官丁明 永安市動物疫病預防控制中心 福建永安 366000
雞傳染性支氣管炎是由雞傳染性支氣管炎病毒引起的一種急性、高度接觸性傳染病,主要侵害雞的呼吸道、消化道和生殖系統(tǒng),任何年齡、品種的雞均易感,給養(yǎng)雞業(yè)造成較大經濟損失。目前,疫苗免疫是防治該病的最有效方法,但由于該病為單鏈RNA病毒,極易發(fā)生突變,導致自然界不斷出現(xiàn)新的血清型和基因型,同時不同毒株間缺乏有效的交叉保護,給該病的有效防控帶來了極大的壓力?,F(xiàn)將一起雞傳染性支氣管炎的綜合防治報道如下。
某養(yǎng)殖場于2021年2月中旬引進雛雞1 800羽,飼養(yǎng)到26日齡時陸續(xù)出現(xiàn)伸頸張口呼吸、甩頭、咳嗽、打噴嚏和死亡。畜主隨即對患雞進行隔離,并使用泰樂菌素對全場雞群進行預防,病情沒有得到有效控制,雞只死亡數進一步增加。
雞群整體表現(xiàn)為咳嗽、打噴嚏,眼角流淚,鼻流黏性液體,羽毛松亂、雙翅下垂、食欲及精神不佳,患雞由于體溫升高而出現(xiàn)畏寒怕冷,表現(xiàn)聚集性取暖。病重雞呼吸困難、張口呼吸、食欲廢絕。
剖檢病死雞見支氣管中有大量黃色分泌物,氣管及支氣管黏膜增厚、充血,并且附著黏性滲出物。
4.1 引物的設計合成 根據S1基因片段的保守性,在其內部設計引物,P上游:5'-GCGGAATTCGCTAATTTGTATGATAATG-3',p下游:5'-ATCCTCGAGATAACTAACATAAGGGCA-3',預期擴展片段長度為1 600 bp。
4.2 病料采集 無菌采集患雞的氣管及喉頭部位病料,剪碎后研磨,加入5倍無菌生理鹽水混勻后,-20℃反復凍融3次,4℃6 000 r/min離心10 min,取上清液,加入雙抗。
4.3 雞傳染性支氣管炎總RNA提取及S1基因的RT-PCR擴增 取上清液按照RNA提取試劑盒的要求進行RNA提取。取提取的RNA 11μL,引物P下游1μL,70℃水浴10 min,冰浴5 min后,加入5×buffer 4μL,dNTP 2μL,AMV逆轉 錄酶2μL,ddH2O補至25μL,42℃水浴60 min,得到cDNA。取模版cDNA 3μL,Taq酶0.5μL,上下游引物各1μL,10×PCR buffer 5μL,Mg2+2μL,ddH2O補 至25μL。反應程序:94℃預變性5 min;94℃變性45 s,50℃退火45 s,共進行35個循環(huán);最后72℃延伸10 min。反應結束后,取5μL PCR產物,加入上樣緩沖液,在混有GoldView的瓊脂糖凝膠上電泳,紫外燈下觀察結果。結果顯示,待測樣品可擴增得到一條1 600 bp的特異性條帶(見圖1),表明測試樣品為陽性。

4.4 診斷 根據臨床癥狀、剖檢病變及實驗室檢查結果可診斷該病為雞傳染性支氣管炎。
5.1 隔離接種 將患雞與健康雞隔離,健康雞群更換場地并緊急接種新支120二聯(lián)活疫苗,對病死雞全部集中深埋處理。
5.2 加強飼養(yǎng)管理 嚴格的飼養(yǎng)管理能有效預防該病的發(fā)生??刂骑曫B(yǎng)密度,保持雞舍通風干燥,雞舍及其周邊打掃干凈后,用過氧乙酸每天消毒2次。由于時值春季,當地氣溫早晚溫差較大,濕度高,為減少應激,在飲水中適當添加多維以提高機體抵抗力。
5.3 治療 目前對該病尚無十分有效的治療措施,對于輕癥的雞只使用麻杏石甘散、金銀花抗病毒治療,有一定效果。
隨著雞養(yǎng)殖規(guī)模的擴大,應該結合自場的實際情況和本地區(qū)疫病流行特點制定相關的免疫和飼養(yǎng)管理措施,從根本上做好雞傳染性支氣管炎等呼吸道疾病的防治工作。科學、合理、適時地開展免疫,嚴格飼養(yǎng)管理,適時調整養(yǎng)殖密度,保證雞舍通風干燥,減少應激,提供富含電解多維的飼料等是有效防控傳染性支氣管炎等的有效手段。