新生兒化膿性腦膜炎神經系統并發癥與血清 NSE、S-100B、NT-proCNP水平的關系研究

侯秋英 應勤來 張梅娟 滕懿群

新生兒化膿性腦膜炎指出生后28 d內細菌感染引起的腦膜炎癥，由于新生兒免疫系統發育不成熟，血腦屏障通透性大，細菌容易透過血腦屏障進入顱內，因此，發病率較高[1]。不同國家和地區新生兒化膿性腦膜炎的病原菌分布和種類有明顯差異[2-3]。本病治療時間長，大多數病原菌難以清除，約15%～18%的患兒可發生神經系統并發癥，其中約10%～20%可出現神經系統后遺癥（包括行為異常、學習困難，嚴重者可出現聽力喪失、智力低下、癲癇等）[4]。因此，早期診斷和治療新生兒化膿性腦膜炎對改善患兒預后具有重要意義，但目前尚缺乏有效的方法。血清神經元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、S100 鈣結合蛋白 B（S100 calcium binding protein B，S-100B）、C 型利鈉肽（C-type natriuretic peptide，NT-proCNP）是神經膠質和神經元損傷的外周血標志物[5]。國內尚未見3者聯合應用預測新生兒化膿性腦膜炎神經系統并發癥發生的報道。本研究通過探討新生兒化膿性腦膜炎神經系統并發癥與血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平的關系，為早期識別和治療神經系統并發癥提供依據。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2017年1月至2019年12月嘉興市第二醫院和浙江省臺州醫院NICU收治的新生兒化膿性腦膜炎患兒168例（其中嘉興市第二醫院96例、浙江省臺州醫院72例）。新生兒化膿性腦膜炎參照《實用新生兒學》的標準進行診斷，即具備感染和化腦的臨床表現，腦脊液常規、生化檢查結果符合化腦的診斷標準或腦脊液中培養出細菌[6]。納入標準：符合上述診斷標準的出生后28 d內新生兒（足月兒、校正胎齡早產兒）。排除標準：患有新生兒缺氧缺血性腦病、顱內出血、腦脊膜膨出、膽紅素腦病、凝血功能異常或遺傳代謝性疾病者。根據有無神經系統并發癥，將患兒分為有并發癥組29例和無并發癥組139例。有并發癥組男15例，女14例；胎齡36+6（34+2，39+6）周；出生體重3 030（2 580，3 920）g；神經系統并發癥：聽力損害12例，腦積水6例，硬膜下積液4例，顱內出血和腦室管膜炎各2例，腦軟化和腦梗死各1例。無并發癥組男71例，女68例；胎齡37+6（34+6，39+4）周；出生體重 3 280（2 660，3 980）g。兩組患兒性別、胎齡、出生體重等比較，差異均無統計學意義（均P＞0.05）。本研究經嘉興市第二醫院醫學倫理委員會審批通過，所有患兒家屬均簽署知情同意書。

1.2 血清 NSE、S-100B、NT-proCNP水平檢測 采用ELISA法。所有患兒入院時抽取靜脈血3 ml，置試管常溫下3 000 r/min離心20 min，取上清液-70℃凍存待測。采用美國雅培LB960化學發光分析儀檢測血清NSE水平，采用美國Cygnus公司S-100A12試劑盒檢測血清S-100B水平，采用BIOMEDICA公司48T試劑盒檢測血清NT-proCNP水平。上述操作均嚴格按照實驗說明書進行。

1.3 腦脊液細菌培養 經家屬知情同意后行腰椎穿刺術，無菌試管留取1.5 ml腦脊液，均送實驗室作細菌培養。

2 結果

2.1 兩組患兒血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平比較 有并發癥組患兒血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平均明顯高于無并發癥組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表1。

表1 兩組患兒血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平比較

2.2 血清NSE、S-100B、NT-proCNP預測新生兒化膿性腦膜炎發生神經系統并發癥的效能 ROC曲線顯示，血清NSE的AUC為0.715，靈敏度為0.817，特異度為0.746；S-100B 的AUC 為0.693，靈敏度為 0.654，特異度為0.887；NT-proCNP的AUC為0.796，靈敏度為0.827，特異度為0.916。當NSE、S-100B及NT-proCNP 3者聯合評估時，AUC為0.896，靈敏度為0.870，特異度為0.903。3者聯合檢測較血清NSE、S-100B、NT-proCNP單獨檢測更有意義（均P＜0.01），見圖1-2。

