)表4和圖2。

表4 基于ROC曲線四項(xiàng)指標(biāo)最佳截?cái)嘀佃b別診斷卵巢癌的應(yīng)用分析

圖2 各指標(biāo)單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線

3 討論

卵巢癌作為婦科惡性腫瘤的一種，在我國(guó)的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)，對(duì)女性健康構(gòu)成了重大威脅，已引起婦科及檢驗(yàn)領(lǐng)域?qū)＜业膹V泛關(guān)注［8］。由于缺乏有效的篩查手段，70%～75%的患者確診時(shí)已處于晚期［9］。血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)是目前臨床上卵巢癌早期篩查、輔助診斷、病情監(jiān)測(cè)和判斷預(yù)后的主要技術(shù)手段［10］。受限于某一種腫瘤可能表達(dá)多個(gè)血清腫瘤標(biāo)志物，或一個(gè)腫瘤標(biāo)志物可出現(xiàn)于多種腫瘤疾病中，導(dǎo)致單個(gè)血清腫瘤標(biāo)志物用于腫瘤篩查時(shí)的靈敏度和特異性降低，因此需要聯(lián)合多個(gè)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)以提高篩查的靈敏度和特異性。

本研究對(duì)血清CA125、CA724、HE4及ROMA指數(shù)四項(xiàng)指標(biāo)單項(xiàng)及聯(lián)合檢測(cè)在卵巢癌鑒別診斷的應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)四個(gè)指標(biāo)在卵巢癌中的表達(dá)水平高于卵巢良性腫瘤組和健康女性對(duì)照組，而卵巢良性腫瘤患者和健康女性中此四項(xiàng)指標(biāo)的表達(dá)水平無(wú)明顯差異（P>0.05），間接說(shuō)明血清CA125、CA724、HE4及ROMA指數(shù)用于卵巢癌的鑒別診斷存在理論價(jià)值。比較分析四項(xiàng)指標(biāo)鑒別診斷卵巢癌的效能，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。其中，血清CA125診斷卵巢癌的靈敏度最高（77.42%），特異性最低（41.94%），而HE4的特異性最高（100%），靈敏度最低（41.94），與CA724的靈敏度相近，說(shuō)明采用單一血清腫瘤標(biāo)志CA125或CA724或HE4診斷卵巢癌均存在不足。另外，可能是由于本研究的陽(yáng)性例數(shù)較少，致使各指標(biāo)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值比較無(wú)明顯差異（P>0.05）。而采用聯(lián)合指標(biāo)評(píng)價(jià)可有效提高診斷的靈敏度和特異性，其中ROMA指數(shù)+CA724+CA125的診斷靈敏度高達(dá)87.10%，CA724+HE4的診斷特異性高達(dá)97.26%，充分說(shuō)明臨床鑒別診斷卵巢癌過(guò)程中聯(lián)合檢測(cè)具有必要性和實(shí)用性。

實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)指標(biāo)的正常參考范圍通常依據(jù)試劑說(shuō)明書制定，而臨床醫(yī)生以此范圍診斷卵巢癌的發(fā)生常存在誤區(qū)，本研究進(jìn)一步繪制ROC曲線，研究表明四項(xiàng)指標(biāo)的最佳截?cái)嘀捣謩e為：ROMA=11.385%（由于絕經(jīng)后的樣本少，所以在此進(jìn)行區(qū)分），CA125=23.4 IU/mL，CA724=8.65 IU/mL，HE4=58.065 pmoL/L；其中CA125的靈敏度最高（90.9%），CA724的特異性最高（97.2%）。由此可見(jiàn)，選擇合適的最佳截?cái)嘀祵?duì)于卵巢癌的鑒別診斷同樣至關(guān)重要。另外，還發(fā)現(xiàn)曲線下面積最大的是ROMA指數(shù)+CA125，ROMA指數(shù)+CA125+HE4；曲線下面積最小的是CA724。說(shuō)明卵巢癌診斷中ROMA指數(shù)聯(lián)合CA125或CA125聯(lián)合HE4均具有較高的應(yīng)用價(jià)值，考慮到ROMA指數(shù)是根據(jù)CA125和HE4的結(jié)果計(jì)算所得，因此建議臨床診斷時(shí)三者聯(lián)合使用。CA724的聯(lián)合檢測(cè)效能不如另外三項(xiàng)，但可用于鑒別某些患者腫瘤的良惡性和卵巢子宮內(nèi)膜異位癥［11］，可能是由于本文的病例選擇存在局限性，未對(duì)卵巢癌的組織來(lái)源進(jìn)行區(qū)分，導(dǎo)致CA724的診斷效能下降，有待進(jìn)一步的研究與論證。