郭曉輝,鄭會超,姜俊芳,鄭開之,吳建良,黃 新,江 洪,蔣永清*
(1.浙江師范大學化學與生命科學學院,浙江金華 321004;2.浙江省農業科學院畜牧獸醫研究所,浙江杭州 310021;3.金華市一康農業發展有限公司,浙江金華 321071)
維生素是生物體內重要的微量營養素,對機體的繁殖性能、生產性能以及免疫功能具有非常重要的作用。犢牛代乳粉、開食料中往往額外添加脂溶性維生素[1]。B 族維生素是水溶性維生素,一般認為,即使日糧中不含B 族維生素,反芻動物也可以通過瘤胃合成B 族維生素,除煙酸外均能滿足自身的需求[2]。近年來研究表明,在奶牛日糧中添加維生素B3和膽堿可以提高產奶量和乳脂率,日糧中添加維生素B1具有增加產奶量和乳成分含量的趨勢[3-5]。當犢牛缺乏維生素B1時,表現為食欲下降、腹瀉、脫水、痙攣,嚴重者會在12~72 h死亡[6]。飼料中添加一定量的維生素B12能改善犢牛的采食量,提高日增重,促進生長發育[7]。由此推測,處于特殊生理階段或環境應激的反芻動物瘤胃中合成的B族維生素不能滿足自身的營養需求。
犢牛出生時瘤胃的生理和發酵功能尚未發育,主要依賴牛奶滿足維持和生長需要,待瘤胃發育成熟時全部依賴固體飼料維持生長,為成年后的泌乳性能奠定基礎[8]。關于日糧中補飼復合B 族維生素對犢牛生長發育影響的研究較少。本研究擬觀測復合B 族維生素對犢牛生長性能和血液指標的影響,旨在探討犢牛補飼B 族維生素的必要性。
1.1 試驗材料 復合B 族維生素(商品名:奶維多),由江蘇佳谷生物科技有限公司提供。具體成分:維生素B1≥2 400 mg/L,維生素B2≥1 200 mg/L,維生素B6≥1 800 mg/L,維生素B12≥5 mg/L,維生素≥9 mg/L,煙酰胺≥6 000 mg/L。
1.2 試驗設計 選用日齡(3±2)d、體重(41.7±4.0)kg的30 頭健康中國荷斯坦母犢,隨機分為對照組和試驗組。日糧組成為代乳粉、開食料和燕麥草,營養成分見表1。代乳粉由乳清粉、植物油、植物蛋白、右旋糖及淀粉、碳酸鈣和預混合飼料組成。開食料由玉米、豆粕、糖蜜、石粉、磷酸氫鈣、小蘇打及預混料配合而成,壓制為直徑4 mm、長10 mm 左右的圓柱形顆粒。試驗組在對照組的基礎上補飼復合B 族維生素,每天每頭10 mL,分早、晚2 次添加到稀釋后的代乳粉中,斷奶前1 周每天1 次。試驗于2019 年10 月—12 月在浙江省金華市一康農業有限公司進行。

表1 日糧營養成分與能量水平
1.3 飼養管理 試驗犢牛出生后至試驗開始前在犢牛欄隔離飼養,等量飼喂初乳。試驗期間對照組和試驗組分2 欄飼養,早、中、晚3 次飼喂,每頭牛每天飼喂代乳粉750 g,飼喂時將代乳粉加入45~50℃溫水中,充分混合攪拌后喂給犢牛。斷奶前1 周,代乳粉從日喂3 次逐步過渡到2 次、1 次和0 次。2 周齡后開始采食開食料,1 月齡后在此基礎上補飼燕麥草,自由飲水。觀測記錄試驗犢牛健康發病情況,直至70 日齡斷奶試驗結束。
1.4 指標測定與方法
1.4.1 體尺體重指標 試驗期間,于試驗開始(4 日齡)、試驗中期(32 日齡)和試驗結束(70 日齡)晨飼前空腹稱量每頭犢牛的體重,測量體斜長、體高、胸圍。
1.4.2 血液指標 每個處理隨機選取6 頭犢牛,于4、32、70 d 晨飼前空腹采集試驗牛頸靜脈血,每頭每次2管,1 管氟化鈉抗凝劑用于測定血糖(GLU)、血漿總蛋白(TP)、白蛋白(ALB),球蛋白(GLO)含量=TP 含量-ALB 含量,白球比=ALB 含量/GLO 含量。1 管EDTA 二鈉抗凝劑用于測定尿素氮(BUN)、甘油三酯(TG)。采集的血液迅速送到實驗室,3 500 r/min低溫離心8 min,分離血漿,凍存。采用日立7160 全自動生化儀測定血漿中GLU、BUN 和TG 含量,相應試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。
1.4.3 糞便指標 于32 d 和70 d 晨飼前人工刺激犢牛直腸末端收集糞便,60℃鼓風烘干48 h,根據烘干前后的重量比計算含水率,風干糞樣粉碎后測定淀粉含量。
1.5 統計分析 試驗數據經Excel 2016 整理后用SPSS 21.0 進行單因素方差分析,結果以平均值±標準誤表示。以P<0.05 作為差異顯著依據,P<0.01 作為差異極顯著依據,以0.05≤P<0.1 作為趨勢分析依據,P≥0.10 代表差異不顯著。
2.1 補飼復合B 族維生素對犢牛體尺體重的影響 所有犢牛試驗期間健康良好,無發病和診療記錄。由表2 可見,4 日齡和70 日齡時,試驗組和對照組體重差異不顯著;32 日齡時,試驗組體重與對照組相比有增加的趨勢(P=0.092)。試驗組犢牛4~32 日齡日增重較對照組提高28.7%(P<0.05),33~70、4~70 日齡,試驗組與對照組日增重差異不顯著。

