尿液中紅細胞免疫球的檢測及其臨床意義

盧 佩， 丁振若， 鄭善鑾， 劉海波

（1. 空軍軍醫大學西京醫院檢驗科，陜西 西安 710032；2. 陜西省中醫醫院檢驗科，陜西 西安 710003）

通過多年對尿液中紅細胞形態的觀察，我們發現在不同泌尿系疾病中紅細胞形態會有所不同，并對臨床診斷有一定提示價值。本研究主要介紹在尿沉渣中發現的一種由小紅細胞緊密聚集成團的特殊細胞，我們將其命名為紅細胞免疫球；并探討檢出紅細胞免疫球對腎小球腎炎等泌尿系疾病進行鑒別診斷與定位診斷的臨床價值。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2017年1月—2018年11月空軍軍醫大學西京醫院腎內科、泌尿外科住院患者260例（實驗組），其中男135例、女125例，年齡（37±2）歲。260例患者中，腎盂腎炎患者50例，經X線腎盂造影顯示異常改變；腎小球腎炎患者140例，其中IgA腎病患者32例、紫癜性腎小球腎炎患者40例、隱匿型腎小球腎炎患者38例，且均通過腎活檢確診，另有慢性腎小球腎炎患者30例；尿路感染患者60例，其中膀胱炎患者22例、尿道炎患者38例均有尿急、尿頻、尿痛等尿路刺激癥狀，膀胱鏡、尿道鏡和細菌培養異常；膀胱腫瘤患者10例，經膀胱鏡、電子計算機斷層掃描、磁共振成像檢查確診。以同期100名體檢健康者作為對照組，其中男52名、女48名，年齡（39±2）歲，對照者X線腎盂造影均無異常改變，腎功能檢查、B超等各項檢查均正常。

1.2 方法

收集所有研究對象新鮮中段晨尿10 mL，430×g離心5 min，棄上清液，留取0.2 mL沉淀，混勻后取0.1 mL沉渣涂片，用高倍鏡全片檢查尋找紅細胞免疫球，檢測要求2 h內完成。全片發現紅細胞免疫球≥1個按陽性計算，并通過免疫熒光染色對比試驗確定；采用兔抗人免疫球蛋白熒光抗體的方法進行熒光素細胞染色[1]。檢測多型紅細胞百分比，記錄>75%的例數。EURostarⅢplus熒光顯微鏡、熒光染液購自歐蒙醫學診斷（中國）有限公司。BX53顯微鏡購自日本OLYMPUS公司。

1.3 統計學方法

采用SPSS 18.0軟件進行統計分析。計數資料以率表示，比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 紅細胞免疫球的形態學特點

在高倍鏡下，紅細胞免疫球是一群小紅細胞黏附聚集成的團狀物，常有絲狀物纏繞，也可有膜狀物包裹，形態不規則，可呈圓形或橢圓形，每個細胞之間結合緊密，看不到膜間隔，有部分已融合在一起，見圖1。加熒光標記兔抗人免疫球蛋白熒光抗體后，出現明顯黃綠色熒光。紅細胞免疫球經兔抗人免疫球蛋白熒光染色后可呈明亮黃綠色熒光，單個紅細胞已融成一體，看不到單個紅細胞胞界，見圖2。

圖1 濕片中紅細胞免疫球形態（×400）

圖2 熒光染色后紅細胞免疫球形態（×400）

2.2 非紅細胞免疫球紅細胞聚集特點

在高倍鏡下觀察非紅細胞免疫球紅細胞聚集現象，可見每個紅細胞之間結合較松散，一般是由黏液絲黏附在一起，形狀不規則，表面沒有膜狀物包裹，見圖3。單純紅細胞聚集現象表現為熒光染色后可見紅細胞松散結合，可見單個紅細胞胞界，沒有融合，也沒有包膜包裹，見圖4。

圖3 濕片中紅細胞聚集形態（×400）

圖4 熒光染色后紅細胞聚集形態（×400）

2.3 不同泌尿系疾病患者尿液中紅細胞免疫球和多型紅細胞觀察結果

尿液中紅細胞免疫球多見于IgA腎病，以及由微生物、內毒素引起的急性腎小球腎炎、過敏性腎小球腎炎、隱匿型腎小球腎炎，多出現在早期未經治療患者的尿液中；多型紅細胞常見于IgA腎病、紫癜性腎小球腎炎、慢性腎小球腎炎等疾病，多型紅細胞>75%為腎性紅細胞。見表1。

表1 不同泌尿系疾病患者尿液中紅細胞免疫球和多型紅細胞觀察結果

3 討論

紅細胞免疫球在尿沉渣濕片中為圓形、橢圓形紅細胞團塊，是數個小紅細胞黏附聚集在一起形成的成團單個紅細胞，間隔不清晰，相互融合，不易解離。紅細胞免疫球周邊光滑，用兔抗人免疫球蛋白熒光抗體染色后，呈明亮黃綠色，有熒光[2]，說明表面被免疫球蛋白覆蓋。已有研究證實，在腎小球、腎小管病變患者尿中免疫球蛋白數量有所增加[3-4]，借此可區分是腎性紅細胞，還是非腎性紅細胞。而一般紅細胞聚集形態不規則，紅細胞間結合松散。單個紅細胞胞界清晰，無融合現象。熒光染色后呈黃綠色熒光，但結合疏松，形態多樣，周邊不光滑。本研究結果顯示，IgA腎病、紫癜性腎小球腎炎、隱匿型腎小球腎炎患者尿沉渣中均能檢出紅細胞免疫球，且陽性率較高；慢性腎小球腎炎紅細胞免疫球陽性率不高。觀察尿沉渣中紅細胞免疫球有助于鑒別紅細胞來源，有利于泌尿系統疾病的鑒別診斷與定位診斷。

紅細胞免疫球在腎小球腎炎初期未經治療患者尿中出現率較高，患者紅細胞形態也較差[5]，多出現在急性期。本研究結果顯示，紅細胞免疫球在IgA腎病中檢出率最高，陽性率為93.7%；在紫癜性腎小球腎炎中檢出率也較高，陽性率為87.5%；隱匿型腎小球腎炎患者的陽性率為65.8%；慢性腎小球腎炎的陽性率為16.7%。紅細胞免疫球在免疫因素介導的急性腎小球腎炎中檢出率較高，而在慢性腎小球腎炎中檢出率較低，在尿路感染和泌尿系腫瘤患者尿液中沒有發現。提示通過檢測紅細胞免疫球陽性率，可鑒別腎小球腎炎種類，結合紅細胞形態可鑒別紅細胞來源是腎性紅細胞，還是非腎性紅細胞。紅細胞免疫球的形成可能由免疫反應介導，但具體形成機制還需進一步研究。

尿液紅細胞形態學檢測作為血尿來源定位初篩試驗[6]，患者留取標本簡單，且無創傷性，能較為準確地判斷血尿來源。多型紅細胞指紅細胞大小不等，形態呈2種及以上多型性變化，顯微鏡下根據尿液中多型紅細胞的百分比來判斷是否為腎源性血尿，與病理學診斷的符合率高，能快速鑒別尿液中紅細胞是否來源于腎臟，已越來越廣泛地被應用于臨床腎病篩查。尿液中紅細胞免疫球和紅細胞形態學檢測聯合應用，對腎臟疾病，特別是腎小球腎炎有重要提示作用。