一線化療聯合分子靶向治療乳腺癌患者的效果及對束蛋白結合蛋白1、17 β-羥基類固醇脫氫酶表達水平的影響

陳曉亮，王紅旗，楊留勤

1新鄉醫學院第四臨床學院放射治療科，河南 新鄉 453000

2平煤神馬醫療集團總醫院放射治療科，河南 平頂山 467000

乳腺癌是一種常見于女性人群的惡性腫瘤，在中國隨著人們生活習慣的改變，乳腺癌的發病率呈逐年上升趨勢。乳腺癌的病死率在女性惡性腫瘤中極高，給女性患者的生存質量造成嚴重的影響。隨著醫療技術水平不斷的進步，乳腺癌的治療方法也在不斷的改善，目前主要的治療方法多為手術治療，但會嚴重降低患者的生活質量，且手術會使患者乳房缺失，導致患者不良情緒的發生。目前治療乳腺癌的主要方法為分子靶向治療，可以有效延長腫瘤患者的生存期，有效降低復發風險，治療效果顯著。但分子靶向治療不良反應明顯，尤其在內分泌系統方面，常見的不良反應如胰島素抵抗、糖代謝紊亂。束蛋白結合蛋白1（fascin actin-bundling protein 1，FSCN1）基因與細胞遷移和腫瘤細胞侵襲的流動性和轉移有著重要的聯系，目前，FSCN1基因已被認為在腫瘤細胞侵襲、轉移過程中有著執行者的重要作用。相關研究表明，17β-羥基類固醇脫氫酶（17β-hydroxysteroid dehydrogenase，17β-HSD）表達水平對維持細胞生長有著關鍵作用，可以促進乳腺癌組織中的雌激素受體陽性細胞的生長。本研究旨在探究一線化療聯合分子靶向治療乳腺癌患者的效果及對FSCN1、17β-HSD表達水平的影響，以期為臨床研究提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年4月至2021年2月于新鄉醫學院第四臨床學院就診的乳腺癌患者。納入標準：經病理組織學檢查，符合中國抗癌協會乳腺癌專業委員會對乳腺癌相關診斷標準；溝通無障礙；無嚴重的重要器官疾病。排除標準：合并其他惡性腫瘤；伴有認知功能及精神障礙；心臟功能不全；對本研究干預發生抵抗。根據納入與排除標準，共納入152例患者，根據治療方法的不同分為一線化療組與聯合干預組，每組76例，一線化療組采用一線化療方法，聯合干預組在一線化療組基礎上聯合分子靶向治療。一線化療組患者中，年齡30～65歲，平均（46.5±5.2）歲；臨床分期：Ⅰ期36例，Ⅱ期40例；病程：2年以下36例，2年及以上40例。聯合干預組患者中，年齡32～64歲，平均（47.5±5.4）歲；臨床分期：Ⅰ期37例，Ⅱ期39例，病程：2年以下35例，2年及以上41例。兩組患者年齡、臨床分期、病程比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 治療方法

一線化療組使用常規藥物進行治療，常規藥物包括環磷酰胺、氟尿嘧啶及表柔比星，靜脈輸注環磷酰胺，用量為50 mg/m，第1、8天；靜脈輸注表柔比星，用量為50 mg/m，第1天；靜脈輸注5-氟尿嘧啶，用量為500 mg/m，第1～3天，采用常規化療方法，3周為1個周期。聯合干預組在一線化療組基礎上聯合分子靶向治療，針對靶點人類表皮生長因子受體（human epidermal growth factor receptor，HER），靜脈滴注曲妥珠單抗，用量8 mg/kg，3周后降低用量為6 mg/kg，以3周為1個周期。兩組患者均連續治療4個周期。

1.3 觀察指標及檢測方法

1.3.1 應激反應 記錄兩組患者一氧化氮（nitric oxide，NO）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）及血清皮質醇（cortisol，Cor）水平變化。治療前后抽取肘靜脈血，常規抗凝、離心，分離血清后擱置于-80℃的環境下保存待檢，使用酶聯免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）測定NO水平，羥胺法檢測SOD水平，放射免疫法檢測Cor，試劑盒均購自南京建成生物工程研究所，嚴格按照說明書進行操作，由經驗豐富的醫師操作并進行比較。

