新疆阿勒泰地區O、A型口蹄疫血清抗體監測

呂雙燕，羅鵬飛，舒 展

（新疆阿勒泰地區動物疾病控制與診斷中心，新疆阿勒泰836500）

口蹄疫（FMD）是一種高度傳染性的疾病，會給養殖業造成嚴重的經濟損失。口蹄疫是由口蹄疫病毒（foot-and-mouth disease virus，FMDV）感染偶蹄動物（馴養和野生的反芻動物和豬）引起的一種烈性傳染病[1-3]，導致急性發熱性疾病，并在唇、舌、蹄、乳房等無毛部位出現水皰、潰瘍、爛斑等病癥[4-5]。口蹄疫病毒共有7個血清型：A、O、C、SAT 1～3及Asia 1。A型和O型主要在亞洲、中東和非洲流行，C型主要在亞洲、非洲及南美洲等地區流行，SAT 1～3型主要出現在非洲，Asia 1型多流行于亞洲[6]。我國以O型為主，A型和Asia 1型較少[7]。口蹄疫盡管死亡率很低，但發病率高達100%，感染畜群的生產性能也大大降低[8-9]。因此，OIE將其確定為必須報告的動物傳染病，我國將其列為一類動物疫病及進境動物一類傳染病之首[10]。雖然疫苗可能引起亞臨床感染和攜帶者狀態的發生，但是合適的疫苗可以預防臨床疾病，并減少經濟損失[11-12]。在非洲、中東和亞洲的部分地區，通過定期大規模疫苗接種試圖控制口蹄疫。

本研究采用液相阻斷ELISA方法對新疆阿勒泰地區7個區域動物（牛、羊、豬）進行O、A型口蹄疫抗體合格率情況調查，以評估現在使用免疫方案的合理性，為防疫該病制定出較為合理的防控建議提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

2021年1月至5月對阿勒泰地區7個區域（A～G區）采集血樣1 586份，其中，牛、羊血樣各540份，豬血樣506份，分離血清，同時記錄動物基本信息。-20℃冷凍保存，待檢。

1.2 試劑及儀器

ELISA抗體檢測試劑盒由中國農科院蘭州獸醫研究所生產（生產批號：A型20210107103-3、O型20210107101-5）。

移液器、臺式低速離心機（AXTD5A）、MK3酶標儀（Thermo Fisher）。

1.3 結果判定

牛、羊抗體效價≥128，豬抗體效價≥64，判為合格。血清合格個體即為口蹄疫抗體合格個體。

免疫合格個體數量占群體總數的70%以上為免疫合格群體。

群體免疫合格率=群體合格數/群體樣本數×100%（1）

2 結果與分析

2.1 O型口蹄疫抗體檢測結果（見表1、表2）

由表1可知，合格血樣1 372份，O型口蹄疫免疫合格率為86.51%；其中，牛O型口蹄疫免疫合格率為90.19%，羊O型口蹄疫免疫合格率為85.37%，豬O型口蹄疫免疫合格率為83.79%。

表1 阿勒泰地區O型口蹄疫抗體檢測結果Tab.1 Results of O-type foot-and-mouth disease antibodies in Altay area

由表2可知，牛、羊、豬的個體免疫合格率均高于70%。雖然達到我國規定的口蹄疫免疫抗體的群體免疫合格率70%以上，但G區域合格率均較低，必要時仍需加強免疫一次。

表2 阿勒泰各區域O型口蹄疫抗體檢測結果Tab.2 Test results of O-type foot-and-mouth disease antibodies in various regions of Altay

2.2 A型口蹄疫抗體檢測結果（見表3、表4）

表3 阿勒泰地區A型口蹄疫抗體檢測結果Tab.3 Rresults of A-type foot-and-mouth disease antibodies in Altay area

由表3可知，合格血樣1 366份，A型口蹄疫免疫合格率為86.13%。其中，牛A型口蹄疫免疫合格率為88.70%，羊A型口蹄疫免疫合格率為84.44%，豬A型口蹄疫免疫合格率為85.18%。

由表4可知，各區域的O型口蹄疫抗體檢測結果中，牛、羊、豬的個體免疫合格率均高于70%，達到我國規定的口蹄疫免疫抗體的群體免疫合格率70%以上。僅有G區域羊免疫合格率低于80%，其余區域均高于80%。

