急性腦出血患者骨橋蛋白、S-100β蛋白及基質金屬蛋白酶-9水平變化及與神經功能恢復、預后的相關性分析

熊江波，杜 軍，向 斌，張維波，劉 盛

(重慶市黔江中心醫院神經外科，重慶 409700)

急性腦出血是最嚴重的腦血管疾病之一，該病起病急，病情程度嚴重，具有較高的致殘率及死亡率，嚴重威脅患者生命安全。據部分資料報道[1]，所有腦血管病變中約有15%為腦出血，且目前臨床尚無有效的治療措施，大多患者預后情況不理想。關于腦出血的發病機制尚未明確，但多認為與血腦屏障功能紊亂有關[2]。骨橋蛋白(ostepontin，OPN)是一種分泌型糖基化蛋白，參與腦出血的病理過程；S-100β蛋白是一種酸性鈣結合蛋白，可促進神經膠質增殖、神經元分化及鈣化；MMP-9是基質金屬蛋白酶(matrix metalloprotein；MMP)中的一種蛋白水解酶，可破壞血腦屏障及腦微血管結構，加重組織損傷。既往研究資料表明，急性腦出血患者中OPN、S-100β蛋白及MMP-9蛋白水平表達異常會加重腦出血程度，與患者預后有顯著相關性[3]。為給臨床診治急性腦出血提供理論指導，提高對急性腦出血的認識，本文探討OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平變化與急性腦出血患者神經功能恢復、預后的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料我院2016年3月至2017年3月收治的急性腦出血患者的臨床資料，納入標準：①所有頭部MRI等影像資料完整，頭部MRI提示局部出現團塊狀異常信號；②預測生存期在6個月以上者；③齡45～79歲。排除標準：①顱內腫瘤卒中及合并其他惡性腫瘤、器官衰竭者；②合并外傷性顱腦損傷史、腦血管先天畸形者致血管破裂者；③肝腎功能疾病致腦出血者。本研究最終納入32例急性腦出血患者(經CT及MRI檢查確診)為觀察組。同時選取在本院進行健康體檢人員34例為對照組，納入標準：①臨床資料完整無缺失者；②未合并惡性腫瘤、器官衰竭等嚴重疾病者；排除近期服用過影響免疫功能藥物者。兩組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2 方法兩組均于次日清晨空腹抽取靜脈血6 ml送檢，分離血清，OPN、S-100β蛋白、MMP-9標本放置在-8 ℃保存待測。采用酶聯免疫吸附法測定上述三項指標。OPN試劑盒由武漢云克隆科技股份有限公司提供；S-100β蛋白試劑盒由上海哈靈生物科技公司提供提供；MMP-9試劑盒由上海信裕生物工程有限公司提供。OPN、S-100β蛋白、MMP-9檢測步驟嚴格按說明書進行。

1.3 觀察指標①比較兩組血清中OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平情況。OPN正常參考值范圍：<30 ng/ml；S-100β蛋白正常參考值范圍：<0.5 ng/ml；MMP-9正常參考值范圍：40.5～55.6 ng/ml。②通過美國國立研究院制定的卒中量表(National institute of health stroke scale；NIHSS)[4]評價患者神經功能，0～42分，分值越低神經功能受損程度輕。NIHSS評分<6分則表示患者神經功能恢復良好。③對急性腦出血患者進行為期2年的隨訪，截止至2019年3月，整理預后。

1.4 統計學方法應用SPSS 18.0軟件對數據進行統計學分析，計量資料以均數±標準差表示，比較采用t檢驗；計數資料以例數(%)表示，采用χ2檢驗；影響急性腦出血患者預后的因素采用Logistic回歸模型分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平比較

觀察組OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平均顯著高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平比較 (ng/ml)

2.2 不同NIHSS評分的急性腦出血患者OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平比較NIHSS評分≥6分的急性腦出血患者OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平均明顯高于NIHSS評分<6分患者(P<0.05)。見表3。

表3 不同NIHSS評分的急性腦出血患者OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平比較 (ng/ml)

2.3 不同臨床特征的急性腦出血患者預后情況不同OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平、NIHSS評分的急性腦出血患者2年預后生存率比較，差異有統計學意義(P<0.05)，見表4。

表4 不同臨床特征的急性腦出血患者2年預后情況 (n)

2.4 急性腦出血患者預后的影響因素分析OPN≥30 ng/ml、S-100β蛋白≥0.5ng/ml、MMP-9<40.5ng/ml或>55.6ng/ml、NIHSS評分≥6分為影響急性腦出血患者預后的獨立危險因素(P<0.05)。見表5。