1.3.2 血管新生指標 使用ELISA檢測血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）A、B水平，試劑盒購自深圳晶美生物工程有限公司，操作均按照說明書嚴格進行，由經驗豐富的醫師操作并進行比較。。

1.3.3 生活質量評分 使用生活質量量表評估患者的生活質量情況，從生理領域、心理領域、環境領域及獨立性領域進行評估，總分共105分，分數越高則生活質量越高。

1.3.4 FSCN 1、17 β-HSDFSCN1：將標本以磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered solution，PBS）沖洗后，進行微波抗原修復，室溫冷卻，且使用過氧化氫阻斷，加入FSCN1單克隆抗體4℃過夜，抗體濃度為1∶500，采用EnVision法并加入辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）二抗，二氨基聯苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色，使用蘇木素復染，封片。以FSCN1在組織標本血管內皮表達為陽性對照，PBS取代一抗作為陰性對照。17β-HSD：將標本以PBS沖洗后，加入7型17β-HSD抗體，抗體濃度為1∶500，并放置在溫度為4℃環境下過夜，之后加入EnVision HRP二抗，濃度為1∶200，室溫下孵育4 h，使用DAB過氧化氫溶液浸泡5 min顯色，蘇木精復染30 s，自來水沖洗5 min，酸性乙醇溶液沖洗，乙醇及甲苯浸泡，封片。本研究所使用試劑均購自上海聯邁生物工程公司。參照文獻[10-11]對顯微鏡下的細胞質染色情況進行陰陽性結果判斷。

1.3.5 不良反應 不良反應包括脫發、肝腎損傷、惡心嘔吐及其他，由經驗豐富的醫師進行記錄、比較。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 應激反應的比較

治療前，兩組患者NO、SOD及Cor水平比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者NO、Cor水平均明顯低于治療前，SOD水平均明顯高于治療前，且聯合干預組患者NO、Cor水平明顯低于一線化療組患者，SOD水平明顯高于一線化療組患者，差異均有統計學意義（P＜0.01）。（表1）

表1 治療前后兩組患者NO、SOD及Cor水平的比較

2.2 血管新生指標的比較

治療前，兩組患者VEGFA、VEGFB水平比較，差異均無統計學意義(P＞0.05)；治療后，兩組患者VEGFA、VEGFB水平均明顯低于本組治療前，且聯合干預組VEGFA、VEGFB水平均明顯低于一線化療組患者，差異均有統計學意義（P＜0.01）。（表2）

表2 治療前后兩組患者VEGFA、VEGFB水平的比較

2.3 生活質量評分的比較

治療前，兩組患者生活質量各維度評分比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者生活質量各維度評分均明顯高于本組干預前，且聯合干預組患者生活質量各維度評分均明顯高于一線化療組患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表3）

表3 治療前后兩組患者生活質量評分的比較

2.4 FSCN 1、17 β-HSD陽性情況的比較

治療前，兩組患者FSCN1、17β-HSD陽性率比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；治療后，兩組患者FSCN1、17β-HSD陽性率均低于本組治療前，且聯合干預組患者FSCN1、17β-HSD陽性率均低于一線化療組患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。（表4）

表4 兩組患者FSCN 1、17 β-HSD陽性表達情況的比較

2.5 不良反應發生情況的比較

聯合干預組患者不良反應總發生率為7.89%（6/76），明顯低于一線化療組的28.95%（22/76），差異有統計學意義（χ=11.207，P＜0.01）。（表5）

表5 兩組患者不良反應發生情況[n（%）]

3 討論

乳腺癌是危害女性身心健康的惡性腫瘤，居世界排名第一位。隨著中國工業化的飛速發展及人口城市化的不斷推進，乳腺癌發病率有著明顯的上升趨勢。目前，化療是治療乳腺癌患者的重要方法之一。近年來，在乳腺癌患者治療中應用化療，其病死率明顯下降，但化療過程中出現的不良反應較多。近年來，隨著對乳腺癌分子機制深入的研究，發現其發展與體內信號通路的異常及癌基因的表達產物有密切的關系，目前，隨著一系列有針對性的分子靶向治療不斷出現，乳腺癌患者的治療效果有了明顯的提高，這已經成為中國醫學人員研究的重點。

