玉木耳液體菌種培養條件試驗

郭月仙 馬立驗 駱伏海 蘇貴平

（1寧德市益智源農業開發有限公司，福建寧德355300；2寧德市食用菌技術推廣站，福建寧德352100）

玉木耳（Auricularia cornea）為李玉院士團隊由白色毛木耳變種經多孢自交選育出的菌株[1]。玉木耳味道鮮美，且富含蛋白質、膳食纖維、多糖、不飽和脂肪酸，具有抗腫瘤、抗氧化等功效[2]，深受消費者青睞。玉木耳在我國臺灣地區、福建省、江西省等均有少量栽培，應用菌種主要是固體菌種。隨著食用菌產業向設施化、標準化轉型升級，液體菌種應用越來越多，也日益成熟[3]。劉孝利等[4]研究了玉木耳液體菌種培養基配方。試驗根據玉木耳的生物學特性，進行液體菌種的培養基配方、培養溫度、初始pH比較，以期篩選出玉木耳液體菌種較佳的培養條件。

1 材料與方法

1.1 玉米耳菌株

玉木耳1號菌株，由福建省南平農科所提供。

1.2 試驗設計及方法

1.2.1 培養基配方比較試驗

試驗液體培養基配方：①馬鈴薯100 g，紅糖15 g，葡萄糖10 g，麩皮30 g，蛋白胨1.5 g，磷酸二氫鉀0.75 g，硫酸鎂1 g，維生素B11片，加水1 000 mL；②玉米粉40 g，麩皮20 g，葡萄糖30 g，黃豆粉5 g，磷酸二氫鉀2.5 g，硫酸鎂1 g，維生素B11片，水1 000 mL；③葡萄糖20 g，玉米粉5 g，豆粉5 g，磷酸二氫鉀0.5 g，硫酸鎂0.5 g，酵母粉1 g，消泡劑0.2 g，加水1 000 mL。

配制培養基時微溶性的麩皮、玉米粉、黃豆粉均研磨成粉末狀，馬鈴薯用清水煮30 min后過濾殘渣，并將馬鈴薯水煮液用清水調至1 000 mL，再加入其他原料攪拌均勻即可。用1 000 mL三角瓶分裝培養液，每瓶裝液量為500 mL，用棉塞封口，并用牛皮紙包緊瓶口后，于121℃滅菌35 min。冷卻到常溫后，在凈化室接種，每瓶接8塊0.5 cm2的PDA斜面菌種塊。接種后于25℃靜置24 h，隨后在轉速170 r/min、22℃的恒溫搖床上培養6 d。測菌絲鮮重，記錄菌球形態。每配方重復3次。

1.2.2 液體菌種培養溫度試驗

培養基用配方③。培養溫度設20℃、22℃、24℃。培養基配制、培養方法同1.2.1。每個溫度處理重復3次。

1.2.3 液體培養基初始pH試驗

培養基用配方③。初始pH設為pH5.5、6.5、7.5。其他同1.2.1。每個pH處理重復3次。

1.2.4 培養瓶接種量試驗

試驗采用配方③。設每個三角瓶接種量為1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5 mL。其他同1.2.1。每個接種量處理重復3次。

2 結果與分析

2.1 液體培養基配方的試驗結果

菌絲鮮重是評價液體菌種質量優劣的重要指標。由表1可知，玉木耳菌絲鮮重由高到低的順序是配方③＞配方①＞配方②，配方③的玉米耳菌絲平均鮮重為265.7 g/L，為三個配方中最高，與配方①差異不明顯，與配方②差異顯著。菌球均一性最好的是配方③，配方①和配方②相近。供試配方培養的菌球顏色均為淡黃色，但配方①與配方②的菌液顏色較深，而配方③不管在接種前還是接種后培養液透明度都較好，有利于觀察菌球生長情況（圖1，圖2）。試驗結果表明配方③為供試較佳配方，選擇其進行后續試驗。

表1 不同液體培養基配方的玉木耳菌絲生長情況

圖1 接種前供試液體培養基狀態

圖2 供試配方培養菌種6 d后菌液狀態

2.2 液體菌種培養溫度試驗結果

由表2可知，培養溫度為22℃時，玉米耳菌絲鮮重最高，為263.7 g/L，與培養溫度24℃的菌絲鮮重（262.3 g/L）差異不明顯，與培養溫度20℃的菌絲鮮重差異顯著。因此，22℃為培養玉米耳液體菌種適宜的溫度。

表2 不同溫度培養玉木耳液體菌種菌絲生長情況

2.3 液體培養基初始p H試驗結果

由表3可知，當培養基初始pH為6.5時，菌絲鮮重最高為251.7 g/L，與初始pH5.5、pH7.5時的菌絲鮮重差異達極顯著水平，且菌球均一性及顏色的差異較明顯。因此，玉木耳液體培養基最適合初始pH為6.5。

圖3 不同溫度培養菌種6 d菌液狀態

圖4 不同初始p H液體培養基培養菌種6 d后菌液狀態

2.4 培養瓶不同接種量試驗結果

圖5 不同接種量培養液體菌種6 d菌液狀態

由表4可知，培養瓶接種量1 mL/瓶的菌絲鮮重與接種量2 mL/瓶差異不明顯，與接種量3 mL/瓶、4 mL/瓶、5 mL/瓶的菌絲鮮重均差異極顯著。但不同接種量菌液顏色、菌球均一性無明顯差異。因此，在培養玉木耳液體菌種時，若有條件應適當增加接種量來提高液體菌種的菌絲量，從而增加接種后萌發點。

表4 培養瓶不同接種量試驗結果

3 小結

試驗篩選出適宜玉木耳液體菌種培養基：葡萄糖20 g，玉米粉5 g，豆粉5 g，磷酸二氫鉀0.5 g，硫酸鎂0.5 g，酵母粉1 g，消泡劑0.2 g，水1 000 mL。培養條件為：適宜培養溫度為22℃，培養液初始pH為6.5，條件允許接種量提高至3 mL以上。近兩年來示范推廣該培養條件培養的液體菌種栽培玉木耳3×105袋，不僅提高了生產效率，且玉木耳產量穩定、質量良好。