老年反流性食管炎患者血清c-myb表達及流行病學情況

王勝 蔣明 王敏

(1海南西部中心醫院普外科，海南 儋州 571700；2海南醫學院第二附屬醫院普外科)

胃食道反流是人體的正常生理過程，大多數發生在食道遠端且通常無癥狀，當反流物病理性流入食道后則會導致食道黏膜發炎、糜爛和潰瘍，誘發反流性食管炎(RE)，對患者的日常生活產生嚴重影響并增加患者的經濟負擔〔1〕。據統計，在亞洲國家RE的患病率在5%左右〔2〕，我國在1999年對30～40周歲RE患者癥狀的發生率進行了統計，但未對老年群體進行統計〔3〕。研究顯示，隨著年齡的增長，RE的發病率逐漸增加〔4〕。原癌基因c-myb是一種核內癌基因，常分布于人體消化道上皮細胞中〔5〕，參與結直腸癌、胃癌、食道癌和肝癌細胞的增殖與分化〔6〕。報道顯示，c-myb在上消化道相關疾病中異常表達〔7〕，但c-myb在RE中的表達情況鮮有報道。本研究通過實時熒光定量PCR(RT-qPCR)檢測了RE患者和健康志愿者食道黏膜中c-myb mRNA的表達，并分析其水平在診斷RE中的參考價值。

1 材料與方法

1.1一般資料 隨機抽取2017年12月至2019年12月在海南西部中心醫院就診的150例老年RE患者和在體檢中心進行體檢的志愿者1 450例。納入研究的RE患者均符合下述條件：①有反酸、胃灼熱等典型癥狀；②經電子胃鏡檢查排除消化性潰瘍和腫瘤等器質性疾??；③無胃部及十二指腸炎癥；④無腹部手術史；⑤無肝膽疾病或嚴重的全身性疾病；⑥無結締組織病和糖尿病病史。RE患者中男78例，女73例，平均年齡(69.4±6.7)歲。1 450例志愿者中包括十二指腸潰瘍546例、胃潰瘍193例、萎縮性胃炎372例及糜爛性胃炎273例，其中男797例，女653例，平均年齡(70.1±6.5)歲。共發放1 600份調查問卷，其中RE患者150份，健康志愿者1 450份。RE組最終收回110份，志愿者(非RE)組最終收回1 432份(89.50%)。參與本研究的RE患者及志愿者均簽署知情同意書，本研究獲得醫院倫理委員會批準后進行。

1.2方法 采用問卷調查的方式對參與研究的老年人進行調查，內容包括：年齡、身高、體重、文化程度、居住地、RE常見癥狀發生情況(健康志愿者不需要填寫)和日常生活習慣。

胃鏡下取110例RE患者和546例十二指腸潰瘍患者胃竇處1塊胃黏膜組織，妥善保存后用于后續檢查。采用幽門螺旋桿菌款速分析化學法尿素酶診斷試劑盒(100人份/盒，山東博邁達生物科技有限公司)進行Hp檢測。193例胃潰瘍、372例萎縮性胃炎和273例糜爛性胃炎患者另取胃黏膜組織采用甲苯胺藍染色法檢測Hp。

胃鏡下取RE患者、十二指腸潰瘍患者、胃潰瘍患者、萎縮性胃炎患者和糜爛性胃炎患者食道下部黏膜組織，并妥善保存。采用RT-qPCR，以β-actin對上述患者食道黏膜組織中的c-myb mRAN水平進行檢測。c-myb上游引物序列為：5′-GGCATAACCACTTGAATCCAGAACG-3′，下游引物序列為：5′-CAGTTCGTCCAGGCAGTAGC-3′。內參基因β-actin上游引物序列為：5′-ATCGTGCGTGACATTAAGGAGAAG-3′，下游引物序列為：5′-AATGGGGAGAAATTCGGCTGT-3′。使用2-ΔΔCt計算c-myb mRNA的相對表達水平。

1.3統計學處理 使用SPSS20.0統計學軟件進行χ2檢驗、t檢驗。OR<1.1表示該因素為無關因素，1.1≤OR≤1.5表示該因素為輕微影響因素，1.6≤OR≤2.0表示該因素為中度危險因素，OR>2.0表示該因素為高度危險因素。

2 結 果

2.1兩組年齡、文化程度及居住地分布情況 兩組年齡和居住地差異顯著(P<0.01)。見表1。

表1 兩組年齡、文化程度及居住地分布情況〔n(%)〕

2.2患者常見癥狀發生情況 RE組中最常見的癥狀為反酸，其次為反胃和胃灼熱，有少部分患者出現胸骨后疼痛和下咽困難的癥狀。另外，大部分患者發生上述癥狀的頻率較低，每日發生1次及以上者僅占少數。見表2。

