尤溪縣不同地區(qū)藤茶黃酮含量及其質(zhì)量評(píng)價(jià)

陳衛(wèi)琳，張 寬，丁春花，楊彩媚，梁一池，胡 娟

（福建中醫(yī)藥大學(xué)，福建 福州 350108）

藤茶是葡萄科蛇葡萄屬中的顯齒蛇葡萄（AmpeLopsis grossedentata）（Hand-Mazz）W.T.Wang的嫩莖葉[1]，主要分布在湖南、湖北、廣東、廣西、江西、福建、云南、貴州等省區(qū)[2]。尤溪縣地處戴云山脈北段西部，地貌以中低山地為主。境內(nèi)東西山嶺聳峙，丘陵起伏，千米山峰林立，山間盆地錯(cuò)綜；中部尤溪河谷斜貫?zāi)媳薄８鞯睾０尾町愝^大，最高峰大模山海拔1472米，最低處尤溪口碼頭閩江江面海拔僅31米。尤溪縣地貌差異較大，主要有有四大類型：山地、丘陵、山間盆地、河谷平原。本文采用紫外分光光度法（UV），以二氫楊梅素為指標(biāo)性成分，對(duì)藤茶中總黃酮進(jìn)行含量測(cè)定。

1 儀器與材料

14批藤茶樣品采自福建省尤溪縣不同地區(qū)，將鮮品莖、葉分離，通風(fēng)處晾干后置鼓風(fēng)干燥箱中40 ℃干燥，粉碎備用；二氫楊梅素對(duì)照品（成都曼思特生物科技有限公司，純度均≥98%，批號(hào)：27200-12-0）。

TV-1800紫外分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。

金葉RE-52型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；DHG-9240型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；FA2104N型萬分之一電子分析天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；YP202N型百分之一電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 供試品及對(duì)照品溶液的制備

2.1.1 供試品溶液 稱取第1～7批干燥藤茶莖粉末各10 g、葉粉末各5 g，置于圓底燒瓶中，80%乙醇[1]加熱回流提取3次，每次60 min，料液比1∶30，合并提取液，離心，取上清液，分別旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至一定體積，莖濃縮液用80%乙醇定容于50 mL容量瓶中，葉濃縮液用80%乙醇定容于100 mL容量瓶中。藤茶莖、葉濃縮液分別用石油醚（1∶1）萃取4次，揮干石油醚，莖濃縮液用80%乙醇稀釋定容至50 mL量瓶，搖勻備用；葉濃縮液用80%乙醇稀釋定容至100 mL量瓶，搖勻備用。

稱取第8～14批干燥藤茶莖、葉各2 g，置于圓底燒瓶，80%乙醇加熱回流提取3次，每次60 min，料液比1∶30，合并提取液，離心，取上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至一定體積，莖、葉濃縮液用80%乙醇稀釋定容至100 mL量瓶，搖勻備用。

2.1.2 對(duì)照品溶液 精密稱取二氫楊梅素對(duì)照品0.0050 g，置25 mL量瓶中，加適量80%乙醇溶解，定容至刻度，搖勻，配制成0.2 mg/mL的溶液，作為對(duì)照品貯備液。

2.2 結(jié)果

2.2.1 最大吸收波長的確定 取對(duì)照品貯備液，于室溫放置，精密吸取對(duì)照品貯備液1 mL于25 mL容量瓶中，加80%乙醇稀釋定容至刻度，搖勻。取供試品溶液1 mL于500 mL容量瓶中，加80%乙醇稀釋定容至刻度，搖勻。隨行空白，取稀釋后對(duì)照品和樣品溶液于UV 1800分光光度計(jì)上掃描，結(jié)果供試品和對(duì)照品的吸收?qǐng)D譜一致，在292 nm處有最大吸收，故選擇292 nm為測(cè)定波長。見圖1～2。

2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密吸取0.1 mg/mL二氫楊梅素對(duì)照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4 mL，分別置于10 mL容量瓶中，80%乙醇定容至刻度。于292 nm測(cè)其吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為：y=0.0602x+0.0063，r=0.9998。

2.2.3 樣品總黃酮含量測(cè)定 精密吸取第1～7批莖、葉供試品溶液各1.0 mL，置于50 mL量瓶中，80%乙醇稀釋定容至刻度，搖勻，再吸取5 mL置于50 mL量瓶中，80%乙醇稀釋定容至刻度，搖勻，再吸取5 mL置于10 mL量瓶中；精密吸取第8～14批莖供試品溶液各5 mL，置于50 mL容量瓶中，80%乙醇稀釋定容至刻度，搖勻，再吸取1 mL置于10 mL容量瓶中，80%乙醇定容至刻度；精密吸取第8～14批葉每個(gè)編號(hào)供試品溶液各1 mL，置于50 mL容量瓶中，80%乙醇稀釋定容至刻度，搖勻，再吸取1 mL置于25 mL容量瓶中，80%乙醇定容至刻度；于292 nm處測(cè)定吸收值（A）。根據(jù)回歸方程計(jì)算樣品總黃酮含量，結(jié)果見表1。

圖1 藤茶莖與二氫楊梅素對(duì)照品紫外吸收光譜

圖2 藤茶葉與二氫楊梅素對(duì)照品紫外吸收光譜

表1 14 個(gè)不同產(chǎn)地藤茶樣品中總黃酮含量（%）

3 討論

藤茶是葡萄科蛇葡萄屬中的顯齒蛇葡萄（AmpeLopsis grossedentata）（Hand-Mazz）W.T.Wang的嫩莖葉，味甘淡，性涼，其功效為清熱解毒，祛風(fēng)濕、強(qiáng)筋骨。藥理實(shí)驗(yàn)表明，藤茶總黃酮具有消炎、抑菌、止咳、鎮(zhèn)痛、護(hù)肝、消脂等功效[3]。其主要活性成分為二氫楊梅素，具有降血脂、消炎和清熱解毒功能。除了將藤茶作為茶用以外，目前已提取藤茶黃酮生產(chǎn)藥品和飲料等[4]。由測(cè)定結(jié)果可知，藤茶葉中總黃酮含量高于藤茶莖中總黃酮含量，采用紫外分光光度法測(cè)定第1～7批藤茶，1號(hào)、5號(hào)葉的總黃酮含量比較高，第8～14批藤茶，10號(hào)葉、莖中總黃酮含量均為最高。

[1]王 巖,王 嬰,周莉玲,等.正交試驗(yàn)法優(yōu)選藤茶的提取工藝[J].中國中藥雜志,2002,27(4):302-303.

[2]何桂霞,裴 剛,周天達(dá),等.顯齒蛇葡萄中總黃酮和二氫楊梅素的含量測(cè)定[J].中國中藥雜志,2000,25(7):423-425.

[3]張友勝,楊偉麗,熊浩平.類茶植物顯齒蛇葡萄的研究利用現(xiàn)狀[J].茶葉通訊,2001(1):19-23.

[4]陳玉瓊,李安琪,孟 燕.藤茶黃酮及二氫楊梅素提取條件的優(yōu)化[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2009,28(1):102-110.