急性腦梗死患者血清淋巴細(xì)胞過氧化小體增殖劑激活型受體γ、內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶、可溶性骨髓細(xì)胞樣轉(zhuǎn)錄因子-1水平變化及意義

張文青，杜菊梅，顏 江，李彩霞，梁風(fēng)俊

(陜西中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院 a.腦病科；b.針灸康復(fù)科，陜西 咸陽 712000)

急性腦梗死(acute cerebral infarct，ACI)是臨床最為常見的心腦血管性疾病，是由于多種原因?qū)е碌哪X部供血障礙，影響局部腦組織血運(yùn)，導(dǎo)致腦組織出現(xiàn)缺氧缺血狀態(tài)，造成細(xì)胞壞死，對(duì)患者神經(jīng)功能產(chǎn)生嚴(yán)重影響[1]。本病常見臨床癥狀主要包括言語不清、肢體功能障礙、飲水嗆咳等，部分患者可發(fā)生頭痛、嘔吐、昏迷等全腦綜合征。本病發(fā)病急，常在幾天內(nèi)病情達(dá)到高峰，出現(xiàn)進(jìn)行性加重[2]。殷艷玲等[3]相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)ACI患者由于急性加重期動(dòng)脈粥樣硬化嚴(yán)重，局部炎性反應(yīng)明顯，進(jìn)一步導(dǎo)致局部血管及腦部組織內(nèi)皮細(xì)胞損傷嚴(yán)重，局部組織血供不足，氧消耗量增加導(dǎo)致局部組織正常運(yùn)行受損。淋巴細(xì)胞過氧化小體增殖劑激活型受體γ(peroxisome proliferator-activated receptor γ，PPARγ)可通過保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞，穩(wěn)定血管內(nèi)炎性因子的作用，減少動(dòng)脈粥樣硬化的產(chǎn)生[4]；血清內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶(endothelin converting enzyme，ECE)由血管內(nèi)皮生成，在血管性疾病發(fā)生過程中起著重要作用[5]；有研究發(fā)現(xiàn)可溶性骨髓細(xì)胞樣轉(zhuǎn)錄因子-1(syndecan TERMs like transcript-1，sTLT-1)與動(dòng)脈粥樣硬化存在一定關(guān)系，參與ACI的相關(guān)病理改變[6]。本研究通過測(cè)定ACI患者血清PPARγ、ECE、sTLT-1水平，以期了解其臨床變化水平及相關(guān)意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料納入2019年1月至2020年1月我院收治的ACI患者60例作為研究組，入選標(biāo)準(zhǔn)：①符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)ACI臨床相關(guān)診斷內(nèi)容[8]并符合顱腦CT或磁共振檢查影像改變；②均為首次發(fā)病且在發(fā)病后72 h內(nèi)就診；③除ACI外無其他腦部組織損傷。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重肝腎功能異常；②合并嚴(yán)重血流動(dòng)力學(xué)紊亂；③合并全身性感染、惡性腫瘤等疾病；④合并糖尿病、高血壓、心臟病等全身性疾病。研究組女25例，男35例，年齡44～80歲[(58.94±8.86)歲]。選取同時(shí)間段健康體檢者60例作為對(duì)照組，女26例，男34例，年齡40～76歲[(55.94±9.41)歲]。兩組基線資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。依據(jù)患者入院時(shí)美國國立衛(wèi)生研究院腦卒中量表(NIHSS)[7]將研究組患者分為輕度組(n=37)、中度組(n=13)、重度組(n=10)。

1.2 方法①實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測(cè)。研究對(duì)象需在發(fā)病72 h內(nèi)于清晨抽取肘正中靜脈血5 ml，使用貝克曼Allegra臺(tái)式離心機(jī)進(jìn)行全血分離，1500 rpm/min，持續(xù)3 min溫度維持4 ℃后分離出血清并冷凍保存。對(duì)血清PPARγ、ECE、sTLT-1含量進(jìn)行檢測(cè)，使用美國BioTNT的牛白蛋白酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)試劑盒檢驗(yàn)，將抗體原吸附于載體表面，使用0.05%磷酸鹽溶液去除未吸附的抗原后加入新鮮稀釋酶抗體0.1 ml，恒定溫度37 ℃下孵育0.5～1 h后洗滌，加入深圳市艾瑞生物科技有限公司BV顯色底物0.1 ml反應(yīng)結(jié)束后加入硫酸。使用空白對(duì)照孔調(diào)0后測(cè)定OD值，ER-504酶標(biāo)儀購自英諾華醫(yī)療技術(shù)有限公司。②神經(jīng)功能評(píng)定。均在入院時(shí)采用NIHSS表評(píng)估神經(jīng)功能，評(píng)估包括意識(shí)水平、視野、面癱、上下肢運(yùn)動(dòng)、眼球運(yùn)動(dòng)、感覺、共濟(jì)失調(diào)、構(gòu)音障礙、注意力等方面，總分42分，<5分表示輕度神經(jīng)功能受損；5～20分表示中度神經(jīng)功能受損，≥20分表示重度神經(jīng)功能受損。