血清NO是血管上皮細胞、內皮細胞、巨噬細胞及部分神經細胞所釋放的血管活性物質，濃度較低的NO能使肺血管、支氣管平滑肌擴張。Cor由腎上腺皮質醇分泌，屬于甾體糖皮質激素類，其表達受限于垂體，能夠反映腎上腺皮質的分泌功能。血清Cor在健康人體中表達較低，但不間斷的應激反應能夠使Cor升高，當Cor升高會加劇患者心理波動。SOD為抗氧化酶系中的重要成員之一，在植物、動物及微生物體內廣泛存在，其表達水平能夠顯示機體的應激情況。本研究結果顯示，治療后，兩組患者NO、Cor水平均明顯低于治療前，SOD水平均明顯高于治療前，且聯合干預組NO、Cor水平明顯低于一線化療組患者，SOD水平明顯高于一線化療組患者，說明一線化療聯合分子靶向治療乳腺癌，可以降低血管活性物質的釋放及腎上腺皮質激素的分泌，改善機體的應激情況。

VEGFA為一種促進腫瘤血管生長的重要生長因子，主要表現為誘導腫瘤血管生長。目前，研究表明VEGFA不僅在腫瘤血管新生中有重要的作用，還能夠間接調控腫瘤細胞的遷移、侵襲、炎癥反應等。研究顯示，VEGFA在調控腫瘤細胞化療藥物敏感性方面有重要的作用，通過抑制VEGFA的表達可以促進腫瘤細胞死亡從而增加化療的敏感性。VEGFB是腫瘤生長及轉移能力方面非常重要的指標，其主要表現為促進血管通透性增強，導致細胞外基質變性和血管內皮生長及轉移。本研究結果顯示，治療后，兩組患者VEGFA、VEGFB水平均明顯低于本組治療前，且聯合干預組VEGFA、VEGFB水平均明顯低于一線化療組患者，說明一線化療聯合分子靶向治療乳腺癌可有效抑制腫瘤血管的新生，從而降低了腫瘤的生長及轉移能力。

乳腺癌患者常伴有疼痛，且術后對患者的日常生活及自理能力均造成了嚴重的影響，如梳頭、穿衣等。患者常因自己患有乳腺癌而苦惱，增加了心理壓力，出現明顯的不良情緒，使睡眠質量下降，導致患者的軀體功能、情感功能及認知功能等均明顯下降。乳腺癌患者不能及時回歸正常生活，康復時間較長，導致患者喪失信心，從而遠離人群，嚴重影響了其社會功能，導致患者的生活質量明顯下降。本研究結果顯示，治療后，兩組患者生活質量各維度評分均明顯高于本組干預前，且聯合干預組生活質量各維度評分均明顯高于一線化療組，說明一線化療聯合分子靶向治療乳腺癌可有效提高患者的生活質量，從而增強患者的信心。

FSCN1蛋白常分布在乳腺癌及良性病變組織中，在乳腺癌組織中呈彌漫性分布，同時在卵巢周邊部的腫瘤細胞染色較強。FSCN1調節多種腫瘤的相關基因，如基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）2、MMP9，且可通過其他途徑調節腫瘤細胞的侵襲性，如WNT通路及類胰島素生長因子受體Ⅰ等。17β-HSD是一種依賴性氧化還原酶，可氧化類固醇的第17位碳而得名。在煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，NAD）P的幫助下，可氧化17-羥基類，還原17-酮，使18碳及19碳的類固醇失活。本研究結果顯示，治療后，兩組患者FSCN1、17β-HSD陽性率均低于本組治療前，且聯合干預組患者FSCN1、17β-HSD陽性率均低于一線化療組患者，說明一線化療聯合分子靶向治療乳腺癌有良好的療效，可有效抑制腫瘤的病變。

綜上所述，在乳腺癌患者中運用一線化療聯合分子靶向治療，可以改善機體的應激情況，有效抑制腫瘤血管的新生及腫瘤細胞的生長、轉移能力，提高患者的生活質量，增強患者的信心，對乳腺癌患者有良好的治療效果。