氣相色譜-質譜法測定黃瓜中氧樂果農藥 殘留量的不確定度評定

◎ 李貴軍，袁彩霞，洪 霞，何海寧，張宏洲，王宗梅，許若彤

（1甘肅中商食品質量檢驗檢測有限公司，甘肅 蘭州 730010；2甘肅省商業科技研究所有限公司，甘肅 蘭州 730010）

農藥在提高農作物產量和質量方面起著非常重要的作用，但由于人們的不合理使用或過量使用，農藥殘留量給生物環境和人體健康帶來越來越嚴重的影響，因此，加強對農藥殘留的嚴控和快速檢測具有重要的研究意義[1-3]。氧樂果作為一種高效、中等毒性的有機磷殺蟲劑而被廣泛應用于不同種類的農作物生長中[4-6]。氧樂果不僅對環境的生物降解具有抵抗力，而且可以抑制乙酰膽堿酯酶的活性[7-8]。因此，提高氧樂果殘留量的檢測技術和檢測過程風險評定具有很好的研究價值[9-11]。測量不確定度是衡量數據結果準確性和可靠性的重要特征指標[12]，對測量結果的可疑程度和非負參數的分散性提供了重要保障[13]。

本試驗基于國家食品安全標準《蔬菜及水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）的檢測方法，建立了一種氣相色譜-質譜聯用儀測定黃瓜中氧樂果農藥殘留量的測量不確定度評定方法。通過對黃瓜樣品中氧樂果農藥殘留量測量不確定度的分析和評定，對提高試驗操作規范性及檢測結果的準確性和可靠性提供了數據支撐，為實驗室質量控制提供了一定依據，為食品安全日常檢測結果提供了重要技術保障。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

黃瓜試樣購自蘭州市城關區華聯超市；氧樂果（98%純度，常州國華電器有限公司）；丙酮（色譜純，上海安譜科技有限公司）；氯化鈉、無水硫酸鈉（分析純，安捷倫科技有限公司）。

1.2 儀器

電子天平（XS 225A-SCS型，安徽首衡稱重科技有限公司），渦旋振蕩儀（GENIUS3型，無錫沃信科技有限公司），洗耳球，50 mL聚苯乙烯具塞離心管，臺式高速離心機（CF16RXⅡ型，鹽城市安信實驗儀器有限公司），超聲波清洗機（SB-100B型，無錫沃信科技有限公司），氣相色譜-質譜聯用儀（Agilent 7890/5975C型，島津（上海）科技有限公司）。

1.3 試驗方法

1.3.1 試樣提取與凈化

稱取黃瓜樣品15.00 g于50 mL具塞離心管中，加入25 mL乙腈提取溶液，放入振蕩器中振蕩30 min，加入2～3 g氯化鈉搖勻，2 500 r·min-1轉速下離心3 min， 取上清液10 mL于25 mL離心管，加入20 mg磁性納米復合材料，渦旋5 min后，在外加磁場下分離棄去上清液，加入10 mL乙腈溶液解吸15 min，在外加磁場下分離，取其上清液過0.22 μm膜，即得到待測溶液。

1.3.2 不確定度評定

（1）數學模型。建立式1測量模型：

式中：A-樣品溶液中被測農藥的峰面積；As-農藥標準溶液中被測農藥的峰面積；V1-提取溶劑總體積，單位為mL；V2-吸取出用于檢測的提取溶液的體積，單位為mL；V3-樣品溶液定容體積，單位為mL；ρ-標準溶液中農藥的質量濃度，單位為μg·mL-1；m-試樣的質量，單位為g；1 000-單位換算系數。

（2）測量不確定度來源分析。本試驗主要探討了重復性試驗、電子天平和標準溶液對黃瓜樣品中氧樂果測定的影響，即式（2）：

式中：urel(rep)—重復性試驗引入的相對標準不確定度；urel(m)—天平稱取試樣質量m引入的標準不確定度；urel(c)—標準溶液中農藥的質量濃度c的標準不確定度。

