流蘇金石斛化學成分及其分析研究

萬恂達

摘要：流蘇金石斛作為蘭科的金石斛屬植物，可以將全草入藥，且具有滋陰清熱和益胃生津的功能和效果。但了解現如今國內外對這類植物的研究文獻發現，與其化學成分有關的研究并不多，且相應的質量標準研究更是少之又少，因此為了更好利用這類植物藥材，本文在深入掌握流蘇金石斛基本定義的基礎上，對其所包含的化學成分和質量標準進行系統研究，以此為未來臨床應用和質量控制提供有效依據。

關鍵詞：流蘇金石斛;化學成分;質量標準;蘭科

0引言：結合我國2010年出版的《中國藥典》分析可知，研究流蘇金石斛并對其所包含的水分、灰分以及浸出物進行全面檢測，并利用反相高效液相色譜法構建實際指標測量方法，而后通過觀察穩定性和精密度等，來明確其所包含的化學成分，并由此明確具體的質量標準。這項研究對現代醫療領域發展而言具有積極作用，同樣也可以提高實際流蘇金石斛藥材種植質量和應用水平。

1.流蘇金石斛價值應用

流蘇金石斛是指一種生長在海拔760到1700米山地林中樹干上或林下巖石上的蘭科金石斛屬植物，也被叫做瓜石斛，主要存在于越南、泰國以及印度等地，我國境內生長在云南、海南以及廣西等地。這類植物不僅能用于藥物研究，而且具備栽培價值，屬于當前園藝栽培行業關注的重要元素。從醫學角度來看，流蘇金石斛具備清熱潤肺、止咳等功能，在臨床醫學中應用主要用來治療胸膜炎、哮喘以及肺癆咳嗽等[1]。

2.儀器材料

本文在研究流蘇金石斛化學成分時選用了以下幾種必需的設備儀器：第一，X6型顯微熔點測定儀;第二，SHIMADZU GCMS-QP2010氣相色譜質譜聯用儀;第三，Bruker AM600型核磁共振光譜儀;第四，Sephadex LH-20;第五，薄層色譜硅膠;第六，柱色譜硅膠;第七，原有植物材料。

3.提取分離

具體操作如下所示：第一，先將流蘇金石斛已經經過干燥處理后得到的3.5g全草放在粉碎機粉碎;第二，利用體積分數分別為95%和70%的乙醇回流進行提取，且保障每次一小時;第三，在合并提取液后進行有效過濾，并在減壓濃縮之后添加水溶液進行混合;第四，再利用石油醚、二氯甲烷以及乙酸乙酯、正丁醇等進行萃取，而后經過減壓濃縮后得到石油醚部位20g;第五，要利用20g的石油醚浸膏在硅膠柱色譜中按照40：1到3：2的梯度進行洗脫，最終得到9個組分。同時，要將40：1獲取的組分2再利用硅膠柱色譜按照100：1到10：1的梯度進行洗脫，最終得到2mg的化合物5。另外，按照石油醚→丙酮15：1的比例進行洗脫，就可以得到組分4和組分5，前者可以再次結合40：1到10：1的梯度進行洗脫，進而得到9mg的化合物1、200mg的化合物3、8mg的化合物7以及3.7mg的化合物8。而后者可以按照50：1到10：1的梯度進行洗脫，進而得到1mg的化合物6和11mg的化合物10。根據石油醚→丙酮10：1的比例進行洗脫就能得到組分6，此時再按照10：1到0：1的梯度進行洗脫，最終可以得到11mg的化合物4。按照4：1的比例進行洗脫可以得到組分7，其經過5：1到0：1的梯度洗脫可以在再次結晶中得到7mg的化合物2和12mg的化合物9[2]。