1.3 觀察指標(biāo)比較研究組與對(duì)照組血清PPARγ、ECE與sTLT-1指標(biāo)水平差異；研究組中各亞組血清PPARγ、ECE與sTLT-1指標(biāo)表達(dá)差異；血清PPARγ、ECE、sTLT-1表達(dá)水平與神經(jīng)功能狀況的相關(guān)性分析；PPARγ、ECE、sTLT-1表達(dá)水平對(duì)ACI患者神經(jīng)功能重度損傷的臨床預(yù)測(cè)價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 22.00統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，比較采用t檢驗(yàn)和單因素方差分析；血清PPARγ、ECE、sTLT-1與NIHSS評(píng)分的關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析，并繪制其受試者工作特征曲線(ROC)，分析其預(yù)測(cè)重度神經(jīng)功能障礙的效能。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組與對(duì)照組血清PPARγ、ECE、sTLT-1含量水平比較研究組PPARγ水平低于對(duì)照組，ECE、sTLT-1水平高于對(duì)照組(P<0.05)，見表1。

表1 研究組與對(duì)照組血清PPARγ、ECE、sTLT-1表達(dá)水平比較

2.2 不同NIHSS評(píng)分ACI患者血清PPARγ、ECE、sTLT-1表達(dá)水平比較中重度組血清PPARγ水平低于輕度組，重度組低于中度組；中重度組血清ECE、sTLT-1高于輕度組，重度組高于中度組(P<0.05)。見表2。

表2 不同NIHSS評(píng)分ACI患者血清PPARγ、ECE、sTLT-1表達(dá)水平比較

2.3 血清PPARγ、ECE、sTLT-1的表達(dá)水平與神經(jīng)功能狀況的相關(guān)性分析ACI患者NIHSS評(píng)分與血清PPARγ呈負(fù)相關(guān)(r=-0.578，P<0.01)，與ECE、sTLT-1呈正相關(guān)(r=0.351、0.467，P<0.01)。

2.4 PPARγ、ECE、sTLT-1表達(dá)水平對(duì)ACI患者神經(jīng)功能重度損傷的預(yù)測(cè)價(jià)值PPARγ、ECE、sTLT-1預(yù)測(cè)ACI患者神經(jīng)功能重度損傷效能從高到低依次為sTLT-1、ECE和PPARγ，見表3、圖1。

表3 PPARγ、ECE、sTLT-1表達(dá)水平對(duì)ACI患者神經(jīng)功能重度損傷的預(yù)測(cè)價(jià)值

圖1 ACI患者血清PPARγ、ECE、sTLT-1表達(dá)水平與疾病嚴(yán)重程度的ROC曲線

3 討論

高血壓、高血糖、高血脂所致大動(dòng)脈粥樣硬化均可引發(fā)ACI，導(dǎo)致腦部血液供應(yīng)突然中斷，引起腦組織壞死，影響其生活質(zhì)量與預(yù)后[9，10]。因此有效的預(yù)測(cè)ACI患者神經(jīng)功能損傷情況可為治療提供輔助作用，臨床使用影像檢查雖能夠在短時(shí)間內(nèi)了解ACI發(fā)病階段并進(jìn)行評(píng)估，但對(duì)于疾病預(yù)后缺乏有效預(yù)測(cè)價(jià)值。

