DPD、TS基因多態性與晚期結直腸癌氟尿嘧啶敏感性關系的研究*

聶啟鴻 彭衛衛 王于理 張學兵 鐘麗婷 江西省贛州市人民醫院 341000

結直腸癌是一種在我國較為常見的惡性腫瘤，化療依舊是治療結直腸癌的主要手段之一。目前，雖然分子靶向和新藥聯合化療已經在結直腸癌的治療中較為普遍，仍無法取代氟尿嘧啶(5-FU)在結直腸癌基礎化療中的地位[1-2]。但在臨床中按個體體表面積給藥時，由于個體差異所產生的療效和不良反應也大為不同，一些不良反應甚至威脅患者生命。一些學者通過研究5-FU的耐藥機制發現，二氫嘧啶脫氫酶(DPD)和胸苷酸合成酶(TS)的表達與5-FU敏感性有著密切的聯系[3]。目前，DPD、TS基因多態性與晚期結直腸癌5-FU化療相關性的研究較少，本研究將尋找DPD、TS基因多態性與晚期結直腸癌5-FU化療敏感性之間的關系，為晚期結直腸癌患者的臨床個體化治療提供重要依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年6月—2020年9月住院治療的結直腸癌患者100例，經病理證實均為結直腸癌，其中男52例，年齡41～62歲、平均年齡(54.72±5.82)歲；女48例，年齡40～65歲、平均年齡(53.53±6.08)歲。存在嚴重心腦血管疾病、嚴重肝腎功能不全，年齡≥70歲者不予入組。患者生存時間必須≥3個月同時具有可測病灶方予入組。本研究經我院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 治療方案：所有患者化療前抽取5ml靜脈血，離心，保留血清，并接受全面檢查(心電圖、血常規、肝腎功能等)從而評估患者化療耐受性，隨后以FOLFOX6方案化療：第1天，靜脈滴注奧沙利鉑2h，100mg/m2；靜脈滴注亞葉酸鈣2h，200mg/m2；靜脈推注5-FU，400mg/m2，之后靜脈滴注46h，劑量改為3 000mg/m2，每2周重復。每個周期靜脈持續滴注5-FU后12h時抽取患者靜脈血2ml，用高效液相色譜對5-FU血藥濃度進行測定。

1.2.2 TS、DPD蛋白表達檢測：采用SP免疫組化法對所有患者病理標本中腫瘤組織ST、DPD蛋白表達進行檢測。判斷標準：以胞漿和胞核中出現棕黃色或棕褐色顆粒為陽性染色，選擇5個400×視野，各視野分別計數200個腫瘤細胞，計算其中陽性細胞所占百分比，最終計算平均值。其中陽性細胞百分率>10%為陽性，≤10%則為陰性。

1.3 評價標準 治療療效按RECIST實體瘤療效評價標準分為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩定(SD)以及進展(PD)，其中CR+PR為有效率(RR)[4]。治療后毒副反應則按美國國立癌癥研究所通用毒性標準(NCI-CTC)分為Ⅰ～Ⅳ度[5]。

1.4 統計學方法 采用SPSS21.0數理統計軟件對所得數據進行分析。計數資料以百分比(%)表示，組間計數資料比較用χ2檢驗，相關性比較采用Pearson相關性分析，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 療效 經過治療后，所有患者CR 3例，PR 48例，SD 35例，PD 14例。TS和DPD檢測為陰性患者RR均高于檢測為陽性的患者(61.02% VS 36.59%、62.90% VS 31.58%，P<0.05)，詳見表1。

表1 結直腸癌患者TS、DPD表達與療效關系

2.2 不良反應 經過治療后患者所出現的不良反應包括消化道反應(腹瀉、嘔吐、惡心以及口腔黏膜潰爛)、皮膚色素沉淀、脫發、血液學毒性(血小板和白細胞下降)。93例發生胃腸道反應的患者中，以Ⅰ度和Ⅱ度為主，共74例；剩余19例患者均為Ⅲ度以上。89例發生血液學毒性的患者同樣以Ⅰ度和Ⅱ度為主，共71例；剩余18例患者均為Ⅲ度以上。具體見表2。

表2 患者化療后主要毒副反應

2.3 TS、DPD與血液5-FU濃度相關性 相關性分析結果顯示，TS、DPD與血液5-FU濃度均呈負相關(r=-0.976，P=0.005；r=-0.941，P=0.017)。

3 討論

5-FU作為一種嘧啶類代謝拮抗藥物，40多年來一直應用于胃腸、胸、頸等部位惡性腫瘤的治療之中。對于晚期結直腸癌，其仍然是首選化療藥物。雖然按患者體表面積給藥，5-FU治療的緩解率能夠達到10%～15%，但仍有患者對以5-FU為主的化療并不敏感，進而導致化療失敗[6]。因此，對5-FU化療及耐藥機制進行闡述，尋找5-FU化療的敏感性指標對于巨大臨床意義。一些國內外學者認為，TS與DPD在體內的表達與5-FU化療敏感性有著密切的關系[7]。

DPD是一種嘧啶分解代謝的起始和限速酶，體內超過80%的5-FU是經過DPD代謝從而失去活性的，其能夠將體內5-FU還原成為二氫氟尿嘧啶(FUH2)，隨后其環狀結構被二氫嘧啶酶打開，產生5-氟-β-酰脲丙酸(FUPA)，最終在β-丙氨酸合成酶的作用下形成最終產物5-氟-β-丙氨酸(FBAL)，并由腎臟排出體外。若機體DPD活性降低將導致5-FU半衰期延長，從而使患者化療毒性風險升高，因此，個體DPD活性高低是5-FU毒性嚴重程度的關鍵。Bai等對比了結直腸癌患者和正常組織中DPD的mRNA水平情況，發現結直腸癌患者水平要明顯高于正常者，同時，相關分析顯示化療效果與DPD表達呈負相關，這提示化療效果不佳與DPD的高表達相關[8-9]。TS是一種由兩個相同亞單位所組成的二聚體蛋白質，其基因位于第18號染色體上。TS在正常機體內活性較低，而在腫瘤患者體內，其活性則顯著增強。5-氟尿嘧啶脫氧核苷(5-FdUMP)是5-FU的活性代謝產物，TS能夠與5-FdUMP形成穩定的三元復合物，因此在機體TS過度表達時，5-FU的療效將顯著降低，由此可將TS作為結直腸癌患者進行化療藥物選擇時的一項參考指標，并對預后情況進行判斷[10]。有研究顯示，使用氟尿嘧啶類化療藥物的TS高表達胃癌患者反應率要明顯低于TS低表達患者。本文結果顯示，TS、DPD表達與血液5-FU濃度均呈負相關，即TS與DPD在體內的高劑量表達將影響5-FU的療效，這與相關研究結果相一致。

綜上所述，結直腸癌患者TS、DPD蛋白表達與5-FU存在一定的相關性，在臨床上具有一定的應用價值。