4.成分分析

運用硅膠柱色譜儀、HW-40C凝膠色譜、ODS柱色譜等多類現代化分離純化技術進行實驗探究可知，可以在流蘇金石斛全草乙醇提取溶液當中獲取十九個化合物，按照理化常數、化學方法等進行逐一鑒定，最終可以明確其中十四種化合物的構成，其中涉及到九個二萜類，一個單萜類、一個黃酮類、一個甾體類以及兩個酚酸類，具體鑒定結果如下表1所示。結合上述實驗分析可知，最終可以得到以下幾種化學成分：第一，正二十五烷醇，其屬于白色粉末，mp控制在82°C到83°C之間;第二，7α-羥基谷甾醇，其屬于白色針晶，mp主要控制在220°C到202°C之間;第三，豆甾-4-烯-3-酮，其屬于沒有顏色的針晶，mp主要控制在159°C到160°C之間;第四，6β-羥基-豆甾-4-烯-3-酮也屬于沒有顏色的針晶，mp主要控制在208°C到210°C之間;第五，5α-豆甾-3-酮也屬于沒有顏色的針晶，也叫做石油醚-乙酸乙酯，mp主要控制在147°C到148°C之間;第六，β-谷甾醇同樣屬于沒有顏色的針晶，mp主要控制在139°C到141°C之間;第七，麥角甾-4，6，8（14），22E-四烯-3-酮屬于黃綠色的針晶，mp主要控制在124°C到125°C之間等。

本文研究介紹主要以二萜類為例進行研究，其中本次實驗操作得到的二萜類FJD-1和FJD-9的H譜和C譜測量數據結果對比情況。兩者的絕對構型都是利用CD來明確的。比如說，FJD-1的CD譜在291nm的位置上存在負Cotton效應，和（16R）-16，17-滴hydroxy-ent-kauran-3-one非常類似，由此證明C-5的結構形態和（16R）-16，17-滴hydroxy-ent-kauran-3-one是一樣的，都屬于S構型，由此可以進一步推解出其他手性碳的絕對構型。同時，結合HRESIMS提供的準分子離子峰m/z375.2167[M+Na]+，具體理論數值為375.2167）及m/z727.4442[M+Na]+，由此證明FJD-4和FJD-3屬于同分異構體，對比兩者的1H、13C NMR（CD3OD），可以明確發現它們最大的差異在于羥基的取代區域有差異。同時，結合HSQC、1H-1H COSY以及HMBC譜可以進一步驗證這一結論。而后再結合NOESY譜進行研究分析發現，化合物FJD-4的相對構型是指（4α，11α，16α）-11，16，17，19-tetrol-ent-kaur-3-one。

雖然在實驗研究當中，FJD-4的CD譜并沒有骨過多變化，但研究其所擁有的化學位移數值可知，尤其是研究實際耦合常數和相同生物來源可以發現，這一化合物的C-16位和FJD-1和FJD-3的C-16是相同的，也就是R構型。由此在成分分析當中可以進一步推導出所有手性碳的絕對構型。因此，最終可以明確化合物FJD-4的結構是（11R，16R）-11，16，17，19-tetrol-ent-kaur-3-one。

結語

綜上所述，從上世紀九十年代開始到二十一世紀初期，就曾有科研學者對流蘇金石斛的小極性部位的化學成分提出了研究與分析。隨著現如今社會經濟和科研技術水平的提升，為了更好利用我國境內生長的流蘇金石斛藥材，確保其可以在實踐醫療領域發揮作用，我國在有關產品開發項目的引導下，對這類植物的大極性部分所包含的化學成分進行深入探討，并從中得到了非常多有價值的信息，這對研究藥材成分、應用療效以及構建質量標準等工作而言具有積極作用。

參考文獻

[1] 費嬌冬， 陳林， 丁剛，等. 流蘇金石斛中牡荊素2″-O-β-D-葡萄糖苷的分離鑒定及含量測定[J]. 中國實驗方劑學雜志， 2013， 19（001）：64-67.

[2] 陳業高， 王紅艷. 金石斛屬植物化學成分及藥理活性研究進展[J]. 時珍國醫國藥， 2005（08）：725-727.

南昌大學資源環境與化工學院 江西南昌 330000