圖1 血清神經元特異性烯醇化酶（NSE）、S100鈣結合蛋白B（S-100B）、C型利鈉肽（NT-proCNP）預測新生兒化膿性腦膜炎患兒發生神經系統并發癥的ROC曲線

圖2 血清神經元特異性烯醇化酶（NSE）、S-100鈣結合蛋白B（S-100B）、C型利鈉肽（NT-proCNP）3者聯合預測新生兒化膿性腦膜炎發生神經系統并發癥的ROC曲線

2.3 新生兒化膿性腦膜炎患兒腦脊液細菌培養陽性病原菌分布 168例患兒腦脊液細菌培養陽性39例（23.21%），其中革蘭陽性菌占53.85%（21/39），以B族溶血鏈球菌最多；革蘭陰性菌占46.15%（18/39），以大腸埃希菌最多，見表2。

表2 39例新生兒化膿性腦膜炎患兒腦脊液培養陽性病原菌分布

3 討論

新生兒化膿性腦膜炎是新生兒時期常見的中樞神經系統感染，多為血流感染，也有鄰近組織感染細菌直接侵入腦膜引起。目前，新生兒化膿性腦膜炎確診的重要方法是腦脊液常規生化檢查，金標準仍是腦脊液的病原學檢查，但存在常規細菌培養陽性率低、耗時長等問題[7]。在積極治療的同時，行腦脊液聚合酶鏈反應及病原菌DNA檢測可以提高病原陽性檢出率[8]。新生兒化膿性腦膜炎由于臨床表現缺乏特異性，早期診斷困難，常并發聽力損害、腦積水、硬膜下積液等并發癥，其致病菌以B族溶血鏈球菌、大腸埃希菌為主[6]，與本研究相一致。

新生兒化膿性腦膜炎早期表現不典型，顱內高壓癥狀不明顯，又缺乏神經系統陽性體征，容易延誤診治，病情嚴重時會導致死亡，即使幸存也可能會有后遺癥，嚴重影響兒童的生活和健康[9]。隨著醫學影像學技術的提高，通過CT和MRI檢查可發現并發癥[10]。Zhang等[11]報道MRI增強FLAIR序列掃描對新生兒化膿性腦膜炎的早期診斷率較高，但有放射性輻射、對比劑及鎮靜劑使用等局限性。因此，積極尋找有意義的血清生物學標志物顯得尤為重要。

NSE是胞質內糖酵解酶烯醇化酶的神經元型，對神經元和神經外胚層細胞有特異性[12]。S-100B是螺旋-環-螺旋結構家族的一種酸性鈣結合蛋白[13]，主要存在于神經膠質細胞及特定的神經元亞群中，是腦損傷的常用非特異性標志物[14]。已有報道證實，急性細菌性腦膜炎患者腦代謝受損程度與NSE水平有關，其水平持續升高，表明腦組織持續受損惡化[15]。在結核性腦膜炎患兒，S-100B和NSE在第1周的初始濃度和最高濃度與不良預后相關，早期檢測對其診斷具有重要價值[16-17]。NT-proCNP作為利鈉肽的活性形式之一，主要由血管內皮產生，在中樞神經系統和腎臟中有表達[18]。NT-proCNP與炎癥性疾病有關，是膿毒癥的潛在標志物，當并發顱內感染和中毒性腦病時其明顯升高；而且在膿毒癥早期，血漿NT-proCNP的高峰濃度可能有助于預測神經系統陽性癥狀及神經功能障礙的發生[5]。本研究發現有并發癥組患兒血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平均高于無并發癥組，與上述研究結果相一致，且3者聯合檢測更有意義。

綜上所述，血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平與新生兒化膿性腦膜炎的神經系統并發癥發生有關。在積極治療新生兒化膿性腦膜炎的同時，建議及時檢測血清NSE、S-100B、NT-proCNP水平，有助于早期識別發生神經系統并發癥的可能，從而改善預后。