表5 急性腦出血患者預后的影響因素分析

2.5 不同OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平的急性腦出血患者生存函數分析OPN<30 ng/ml、≥30 ng/ml的中位生存期分別為33.38月、22.06月；S-100β<0.5 ng/ml、≥0.5 ng/ml中位生存期分別32.33月、22.06月，MMP-9 40.5～55.6 ng/ml、<40.5 ng/ml或>55.6 ng/ml的中位生存期分別為31.24月、21.87月。生存分析顯示OPN<30 ng/ml、S-100β<0.5 ng/ml、MMP-9為40.5～55.6 ng/ml的患者生存期較長，Keplan-meier生存曲線明顯不同(P<0.05)。見圖1、圖2、圖3。

圖1 S-100β蛋白水平<0.5ng/ml與≥0.5ng/ml生存期比較

圖2 OPN水平<30 ng/ml與≥30 ng/ml生存期比較

圖3 MMP-9水平40.5～55.6 ng/ml、<40.5 ng/ml或>55.6 ng/ml生存期比較

3 討論

急性腦出血是神經內科常見的腦血管意外類型，死亡率極高。由于該病常合并小動脈硬化、顱內靜脈血栓等疾病，易導致顱內高壓、腦組織損傷，使中樞神經系統損傷后誘發神經內分泌系統紊亂[5～7]。臨床尚缺乏高效的評估急性腦出血患者預后的標志性生化指標。本研究結果顯示：觀察組OPN、S-100β蛋白及MMP-9水平均顯著高于對照組，這一研究結果與既往文獻報道一致[8]?？梢娂毙阅X出血患者上述蛋白水平均高于未發生腦出血者，有效證明了急性腦出血的發生與大量蛋白的釋放有關。

目前關于血清蛋白與腦血管疾病神經功能損傷的機制研究尚未明確，但有不少研究指出，血清蛋白的升高會加重腦血管疾病患者的神經損傷[9～13]。本研究中，NIHSS評分≥6分的急性腦出血患者OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平均明顯高于NIHSS評分<6分的急性腦出血患者，表明上述指標與急性腦出血患者神經功能有著密切聯系，可在一定程度上反應神經功能缺損嚴重程度。生存分析顯示OPN水平<30 ng/ml、S-100β蛋白<0.5 ng/ml、MMP-9水平為40.5～55.6 ng/ml的患者中位生存期較長，提示OPN、S-100β、MMP-9水平與急性腦出血患者預后有著密切聯系，上述指標水平較低者預后更佳。

研究顯示OPN≥30ng/ml、S-100β蛋白≥0.56 ng/ml、MMP-9<40.5 ng/ml或>55.6 ng/ml、NIHSS評分≥6分為影響患者預后死亡的獨立危險因素，這與Royer等[14]學者報道結果相似?？梢奜PN、S-100β蛋白、MMP-9水平與急性腦出血患者神經功能、預后相關，臨床可通過控制患者血清內OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平，以改善神經功能，促進其預后。分析其原因：OPN蛋白是一種在人體內分布廣泛的多功能蛋白，有研究表明，該蛋白參與了組織修復及發生炎癥的過程，出現腦損傷后，其在炎癥與重構組織中水平會增高[15，16]。S-100β蛋白為酸性小分子鈣結合蛋白質，主要分布于中樞神經肌周圍神經系統的細胞中。若大腦血管破裂，細胞機械性懷死會破壞血腦屏障，導致S-100β蛋白大量釋放至血液中，S-100β蛋白水平的變化可敏感的表現中樞神經系統的損傷程度，其可作為腦損傷的生化標志物[17]。MMP-9是一種參與降解全身組織細胞外機制的蛋白質，參與腦出血后血腦屏障破壞、炎癥及繼發腦損傷等病理過程，可分解內皮細胞間的緊密連接，導致毛細血管基膜破裂而加速血腦屏障的滲透性，加速水分擴散釋放炎性因子，最終導致腦細胞壞死[18，19]。相關研究發現[20]，腦血管疾病會引起MMP-9水平的顯著升高，可見OPN、S-100β蛋白、MMP-9水平的增高會加重患者神經功能損傷，上述指標水平的升高均可反映腦組織損傷及受損程度。

綜上所述，OPN≥30 ng/ml、S-100β≥0.5 ng/ml、MMP-9<40.5 ng/ml或>55.6 ng/ml會影響患者神經功能恢復程度，不利于患者預后。上述指標與患者神經功能與預后有著密切聯系，臨床可加強三者聯合檢測以評估患者預后。