化學發光免疫測定在糖尿病生化免疫檢驗中的應用

蔡輝，張春訪

啟東市中醫院檢驗科，江蘇啟東 226200

糖尿病是臨床常見病癥之一，屬于慢性代謝性疾病的一種，多由胰島素分泌功能異常而引起，具有發病率高、病程較長等特點，發病機制尚不完全明確，普遍認為年齡、環境及遺傳因素等均與該疾病發生、發展密切相關[1]。對于糖尿病患者，由于機體長時間處于高血糖環境中，細菌繁殖加快，可損傷多器官功能[2-4]。目前，臨床尚未有治愈糖尿病的方法，僅可通過終身服藥，以延緩患者疾病進展，控制患者血糖水平，因此，早發現、早治療是改善糖尿病患者預后的關鍵。對于糖尿病診斷，臨床常采取尿檢方法，雖可準確診斷疾病，但存在一定假陰性、假陽性情況，有一定局限性[5]。化學發光免疫測定是近年最新的免疫測定技術之一，因其具有特異度高、靈敏度高、安全性高及準確率高等優勢，被廣泛應用于糖尿病生化免疫檢驗中，可明確判斷緩和血糖情況，以此為臨床診治提供可靠依據[6]。該次選取2019 年1 月—2021 年3 月收治的166 例糖尿病患者及100 名健康體檢者，研究糖尿病生化免疫檢驗中化學發光免疫測定的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院收治的166 例糖尿病患者為觀察組，納入標準：①均經臨床確診為糖尿病；②年齡均≥18 歲；③資料完整；④知情同意；⑤研究所選病例獲倫理委員會批準。排除標準：①合并惡性腫瘤者；②合并精神疾病者；③合并血液系統疾病者；④檢測前使用降糖類藥物及胰島素者；⑤中途退出者；⑥處于妊娠期者；⑦合并嚴重內分泌失調者；⑧合并嚴重心、肝、腎功能不全者。同期選取100名健康體檢者作為對照組，男55 名，女45 名；年齡37～85 歲，平均（65.12±2.31）歲。觀察組男91 例，女75 例；年齡40～90 歲，平均（65.34±2.14）歲。兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。具有可比性。

1.2 方法

檢測前1 d，指導受檢者于晚餐后禁食，于清晨時間段，抽取患者4 mL 空腹靜脈血，取血后給予受檢者無水葡萄糖75 g，記錄進食時間，并于進食1 h、2 h 抽取患者4 mL 靜脈血；對所采集靜脈血進行離心處理，設備選用BIOBASE 型低速冷凍離心機，設置轉速為3 500 r/min，離心時間為10 min，分離血清后冷凍保存；應用化學免疫分析技術測定胰島細胞抗體（islet cell anti body，ICA）、谷氨酸脫羧酶抗體（glutamate decarboxylase antibody，GADA）水平；設備選取AU5800 型奧林巴斯生化儀，由貝克曼公司提供，葡萄糖測定試劑盒由上海科華生物醫藥有限公司提供，測定受檢者空腹血糖、餐后2 h 血糖水平；設備選用cobase411 型全自動電化學發光免疫分析儀，由羅氏公司提供，C 肽（C-peptide）、胰島素（insulin）檢測試劑盒，由羅氏診斷試劑公司提供，測定C 肽、胰島素水平；嚴格遵照說明書操作。

1.3 觀察指標

①分析化學發光免疫測定的檢測結果，計算診斷準確率；②對比兩組空腹血糖、餐后2 h 血糖水平；③比較兩組于空腹狀態、餐后1 h、餐后2 h 的胰島素、C 肽水平。

清晨時空腹（空腹時間＞8 h）血糖水平≥7.0 mmol/L；任意時刻葡萄糖濃度均≥11.1 mmol/L；葡萄糖負荷2 h后，靜脈血漿葡萄糖濃度≥11.1 mmol/L，即為糖尿病。

1.4 統計方法

采用SPSS 19.0 統計學軟件對數據進行分析，計量資料采用（）表示，進行t 檢驗；P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 檢測結果分析

經化學發光免疫測定，166 例患者中檢出糖尿病156 例，檢測準確率為93.98%（156/166）。

2.2 兩組血糖水平對比

空腹血糖、餐后2 h 血糖比較，觀察組均高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），見表1。

表1 兩組血糖水平比較[（）,mmol/L]

表1 兩組血糖水平比較[（）,mmol/L]

2.3 兩組C 肽及胰島素水平對比

空腹狀態下、餐后2 hC 肽、胰島素水平比較，觀察組均高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）；餐后1 hC 肽、胰島素水平比較，觀察組均低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），見表2、表3。

表2 兩組C 肽水平比較[（）,ng/mL]

表2 兩組C 肽水平比較[（）,ng/mL]

表3 兩組胰島素水平比較[（）,U/mL]

表3 兩組胰島素水平比較[（）,U/mL]