表2 RE患者常見癥狀發生情況〔n(%),n=110〕

2.3患者Hp檢出率 RE患者Hp陽性檢出率〔25.45%(28/110)〕明顯低于十二指腸潰瘍〔66.85%(365/546)〕、胃潰瘍〔55.96%(108/193)〕、萎縮性胃炎〔41.94%(156/372)〕和糜爛性胃炎患者〔91.79%(196/273),χ2=65.319、26.354、9.720、63.347，P=0.000、0.000、0.002、0.000〕。

2.4調查人群反流性食管炎危險因素分析 肥胖、經常大量吸煙、經常大量飲酒和經常過飽飲食是導致患RE的高危因素(P<0.05)；經常喝咖啡和經常吃甜食是導致患RE的中危因素(P<0.05)；經常喝濃茶、經常吃辛辣食物和經常吃油膩食物對RE的發生無明顯影響(P>0.05)，見表3。

表3 兩組反流性食管炎危險因素分析〔n(%)〕

2.5患者血清c-myb水平及參考價值 RT-qPCR檢測結果顯示，c-myb mRNA水平在RE患者食道組織樣品中的表達水平明顯升高(1.00±0.14，1.36±0.27；t=22.849，P<0.05)。ROC分析結果顯示，食管組織樣本中c-myb mRNA的水平在診斷RE時具有較高的靈敏度和特異性，有作為診斷RE特異性生物標志物的潛在價值(AUC=0.955，95%CI：0.091～1.000，P=0.000)，見圖1。

圖1 RE組血清c-myb水平的診斷價值ROC分析曲線

3 討 論

RE是胃內容物反流入食管引發的食管黏膜慢性炎癥。據統計，RE的發病年齡主要集中在老群體中〔8〕，可見對于RE患者的防治重點人群應為老年。我國早在1999年就對30～40周歲的人群進行了RE流行病學調查，但缺少老年群體的數據〔3〕。

本研究發現，在年齡大于60周歲的老年群體中，66～75周歲是RE的高發年齡段。另外，年齡和居住地對RE的發生率有極大的影響，究其原因可能是由于隨著年齡的增長，人體功能退化導致的胃腸道功能失衡而引起的；同時，因居住地的不同導致不同老年人的生活習慣和飲食習慣等的差異致胃腸道及十二指腸功能失常導致胃排空能力受阻使胃反流物增加。RE的臨床表現以胃灼熱、反酸、范圍等癥狀為主，也是患者就診的主要原因〔9〕。由于不同患者的主觀感受和耐受性不同，因此并非所有RE患者表現出上述癥狀。本研究結果顯示，胃灼熱、反酸和反胃是RE患者的主要癥狀，胸骨后疼痛和下咽困難的發生率較低。由于不同研究方法和采用的標準不一致，因此很難對RE主要癥狀的發生率進行比較。但與其他研究結果一致的是，在老年群體中RE主要癥狀的發生相當普遍〔8〕。Hp是與消化道疾病發病有關的致病菌種，是目前發現的唯一可以在人胃中生存的微生物〔10〕，與慢性胃炎、消化系統潰瘍和黏膜相關淋巴組織淋巴瘤的發生發展有密切關聯〔11〕。研究顯示，Hp感染通常不會引起人體的胃食管反流病，本研究結果提示RE患者中Hp的感染率較低，其主要原因可能是Hp感染降低了以胃部炎癥為主的患者胃反流的能力〔12〕。

目前研究認為RE與Barrett食管和食管腺癌的發生發展是一個多步驟、多階段的多因素事件，由RE引起的食道鱗狀上皮損傷發展至Barrett食管最終發展為食管腺癌〔13〕。相關報道顯示，RE患者Barrett食管的發生率為10%左右〔14〕，而Barrett食管患者的食管腺癌患病率是一般人群的數十倍〔15〕。同時，也有研究證實RE還可能引起部分患者上呼吸道、肺部和口咽部疾病〔16〕。因此，對RE危險因素的研究和新型生物標志物的探尋在該病的防治中至關重要。本研究結果顯示，肥胖、經常大量吸煙、經常大量飲酒和經常過飽飲食是導致RE發生的高危因素，而經常喝咖啡和經常吃甜食是導致RE發生的中度危險因素。近年來研究證實，原癌基因c-myb具有轉錄調節因子的作用，參與了多種腫瘤的發生和發展過程。任春蓉等〔13〕的研究顯示，c-myb的表達水平與食管腺癌的病理分級具有較高的相關性，是BE發展為食管腺癌的早期事件之一。鑒于此研究，推測c-myb有作為診斷RE發生生物標志物的潛力。本研究結果提示c-myb可作為RE診斷的新型生物標志物。

總之，在RE的防治工作中應加強66周歲以上及農村地區老年人群體的篩查力度，同時應對高危因素暴露人群展開教育工作。另外，在臨床上檢測食道黏膜組織中c-myb mRNA水平有助于RE的早發現早治療。