2 結果與分析

2.1 測量不確定度分析與評定

2.1.1 重復性試驗引入的相對標準不確定度urel(rep)

稱取8份試樣，按1.3.1方法處理后進氣相色譜測定，結果見表1。

表1 稱樣質量及其處理后的測定數據表

被測農藥殘留量ω平均值：

測定值的標準偏差：

重復性試驗引入的相對標準不確定度：

2.1.2 稱樣引入的相對標準不確定度urel(m)

稱樣引入的相對標準不確定度主要來源于天平允許誤差標準不確定度u(a)和天平示值誤差標準不確定度u(b)兩者。

稱樣操作數學模型為m=m2-m1，其中：m2為樣品實測質量讀數，m1為調零讀數，則一次稱樣天平允許誤差的標準不確定度為（3）：

準確稱取黃瓜試樣25.00 g，查電子天平檢定證書知道最大允許誤差為±0.10 g，示值誤差為±0.05 g（0≤m≤50 g），均為B類不確定度評定，其服從均勻分布計算，k=3，因此，天平允許誤差的標準不確定度和天平示值誤差標準不確定度分別為：

稱取25.00 g黃瓜試樣質量引入的相對標準不確定度為：

2.1.3 標準溶液中農藥的質量濃度c的相對標準不確定度urel(c)

標準溶液中農藥的質量濃度c的標準不確定度urel(c)主要來源于標準物質純度、標準系列工作液、標準工作曲線擬合和上機測試液峰面積。

（1）標準物質純度的相對標準不確定度urel(d)。通過查閱氧樂果標準物質證書GBW（E）081898知，氧樂果的純度的相對標準不確定度為：urel(d)=0.02。

（2）標準工作曲線擬合引入的相對標準不確定度urel(f)。氧樂果標準系列各濃度點對應的峰面積見表2，利用最小二乘法擬合標準曲線線性回歸方程y=3 658.12x+39.684 2，其中斜率a=3 658.12，截距b=39.684 2，相關系數R2=0.999 6。

表2 標準工作曲線數據表

按1.3.1方法平行處理試樣8份，上機測試，由上述線性方程得試樣中氧樂果含量平均值c=0.45 μg·mL-1，由標準曲線擬合引入的標準不確定度為式（3）、式（4）：

式中：s為標準殘差；p為樣品測量次數，8次；n為標準曲線中所有濃度點的測量次數，40次；cs為標準系列工作液的平均濃度，0.38 μg·mL-1；ci為標準工作液濃度；yi為與ci對應的峰面積。

因此，標準工作曲線擬合引入的相對標準不確定度為：

綜合分析，標準溶液引入的相對標準不確定度為：

2.2 試樣中氧樂果殘留量測定相對合成標準不確定度urel(ω)

測量重復性和儀器數據處理軟件產生的相對標準不確定度urel(f2)在urel(c)中，因此，試樣中氧樂果殘留量測定合成相對標準不確定度為：

2.3 試樣中氧樂果殘留量測定擴展標準不確定度u(ω)

在95%置信區間時，包含因子k=2，黃瓜中氧樂果殘留量測定的相對擴展標準不確定度為：

urel(ω)=urel(ω)×k=0.062 mg·kg-1

因此，試樣中氧樂果殘留量測定擴展標準不確定度為：

3 結論

本試驗基于國家食品安全《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）檢測方法，結合氣相色譜-質譜聯用儀建立黃瓜樣品中氧樂果殘留量不確定度評定方法。通過分析與評定該方法中各個不確定度分量，試樣中氧樂果殘留量為0.155 4 mg·kg-1，其測定擴展標準不確定度為0.01 mg·kg-1，其中k=2。結果表明，本試驗中黃瓜中氧樂果殘留量不確定度來源主要包括標準物質的純度、移液器的使用頻次和標準曲線的擬合。因此，為了提高試驗操作規范性及檢測結果的準確性，在檢測過程中應當購買純度較高的標準溶液，同時定期做好標準儲備液的期間核查。在配制標準曲線時，盡可能減少移液槍的使用頻次或使用更精密的量器。