血清糖類抗原125聯合人附睪蛋白4檢測在上皮性卵巢癌病情評估、預后生存預測中的應用研究

毛愛榮，李戰飛，袁曉雁，韓玉新，陳 靜

(1.中國人民解放軍聯勤保障部隊第九八八醫院焦作院區，河南 焦作 454150；2.南方醫科大學南方醫院，廣東 廣州 510515)

卵巢癌多發生于五十歲左右的女性，其生殖惡性腫瘤中發病率、死亡率排名靠前，據相關研究資料報道，其中上皮性卵巢癌發病率高達90%[1]。由于卵巢位置特殊，臨床表現隱匿，患者日常難以發覺，導致上皮性卵巢癌早期診斷率較低。晚期上皮性卵巢癌手術治療難度大，難以達到根治的目的，患者預后情況不佳。糖類抗原125(CA125)為檢測卵巢癌的腫瘤標志物之一，相關研究指出在卵巢癌相關腫瘤標志物中，總敏感性以CA125最高，但CA125對早期卵巢癌敏感性不高[2，3]。不少學者發現，腫瘤標志物與卵巢癌之間存在千絲萬縷的聯系，于是開始聯合新的腫瘤標志物檢測以為診斷卵巢癌尋求新的準確度高的檢測方法。人附睪蛋白4(HE4)是從人體附睪上皮遠端中分離出來，既往報道[4]HE4在卵巢癌組織中呈高表達狀態。為臨床診治上皮性卵巢癌提供理論支持，本研究收集上皮性卵巢癌及健康女性的血清，對比兩組CA125、HE4水平及與病理特征的關系，用ROC曲線了解其預后情況。現總結報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2016年5月至2017年5月解放軍第九八八醫院焦作院區收治的上皮性卵巢癌患者54例，納入標準：①均經腹部、盆腔MRI及CT檢查，提示上皮細胞增生活躍及核異型性改變；②術后均經本院病理檢查明確；③未合并重要器官嚴重疾病，預估生存期≥6個月。排除標準：①手術禁忌證者；②因精神障礙無法配合檢查者；③納入研究前經過藥物及化療治療者。將符合標準的54例患者設為觀察組，絕經前24例，絕經后30例；年齡41～75歲[(55.41±5.74)歲]。選取同期進行體檢的女性健康人員60例設為對照組，均進行腹部、盆腔MRI及CT檢查，未發現卵巢包塊；無惡性疾病史，無任何外部疾病征兆者。年齡(55.57±5.89)歲；絕經前32例，絕經后28例。

1.2 方法對照組、觀察組(術前)采血前需要坐位或仰臥體位休息10 min以上，清晨(空腹)抽取靜脈血5 ml(未絕經的人群避開經期抽血)。室溫放置15分鐘，離心，避免顆粒物質干擾并分離血清，放入-80 ℃冰箱保存待測，所有標本需一次室溫溶解解凍后4 h內完成檢測。人CA125、HE4的ELISA試劑盒均由上海江萊生物科技有限公司提供；全自動酶標儀由德國羅氏診斷有限公司提供。檢測過程嚴格按照說明書進行。

1.3 判斷標準CA125檢測標準：>35 μ/ml為陽性，<35 μ/ml為陰性；HE4檢測標準：>70 pmol/L為陽性，<7070 pmol/L為陰性。

1.4 隨訪詳細記錄兩組患者治療后無進展生存時間(PFS)，即患者開始接受治療，到觀察疾病發展或因腫瘤增大、轉移死亡時間；總生存時間(OS)，即患者開始治療到最后一次隨訪或患者死亡的時間。

1.5 統計學方法應用SPSS 22.0軟件對數據進行分析。CA125及HE4陽性、陰性表達情況以n(%)表示，比較采用χ2檢驗；上皮性卵巢癌患者病理特征等資料以均數±標準差描述，比較采用t檢驗；繪制ROC曲線，Keplan-meier生存分析，使用log-rank法進行檢驗，影響上皮性卵巢癌患者預后的相關因素采用非條件單因素和多因素Logistic回歸分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HE4、CA125在上皮性卵巢癌及健康女性中的表達情況CA125及HE4在觀察組中的陽性表達率分別為70.37%、77.78%，均顯著高于對照組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組HE4、CA125的表達情況比較

2.2 不同CA125、HE4表達患者病理特征情況分析患者的絕經狀態、組織病理學類型與CA125、HE4表達差異無統計學意義(P>0.05)；不同年齡、腫瘤浸潤深度、病理學分級比較，CA125、HE4陽性表達率差異有統計學意義(P<0.05)；在FIGO分期中，Ⅲ～Ⅳ期陽性表達率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期陽性表達率(P<0.05)；盆腔淋巴結陽性、腹主動脈旁淋巴結陽性、腹水的上皮性卵巢癌陽性表率顯著高于無淋巴結轉移、無腹水者(P<0.05)。見表2。

