孟慶國(guó) 趙英同
(1遼寧省微生物科學(xué)研究院,遼寧朝陽(yáng)122000;2美利堅(jiān)海睿德學(xué)校,佛羅里達(dá)州33325)
四孢蘑菇Agaricuscampestris,俗稱(chēng)雷窩子,是樹(shù)林中生長(zhǎng)的野生食用菌,口蘑屬中的一個(gè)種,春、秋季生長(zhǎng)在草地、林間空地處。四孢蘑菇子實(shí)體中等至稍大,菌蓋寬3~13 cm,初扁半球形,后平展,白色至乳白色,后期具叢毛狀鱗片;菌肉白色,肉厚;菌褶初粉紅色,后變褐色至黑褐色,較密,離生,不等長(zhǎng);菌柄較短、粗、圓柱形,有時(shí)稍彎曲,長(zhǎng)1~9 cm,粗0.5~2 cm,近光滑或略有纖毛,白色,中實(shí)。四孢蘑菇味道鮮美,營(yíng)養(yǎng)豐富,肉質(zhì)滑嫩,深受消費(fèi)者喜愛(ài)。為了充分利用楊樹(shù)葉,筆者對(duì)采集的四孢蘑菇進(jìn)行菌種分離和栽培試驗(yàn)。現(xiàn)總結(jié)介紹如下。
在采集的四孢蘑菇中,選擇長(zhǎng)勢(shì)好、菇形完整、中等至偏大,肉厚,孢子未彈射,無(wú)病蟲(chóng)害的子實(shí)體(圖1),在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行組織分離。組織分離培養(yǎng)基為PDA。菇面用75%酒精棉球擦拭消毒,用手術(shù)刀切開(kāi)種菇(圖2),在菌柄內(nèi)側(cè)用接種鉤取1 cm3菌肉接于試管斜面培養(yǎng)基上(圖3)。將試管放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)2 d組織塊可萌發(fā)出白色菌絲,繼續(xù)培養(yǎng)2 d,挑取生長(zhǎng)健壯菌絲尖端轉(zhuǎn)接空白試管,菌絲長(zhǎng)滿斜面后備用。

圖1 種菇

圖2 切開(kāi)的種菇

圖3 菌肉接于試管斜面
母種配方為:馬鈴薯200 g,葡萄糖20 g,蛋白胨3 g,瓊脂18~20 g,磷酸二氫鉀3 g,硫酸鎂1.5 g,pH6.5~7.0,水1 000 mL。常規(guī)方法制備培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)接母種,于保溫箱中25℃避光培養(yǎng)8~10 d備用。
原種配方為:玉米芯78%,麩皮20%,糖1%,石膏1%,pH6.5~7.0,料含水量60%~65%。
原種容器為常用750 mL菌種瓶。菌種瓶洗凈控干后,裝培養(yǎng)料至瓶肩,擦干凈瓶外壁及瓶口內(nèi)壁,蓋上帶有透氣孔的蓋,高壓滅菌(126℃)1 h,冷卻后在無(wú)菌條件下,按常規(guī)方法接入母種。接種后于清潔培養(yǎng)室25℃,空氣相對(duì)濕度40%~50%培養(yǎng),每天通風(fēng)換氣2~3次,每次30 min。一般培養(yǎng)30~40 d菌絲長(zhǎng)滿瓶(圖4)。

圖4 培養(yǎng)好的原種
培養(yǎng)料配方為:楊樹(shù)葉83%,麩皮15%,糖1%,石膏1%,pH6.5~7,料含水量60%~65%。
楊樹(shù)葉、麩皮混勻,石膏、糖加入水中,再將其混合充分拌勻,料含水量為65%,pH9~10。料堆寬1.5~2.0 m、高0.8~1.0 m、長(zhǎng)不限。當(dāng)料溫升至65℃維持12 h后翻堆,如此翻堆2次,一般5~7 d發(fā)酵結(jié)束(圖5)。

圖5 堆料
選17 cm×33 cm×0.005 cm聚丙烯塑料袋,將發(fā)酵好的楊樹(shù)葉裝袋,袋口套雙套環(huán)。高壓滅菌(126℃)1 h。試驗(yàn)每袋裝料折干為0.3 kg,共裝100袋。
在無(wú)菌條件下,按常規(guī)方法接入原種,每瓶原種接20袋。接種后放入培養(yǎng)室,于25℃條件下暗光培養(yǎng)。楊樹(shù)葉培養(yǎng)基透氣性好,菌絲長(zhǎng)速快,培養(yǎng)25~30 d菌絲即可長(zhǎng)滿袋(圖6)。當(dāng)楊樹(shù)葉基質(zhì)內(nèi)布滿菌絲(圖7),就可以結(jié)束菌絲培養(yǎng)。

