過(guò)氧化氫對(duì)鹽脅迫下甜瓜過(guò)氧化和抗氧化酶活性的影響

唐琳

摘要：本試驗(yàn)以甜瓜（Muskmelon ）品種之一的“超甜小麥酥”品種為實(shí)驗(yàn)材料，采用盆栽培養(yǎng)法，實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：隨著H2O2處理濃度的增加，MDA和相對(duì)電導(dǎo)率逐漸降低，說(shuō)明植株在的膜質(zhì)過(guò)氧化程度得到了緩解。當(dāng)植株處于脅迫環(huán)境中，能通過(guò)提高相關(guān)抗氧化酶的活性來(lái)提高對(duì)逆境的適應(yīng)能力。

關(guān)鍵詞：甜瓜;過(guò)氧化氫;鹽脅迫;生理

1? 實(shí)驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)及其方法

1.1? 甜瓜幼苗丙二醛（MDA）含量的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)材料：甜瓜植株幼苗。

實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備：離心機(jī)，光度計(jì)，電子天平（精確到0.001g），水浴缸等。

實(shí)驗(yàn)試劑：三氯乙酸，硫代巴比妥酸溶液，石英砂等。

實(shí)驗(yàn)方法：用上述各種材料先取出甜瓜葉片，用電子天平（精確到0.001g）

稱量出1g，加入一定量的石英砂，三氯乙酸，用研缽體研磨成勻漿狀態(tài)即可。

將研磨好的勻漿液放入離心機(jī)中大概十五分鐘，離心后取出其上清液放在事先準(zhǔn)備好的試管中。在經(jīng)過(guò)一定處理，最后將它們分別放在532、500以及450nm的波長(zhǎng)下進(jìn)行吸光度的測(cè)定并計(jì)算出各組甜瓜幼苗丙二醛（MDA）的含量，作記錄。

1.2? 相對(duì)電導(dǎo)率

取新鮮葉片，清洗擦凈組織表面污物，剪碎并去中脈，混勻。同時(shí)用量筒稱取50ml去離子水并置于燒瓶中，測(cè)其電導(dǎo)率并記錄。再稱取已剪碎的新鮮樣品0.5g左右，置于燒瓶中，浸泡2h后再測(cè)其電導(dǎo)率并記錄。最后水浴加熱至80℃，并冷卻至室溫，測(cè)其相對(duì)電導(dǎo)率。

1.3 甜瓜幼苗超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化物酶（POD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）活性的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)材料：甜瓜植株幼苗。

實(shí)驗(yàn)器具：試管，滴管，容量瓶，剪刀，膠頭滴管，離心機(jī)，光度儀，電

子天平（精確到0.001g），濾紙等。

實(shí)驗(yàn)試劑：磷酸鹽、乙二胺四乙酸、抗壞血酸、聚乙烯吡咯烷酮等。

實(shí)驗(yàn)方法：取葉（0.3g）加入2毫升含有50mmol·L-1 磷酸鹽緩沖液（pH值7.8）、0.2mmol·L-1 乙二胺四乙酸、2 mmol·L-1 抗壞血酸和2%（W/V）聚乙烯吡咯烷酮的冰緩沖溶液，勻漿離心15分鐘，在4°C條件下由此產(chǎn)生的上清液中進(jìn)行酶活性的測(cè)定。超氧化物歧化酶（SOD）活性的測(cè)定采用Stewart & Bewley（1980）[16]描述的光化學(xué)法，過(guò)氧化物酶（POD）和過(guò)氧化氫酶（CAT）活性的測(cè)定根據(jù)Cakmak & Marschner（1992）[17]酶所描述的方法。記錄下實(shí)驗(yàn)所測(cè)得的數(shù)據(jù)并分析。

2? 結(jié)果與分析

2.1? 甜瓜幼苗株高、莖粗、干重的分析

在同一列含有相同字母的是沒(méi)有顯著性差異的（P<0.05 ）。從表1可以看出，每一列T1和T2都是有顯著性差異的，并且三項(xiàng)指標(biāo)（株高、莖粗、干重）都是顯著性降低，這說(shuō)明鹽脅迫對(duì)于甜瓜幼苗的生長(zhǎng)產(chǎn)生了負(fù)面效應(yīng)。隨著H2O2的加入，各項(xiàng)指標(biāo)又有顯著性的提高，這說(shuō)明過(guò)氧化氫對(duì)緩解幼苗鹽脅迫起到了積極作用。在H2O2低濃度（5～15μmol·L-1 ）處理下，隨著濃度的增加，各項(xiàng)指標(biāo)得到了顯著的增長(zhǎng)，這說(shuō)明5～15μmol·L-1處理中，過(guò)氧化氫的濃度越高，對(duì)于幼苗鹽脅迫的緩解效果越好。特別是在15μmol·L-1，效果最好。但是可以看出，在20μmol·L-1處理下幼苗的生長(zhǎng)三項(xiàng)指標(biāo)又顯著的降低，這說(shuō)明過(guò)氧化氫濃度太高也會(huì)使緩解鹽脅迫的作用效果變差。

2.2 過(guò)氧化氫對(duì)鹽脅迫下甜瓜幼苗丙二醛（MDA）含量的影響

膜脂質(zhì)過(guò)氧化的分析以MDA含量的多少來(lái)表示。上面含有不同字母的分組有顯著性差異，T2顯著性的高于T1，說(shuō)明鹽脅迫下幼苗的生長(zhǎng)顯著差于對(duì)照組，這說(shuō)明鹽脅迫對(duì)于幼苗產(chǎn)生了不利影響。隨著H2O2處理的加入，MDA明顯降低，T3、T4、T5和T2相比顯著性降低，這說(shuō)明H2O2的加入影響了MDA的含量，改善了鹽脅迫造成的負(fù)面生理效應(yīng)，在H2O2低濃度（5-15μmol·L-1）隨著濃度的增加改善情況越明顯，到達(dá)高濃度20μmol·L-1時(shí)，達(dá)到平衡。綜上所述，H2O2的加入可以明顯改善鹽脅迫造成的幼苗膜脂質(zhì)過(guò)氧化，緩解幼苗鹽脅迫。

3? 小結(jié)與討論

由此可見(jiàn)，鹽脅迫對(duì)植物生長(zhǎng)有許多不利的影響，它能使植物的生長(zhǎng)和發(fā)育受到抑制。在目前的研究中，我們發(fā)現(xiàn)鹽脅迫可以使甜瓜幼苗生長(zhǎng)停滯，對(duì)其生理產(chǎn)生許多不利的影響。然而，觀察到H2O2的補(bǔ)充降低了鹽脅迫對(duì)甜瓜幼苗生長(zhǎng)的不利影響（表1）。同時(shí)，從表1可以看出，隨著H2O2濃度的增加H2O2對(duì)鹽脅迫下甜瓜幼苗生長(zhǎng)越來(lái)越有益，15μmol·L-1時(shí)達(dá)到最大有益效應(yīng)。15μmol·L-1后，在H2O2高濃度（20μmol· L-1）的處理下，緩解鹽脅迫的有益效應(yīng)明顯下降，

參考文獻(xiàn)

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