表4 阿勒泰地區各區域A型口蹄疫抗體檢測結果Tab.4 Test results of A-type foot-and-mouth disease antibodies in various regions of Altay

3 討論

我國規定的口蹄疫免疫抗體的群體免疫合格率70%以上。試驗自2021年1月至5月對阿勒泰地區采集血樣1 586份，并對其O型口蹄疫、A型口蹄疫進行檢測。O、A型口蹄疫檢測結果顯示，O型免疫合格率為86.51%，A型免疫合格率為86.13%。其中，牛、羊、豬的O、A型口蹄疫免疫合格率為80.00%以上；各地區牛、羊、豬的個體免疫合格率均高于70%，但對于G區域，O、A型口蹄疫合格率均較低，必要時仍需加強免疫一次。此次調研結果顯示，當地對該病的免疫工作扎實有效，免疫密度和質量效果相對較好，但部分區域仍需要加強。

口蹄疫在我國列為一類動物疫病及進境動物一類傳染病之首。除采取強制免疫、強化消毒滅源及采取改善飼養管理條件等措施外，應及時進行動物O、A型口蹄疫的免疫抗體監測是目前控制和減少我國O、A型口蹄疫流行的重要手段[13-14]。感染性病毒顆粒的沉降系數為146S。在某些條件下，146S粒子可能會發生不可逆的解離，變成缺乏VP4的穩定五聚體（12S）。雖然146S和12S顆粒均包含相同的蛋白質，但是當146S顆粒轉化為12S顆粒時，產生中和抗體所需的構型會丟失[15]。

影響疫苗免疫因素有很多，主要存在以下幾方面的原因。

（1）疫苗的運輸管理不到位。

如今的口蹄疫疫苗多采用滅活疫苗，抗原穩定性差給口蹄疫疫苗的生產、儲存和應用帶來很多困難，使用過程中必須全程冷鏈運輸以保護滅活口蹄疫疫苗的免疫原性[16]。一旦疫苗產品中滅活FMDV發生裂解沒被及時發現，注射后將無法起到保護效果，導致免疫的失敗。如果工作人員不按照規定程序使用疫苗，如該冷藏的進行冷凍或常溫放置時間太久、使用過期疫苗、注射部位偏差或走針、器械消毒不嚴等均有可能引發疫苗免疫失敗。

（2）受母源性抗體的干擾、隱性帶毒和排毒、免疫期使用免疫抑制的抗生素藥物等。

許多規模化和中小規模豬場將口蹄疫疫苗首免時間提前到20日齡，有些甚至提前至2周齡，并在2月齡進行二次免疫。但是，正在哺乳階段的母豬在吃初乳的時候會產生先天性免疫，能夠說吃到初乳的小豬的口蹄疫抗體水平較高。若在20～23日齡前首免，母源抗體水平還相當高，此時免疫，母源抗體和疫苗發生中和反應，可能導致免疫失敗[17]。

（3）免疫程序不合理。

很多養殖場未建立合理的免疫程序，導致口蹄疫等重大動物疫病免疫的時候未進行免疫，造成疫病的發生和流行。很多地方未結合當地的流行病學情況和地理環境位置，而盲目套用網上公布的免疫程序，造成免疫的程序和方式混亂，免疫的時間間隔和免疫劑量差別大。

（4）疫苗的選擇。

市面上疫苗廠家因批次不同、生產時某些因素不穩定，使得疫苗效果參差不齊、抗體水平高低不等，難以有效預防亞臨床感染，從而造成動物隱形帶毒。

建議每年春秋兩季進行集中基礎免疫，而后對新出生或補欄的動物要及時進行免疫，從而提高疫苗免疫效果和動物體的抗病能力。規范疫苗的保存及管理，定期抽查養殖場的疫苗保存方式。對于不合理存放及過期產品應及時清理。應該規范免疫人員操作水平，防止操作不當導致的免疫失敗。對于初生動物，初免時間可適當延后，有效避免母源抗體的干擾。

4 結論

阿勒泰地區牛、羊、豬的個體免疫合格率均符合我國規定的口蹄疫免疫抗體的群體免疫合格率70%標準，但部分地區仍需加強防控。