圖6 培養(yǎng)好的菌袋

圖7 基質(zhì)內(nèi)布滿菌絲
將脫袋后菌棒放入筐內(nèi)壓實(shí)(圖8)(為了增加透氣性,筐底部放兩層報(bào)紙或遮陽(yáng)網(wǎng)),將調(diào)好水的土均勻地撒在料面上,厚度3 cm(腐殖質(zhì)土,加入2%石灰,噴水調(diào)土含水量為20%,即手握成團(tuán)、落地即散)。為了保持料面濕潤(rùn),土層表面覆蓋一層楊樹(shù)葉(圖9)保濕。

圖8 裝入筐內(nèi)

圖9 覆蓋楊樹(shù)葉
覆土后保持室溫20~22℃,空氣相對(duì)濕度在60%~70%,保持室內(nèi)空氣新鮮,在此條件下,菌絲5~7 d可爬上土面(圖10)。

圖10 覆土面菌絲
菌絲爬土后即可催蕾,此時(shí)拉大早晚溫差7~8℃,保持溫度15~25℃,空氣相對(duì)濕度80%~90%,一般菌絲爬土后5~7 d可見(jiàn)菌絲扭結(jié)變粗(圖11),約7~10 d菌絲扭結(jié)現(xiàn)蕾(圖12)。

圖11 菌絲變粗

圖12 幼蕾
幼蕾形成后,調(diào)控溫度在18~22℃,空氣相對(duì)濕度85%~90%,保持空氣新鮮,有散射光。幼蕾期千萬(wàn)不可強(qiáng)通風(fēng),溫差不可過(guò)大,以免導(dǎo)致幼蕾萎縮死亡。
較之幼蕾期,該階段控制溫度15~22℃,空氣相對(duì)濕度85%~90%,適當(dāng)加強(qiáng)通風(fēng),有散射光,但不能有強(qiáng)光照,否則菇體表面的鱗片明顯增多,影響商品外觀。生長(zhǎng)3 d幼菇見(jiàn)圖13。

圖13 逐漸長(zhǎng)大幼菇
成菇期要適當(dāng)降低室溫,這樣可以延遲菇體開(kāi)傘,使菇肉厚實(shí)。溫度可保持在15~18℃,空氣相對(duì)濕度85%~99%,有散射光。溫度過(guò)高,子實(shí)體容易早熟、開(kāi)傘,光照過(guò)強(qiáng),蓋表層產(chǎn)生龜裂成“花菇”,影響商品質(zhì)量。
當(dāng)菇體結(jié)實(shí)、菌蓋緊包菌柄,菌膜未破裂時(shí)采收(圖14-圖16)。采收晚,菌蓋呈傘狀(圖17),菌褶變黑(圖18),嚴(yán)重時(shí)菌褶變黑成墨汁狀(圖19)。采收前不噴水,以免影響菇保鮮期。采收時(shí)手持菌柄下部,輕輕旋轉(zhuǎn)拔起,并清除病菇、菇根。采菇后,及時(shí)補(bǔ)土,停水2~3 d,適度通風(fēng),待菌絲恢復(fù)生長(zhǎng)時(shí)再?lài)娝呃匍_(kāi)始下潮菇管理,第2潮菇出菇管理參照第1潮菇。

圖14 采收子實(shí)體

圖15 菌膜未破裂

圖16 菌膜破裂

圖17 菌蓋呈傘狀

圖18 菌褶變黑

圖19 菌褶成墨汁狀
試驗(yàn)共采收2潮菇,鮮菇總產(chǎn)量9 kg,總投料量為30 kg,生物學(xué)效率為30%。試驗(yàn)結(jié)果表明,采用楊樹(shù)葉為主要原料覆土栽培四孢蘑菇能出菇。筆者在覆土出菇的同時(shí),選取發(fā)滿菌絲的栽培種,開(kāi)袋口并拉直,覆蓋塑料薄膜,結(jié)果沒(méi)有出菇,可見(jiàn)覆土是該菌株出菇的必要條件。