宋健 袁敏惠 劉爭輝 崔冰慧 褚宇鵬黃毓娟 惠建萍 沈舒文 于勇 孟凱強
(1.陜西中醫(yī)藥大學,陜西 咸陽 712046;2.西安市中醫(yī)醫(yī)院,陜西 西安 712021)
胃癌前病變(PLGC)是指胃黏膜出現(xiàn)腸上皮化生、異形增生的病變,可惡變?yōu)槲赴赴┑乃劳雎饰痪尤虻谌籟1],也是我國常見一種惡性腫瘤疾病。胃癌的發(fā)病機制目前尚不清楚,近年來更多的研究者認為,胃癌的發(fā)生在于胃癌干細胞的存在和信號通路的異常表達,其中典型代表為Wnt/β-catenin信號通路,Lgr5作為Wnt/β-catenin通路的受體蛋白,也被大家認為是眾多惡性腫瘤干細胞潛在的分子標記物[2-6]。
本課題組在前期臨床和實驗研究的基礎之上,研究基于“毒瘀交阻”理論組方金果胃康膠囊對胃癌前病變大鼠模型Wnt/Lgr5信號通路調(diào)控的分子機制。
1.1動物 SPF級雄性SD大鼠90只,體重100~130 g,4~5周齡,由成都達碩實驗動物中心提供,動物許可證號:SCXK(川)2015-030。
1.2藥物與試劑 N-甲基-N’-硝基-N-亞硝基胍(MNNG)由日本東京化學工業(yè)有限公司生產(chǎn)提供,編號:MO527;鹽酸雷尼替丁,貨號:S67363;4%的多聚甲醛溶液、SDS-PAGE凝膠制備試劑盒,武漢博士德;RNA提取試劑盒、cDNA反轉(zhuǎn)試劑盒、熒光定量試劑盒,深圳艾偉迪;PCR引物,生工生物工程(上海)股份有限公司;無水乙醇;二甲苯;Wnt1、β-catenin、Lgr5、β-actin,單克隆抗體,北京博奧森。金果胃康膠囊(產(chǎn)品批號:20190429)由陜西中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院制劑中心提供;維酶素片(產(chǎn)品批號:20190104,國藥準字H41024448)規(guī)格:0.2g×100片,由樂普恒久遠藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。
1.3主要儀器 702超低溫冰箱,美國Thermo;TC-120 S+型生物組織自動脫水機,湖北泰維;B ETS-M5脫色搖床,江蘇Kylin-bell;5430R高速低溫離心機,德國Eppendorf;……