血清PPARγ為核轉(zhuǎn)錄因子中的一類超核受體，葛菁等[11]研究發(fā)現(xiàn)PPARγ對(duì)炎性細(xì)胞的調(diào)節(jié)與合成其中重要的調(diào)控作用。本研究發(fā)現(xiàn)ACI患者在發(fā)病后72 h內(nèi)，其血清PPARγ表達(dá)水平與正常人相比顯著降低，且ACI患者GCS評(píng)分中重度患者血清PPARγ明顯高于中度與輕度患者，進(jìn)一步提示血清PPARγ參與ACI的發(fā)病過程，且與病情進(jìn)展存在關(guān)聯(lián)。Orekhov等[4]研究發(fā)現(xiàn)PPARγ參與心血管疾病的過程。在ACI患者發(fā)病過程中動(dòng)脈粥樣硬化形成，出現(xiàn)局部腦組織的血小板凝結(jié)，凝血系統(tǒng)異常導(dǎo)致血栓形成，PPARγ配體通過對(duì)肝臟內(nèi)X受體進(jìn)行調(diào)節(jié)，促進(jìn)脂肪膽固醇由巨噬細(xì)胞向高密度脂蛋白轉(zhuǎn)移，減少血小板聚集，降低血管粥樣硬化的發(fā)生。當(dāng)患者體內(nèi)PPARγ含量降低時(shí)，機(jī)體凝血功能出現(xiàn)異常，促使血栓的形成，PPARγ表達(dá)水平的減少導(dǎo)致血栓形成抑制作用減弱，可能誘發(fā)腦梗死。

本研究中ECE血清表達(dá)水平與ACI患者神經(jīng)功能受損程度呈正相關(guān)，表明ECE的表達(dá)水平在ACI患者疾病程度分級(jí)中存在一定指導(dǎo)意義。ECE是內(nèi)皮素在機(jī)體生物轉(zhuǎn)化與合成的關(guān)鍵要素，是調(diào)節(jié)血運(yùn)功能的重要因子，對(duì)維持血管張力與保持機(jī)體循環(huán)系統(tǒng)穩(wěn)定有著重要意義。Stéphanie等[12]研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)出現(xiàn)ACI血管粥樣硬化及其他腦部組織血管異常時(shí)，血管內(nèi)皮素及內(nèi)皮素-1的產(chǎn)生與合成增多，激活內(nèi)皮素系統(tǒng)共同參與腦組織損傷的病理生理變化。當(dāng)出現(xiàn)ACI時(shí)，患者血清內(nèi)皮素-1異常升高，局部腦組織缺血缺氧后累及血管并誘發(fā)血-腦屏障功能受損，腦組織內(nèi)皮素滲入血液，且隨腦組織受損程度的加重，內(nèi)皮素-1上升更明顯，導(dǎo)致內(nèi)皮素合成更多，ECE血清表達(dá)水平上升，加重腦組織缺氧缺血損傷。

Hashemzadeh等[13]研究發(fā)現(xiàn)sTLT-1可通過加強(qiáng)G-肌動(dòng)蛋白與血小板的粘性后黏附于血管內(nèi)皮而引起血管栓塞或動(dòng)脈粥樣硬化。本研究結(jié)果得出研究組患者血清sTLT-1表達(dá)水平高于對(duì)照組，在ACI疾病分級(jí)排序中sTLT-1含量由高到低分別為重度組、中度組、輕度組，且sTLT-1血清表達(dá)水平與本病患者神經(jīng)功能損傷程度呈正相關(guān)。當(dāng)患者機(jī)體炎癥反應(yīng)加重時(shí)sTLT-1血清含量也隨之增加，前驅(qū)的細(xì)菌病毒感染、缺血引起機(jī)體出現(xiàn)炎性反應(yīng)是導(dǎo)致ACI患者繼發(fā)性損傷的重要機(jī)制[14，15]。當(dāng)機(jī)體處于缺血狀態(tài)時(shí)可誘導(dǎo)其細(xì)胞因子、黏附因子水平、炎性介質(zhì)水平升高，引發(fā)血-腦屏障損傷與炎性細(xì)胞浸潤，導(dǎo)致機(jī)體炎性反應(yīng)進(jìn)一步加重，ACI患者血清sTLT-1含量有所增加，當(dāng)ACI患者疾病病情加重時(shí)血清sTLT-1表達(dá)水平也隨之升高。ROC曲線顯示血清PPARγ、ECE與sTLT-1對(duì)ACI患者神經(jīng)功能損傷情況均存在一定預(yù)測(cè)價(jià)值，預(yù)測(cè)價(jià)值由低到高排序?yàn)檠錚PARγ、ECE、sTLT-1。

綜上所述，ACI患者血清PPARγ低于正常水平，ECE、sTLT-1血清表達(dá)水平高于正常水平；當(dāng)ACI患者神經(jīng)功能損害嚴(yán)重時(shí)血清PPARγ表達(dá)水平隨之降低，血清ECE、sTLT-1表達(dá)水平隨之升高，表明PPARγ、ECE與sTLT-1均可反映ACI患者疾病發(fā)生程度，為患者后續(xù)治療提供支持。