3 討論

隨著生活水平不斷提高，人們飲食結構等均發生改變，糖尿病發病率呈上升趨勢，且發病人群趨向于年輕化。統計資料顯示，我國糖尿病患病率為8%～12%，而年齡≥20 歲成年人患病率高達15%～20%[7]。糖尿病屬于全身性疾病的一種，由機體內胰島素分泌不足，導致糖代謝紊亂而引起。該病患者機體長期處于高糖環境下，有利于細菌繁殖，進而引發一系列并發癥，如糖尿病足等，嚴重者可致殘甚至死亡。臨床將糖尿病分為1 型、2型糖尿病兩種類型，多見2 型糖尿病。2 型糖尿病以疲乏無力、肥胖及口渴等為主要表現。中老年人是糖尿病高發人群，由于其免疫力低下，隨著疾病進展可誘發一系列合并癥，還可引起低血糖等并發癥，進而提高病死率。目前臨床治療糖尿病以藥物控制為主，需患者保持服藥依從性，但長期服藥的不良反應較多，如惡心、嘔吐等，進而對患者生存質量產生影響，部分患者甚至產生焦慮、急躁及抑郁等消極情緒，進而加重病情，形成惡性循環[8]。因此，對于糖尿病患者，需及早診斷、治療，并注意臨床合理用藥，以有效控制患者病情。相較于其他疾病診斷，糖尿病診斷較為簡單，尿檢是常用方法，可通過尿液中葡萄糖含量，反映患者是否發生疾病，但當患者血液中葡萄糖含量較低，而腎器官將其全部吸收時，尿檢檢出效果欠佳。研究發現，通過測定不同時間段糖尿病患者的血糖、胰島素及C 肽水平等，可確定患者的疾病發展情況，以此為臨床制定治療方案提供指導。此外，對于糖尿病檢查還可對部分抗體進行檢測，如GADA、ICA 等，其中GADA 是1 型糖尿病患者的一種抗體，可破壞胰島素細胞，從而導致糖尿病；也有研究發現，GADA 屬于重要抗原之一，與胰島β 細胞的破壞程度呈現高度相關性。同時，GADA 陽性表達提示人體內胰島素分泌異常情況，通過檢測GADA 可對患者胰島功能進行判斷。實際上，臨床對于1 型糖尿病診斷，GADA 是最為敏感的一項指標。ICA 屬于混合型抗體的一種，該種抗體呈陽性表達，通常與糖尿病病程直接相關，相較于病程較短患者，病程較長患者的ICA 水平更低。化學發光免疫測定技術是近年來糖尿病常用的檢測方法，可通過測定患者血糖水平，包括空腹血糖、餐后2 h 血糖等，可判斷患者疾病是否發生及疾病嚴重程度，以指導臨床規范用藥。既往研究表明，與以往所采用的放射免疫分析法等檢測方式比較，化學發光免疫測定在糖尿病生化免疫檢驗中的應用價值更高。

該研究結果顯示，經化學發光免疫測定，166 例患者中檢出糖尿病156 例，檢測準確率為93.98%（156/166）；空腹血糖、餐后2 h 血糖比較，觀察組均高于對照組（t=30.605、29.448，P<0.05）；空腹狀態下、餐后2 hC肽、胰島素水平比較，觀察組均高于對照組（t=8.193、19.160、2.861、61.160，P<0.05）；餐后1 hC 肽、胰島素水平比較，觀察組均低于對照組（t=19.119、98.348，P<0.05）。袁珊等[9]選取300 例疑似糖尿病患者為研究對象，所有患者均行尿液葡萄糖檢測、生化免疫檢驗，其中生化免疫檢驗應用化學發光免疫測定，以糖尿病診斷標準作為金標準，對比不同檢測方法對糖尿病診斷的準確度、特異度及靈敏度，結果顯示，300 例患者中確診為糖尿病250 例，陰性50 例，應用化學發光免疫測定檢出230例陽性，其余70 例為陰性，準確率為93.3%，與該研究結果相近。化學發光免疫測定技術在臨床中最早應用于20 世紀70 年代，可對機體個別指標進行準確檢測，但由于當時技術水平有限，且所有儀器具有一定局限性，化學發光時間較短，使得檢測準確度、靈敏度等均不高，并存在不同程度問題，僅被用作示蹤信號，而限制了其應用范圍[10]。隨著醫療技術不斷發展，多種新型醫療儀器出現并應用，化學發光免疫測定技術逐漸受到臨床重視，并被應用于糖尿病生化免疫檢驗。對于化學發光免疫測定技術來說，既往研究發現其可分為兩個主要部分，即免疫反應、化學發光，其中化學發光指使用催化劑或氧化劑對化學發光物質進行催化或氧化，形成一個中間體，該種中間體呈激發態，一旦其回歸到穩定基態時，就可釋放出大量的等能級光子，進而出現發光情況[11-12]。臨床對于化學發光免疫測定技術的發光方法進行區分，可分為3 種不同類型：①LIA 法：對發光物進行免疫測定；②LEIA 法：對發光酶進行免疫測定；③LEIA 法：對發光輔助因子進行免疫測定。化學發光免疫測定技術的檢測機理在于，借助部分物質所具有輻射光這一特點，標記特定抗原、細胞等組織內物質，特別是對腫瘤細胞標記，該種方法可取得理想效果。應用這一方法的分析過程為，首先將發光酶、發光物質等標記于抗體或抗原上，抗原與抗體發生特異性結合后，再加入發光底物或氧化劑等，經過氧化后或與發光底物發生一系列反應后，可出現發光現象[13-15]。由于在一定條件下，化學檢測體系的化學發光強度與待測物濃度存在著直接關系，利用相應儀器檢測化學發光強度，可準確測定待測物含量[16]。將化學發光免疫測定技術應用于糖尿病生化免疫檢驗中，其優勢主要體現于以下方面：①操作簡單，用時較短，僅需10～20 min就可得出準確結果，以提高檢驗效率，可保障患者及時得到治療；②價格低廉，對于經濟壓力較大患者來說，若需花費高昂的檢測費用，可進一步加重患者經濟負擔，而應用化學發光免疫測定，可幫助患者節省經濟花銷；③與尿檢比較，化學發光免疫測定可取得較高診斷準確度，對于糖尿病患者早期診斷與治療作出充分保證[17-20]。

綜上所述，糖尿病生化免疫檢驗中化學發光免疫測定的應用效果顯著，可有效提高糖尿病檢出率，通過測定抗體、血糖及胰島素等水平，為臨床制定治療方案提供可靠指導。