表2 不同CA125、HE4表達患者病理特征情況分析 (n)

2.3 CA125、HE4與上皮性卵巢癌預后的關系以電話隨訪或門診復查的方式對54例上皮性卵巢癌患者隨訪3年(隨訪截止時間2020年5月)，回訪率100%，隨訪時間(0.81±1.84)年。生存分析顯示CA125及HE4表達陰性者生存期顯著長于表達陽性者，Keplan-meier生存曲線明顯不同(χ2=4.500，P=0.034；χ2=6.150，P=0.013)。CA125陰性、陽性患者半數生存期分別為(40.12±2.65)月、(30.47±2.54)月，HE4陰性、陽性患者半數生存期分別為(40.23±2.57)月、(31.27±2.77)月。見圖1、圖2。

圖1 CA125陽性、陰性表達生存時間比較

圖2 HE4陽性、陰性表達生存時間比較

2.4 不同臨床特征患者3年生存率比較不同CA125、HE4、年齡、FIGO分期、盆腔淋巴結陽性、腹主動脈旁淋巴結陽性、腹水、浸潤深度、病理學分級的上皮性卵巢癌患者3年生存率比較，差異有統計學意義(P<0.05)；不同絕經狀態、組織病理學類型的患者3年生存率比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 不同臨床特征患者3年生存率比較

2.5 影響上皮性卵巢癌患者預后生存的多因素分析CA125陽性、HE4陽性、FIGO分期為Ⅲ～Ⅳ期、盆腔淋巴結陽性、腹主動脈旁淋巴結陽性、有腹水、浸潤深度≥1/2、病理學分級(G3)為影響上皮性卵巢癌患者預后的獨立危險因素(P<0.05)；年齡非影響上皮性卵巢癌患者預后的獨立危險因素(P>0.05)。見表4。

表4 影響上皮性卵巢癌患者預后生存的危險因素分析

3 討論

卵巢癌為女性生殖系統疾病中死亡率最高的婦科惡性腫瘤，當患者出現典型的腹水、腹脹、腹部包塊時，多為卵巢癌晚期，手術及化學治療效果欠佳，難以提高生存率。盡早發現卵巢癌對改善患者生活質量、提高生存率有重要意義。

目前，CA125與HE4在上皮性卵巢癌中的研究較少，本文采用化學發光微粒子免疫檢測法檢測其在上皮性卵巢癌的表達情況，發現CA125及HE4在觀察組中的陽性表達率均顯著高于對照組(P<0.05)，這一研究結果與既往文獻報道一致[5]。本研究分析CA125、HE4與上皮性卵巢癌患者病理特征的關系，得出：年齡越大、腫瘤浸潤深度越深、盆腔淋巴結陽性、腹主動脈旁淋巴結陽性、有腹水、病理學分級為G3的上皮性卵巢癌CA125、HE4陽性表達率更高(P<0.05)；在FIGO分期中，Ⅲ～Ⅳ期陽性表達率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期陽性表達率(P<0.05)，提示排除其他良性病變因素的影響，CA125與HE4表達呈陽性者，需考慮出現病灶轉移、腹水的可能，需盡早完善相關檢查并積極進行早期治療。

生存分析顯示CA125及HE4表達陰性者生存期顯著長于表達陽性者(P<0.05)。本研究結果顯示腹水(有)、CA125陽性、HE4陽性、FIGO分期(Ⅲ～Ⅳ期)、盆腔淋巴結陽性、腹主動脈旁淋巴結陽性、浸潤深度(≥1/2)、病理學分級為G3的上皮性卵巢癌患者預后不佳(P<0.05)，這與唐梅等[6]報道結果相似。分析其原因：CA125廣泛存在于細胞組織中，屬于可被單克隆抗體OC125結合的糖蛋白，有學者報道其與大分子糖蛋白抗原類似，在女性懷孕初期時的胚胎發育中會出現表達，在胚胎出生后消失，但在上皮性卵巢癌組織中會出現，可見其與卵巢上皮癌細胞之間存在密切聯系[7～9]。但有較多學者研究報道，其在卵巢囊腫等良性疾病中均均呈高表達狀態，因此易導致誤診、漏診[10～12]。HE4屬于抑蛋白酶家族，是一種呈酸性的蛋白質，分子量為25KDa，在女性生殖系統細胞中成高表達狀態[13]。多項相關研究指出，HE4在肺癌、乳腺癌、胰腺癌中呈中到高水平表達，在肝癌、胃癌、結腸癌中呈低水平表達[14，15]。由于本研究中，納入樣本量較少，實驗結果難免存在偏倚，后續將擴大樣本量進一步深入研究CA125、HE4與上皮性卵巢癌之間的關系。