表2 補飼復合B 族維生素對犢牛體尺體重的影響
32 日齡時,試驗組胸圍與對照組相比有增加的趨勢(P=0.078);70 日齡時,試驗組胸圍較對照組提高2.7%(P<0.05);4~32 日齡,試驗組犢牛胸圍變化速率比對照組提高33.3%(P<0.01),33~70 日齡,胸圍變化速率與對照組差異不顯著。試驗期間2 個處理組體斜長和體高差異不顯著。
2.2 補飼復合B 族維生素對犢牛血漿指標的影響 由表3 可知,4 日齡時2 個處理組TP、ALB 和GLO 含量差異不顯著(P>0.10);32 日齡時,2 個處理組TP 含量差異不顯著(P>0.10),試驗組ALB 含量比對照組提高9.8%(P<0.05),白球比極顯著增加(P<0.01);70日齡時,試驗組TP 含量比對照組提高3.5%(P=0.070),2 個處理組白球比差異不顯著(P>0.10)。試驗期間對照組和試驗組的GLU、TG 和BUN 含量差異不顯著(P>0.10)。

表3 補飼復合B 族維生素對犢牛血漿指標的影響
2.3 補飼復合B 族維生素對犢牛糞便含水率和淀粉含量的影響 由表4 可知,32 日齡時,試驗組糞便淀粉含量較對照組有增加的趨勢(P=0.066),試驗組含水量與對照組差異不顯著(P>0.10);70 日齡時,試驗組糞便含水率和淀粉含量與對照組差異不顯著(P>0.10)。

表4 補飼復合B 族維生素對犢牛糞便含水率和淀粉含量的影響 %
3.1 補飼復合B 族維生素對犢牛生長性能的影響 本研究發現,補飼復合B 族維生素可以顯著促進4~32 日齡犢牛胸圍發育和增重,而對33~70 日齡犢牛生長發育影響不顯著。李雙等[9]研究表明,在犢牛日糧中添加維生素、氨基酸、酶制劑、益生菌等組成的營養平衡劑可以顯著提高犢牛哺乳期日增重和胸圍變化率,與本研究結果接近。這可能是因為1 月齡前犢牛瘤胃環境處于發育早期,不能產生足夠的B 族維生素來輔助自身碳水化合物、蛋白質和脂肪的代謝,隨著時間的推移,1 月齡后犢牛瘤胃功能逐步發育完善[10],合成的維生素能滿足自身的需要。維生素B1在細胞內經磷酸化等一系列修飾后和多種催化酶的作用密切相關。維生素B2可以在動物體內與ATP 相互作用轉化為核黃素5'-磷酸,再經ATP 的磷酸化成為黃素腺嘌呤二核苷酸,作為多種酶的輔酶,具有生理活性,并在代謝中發揮重要作用。B 族維生素中的葉酸、泛酸以及吡哆醇分別通過一碳單位的轉移、輔酶A 或?;d體蛋白和輔酶的形式參與機體碳水化合物、蛋白質和脂肪的代謝。瘤胃中 B族維生素主要來源于 2 個途徑,一是飼料原料在瘤胃中經過微生物的降解和酶作用后釋放,二是瘤胃微生物合成。瘤胃中B 族維生素的合成受飼料種類、營養成分、采食量及微生物等多種因素影響[11],哺乳期犢牛瘤胃發育過程中合成、吸收、利用B 族維生素方面研究較少,B 族維生素適宜補飼量有待進一步研究。
3.2 補飼日糧中添加復合B 族維生素對犢牛血漿指標的影響 GLU 的主要來源是飼料中的糖類物質被降解成單糖進入血液,并通過神經和激素調節維持GLU 濃度的恒定,以滿足機體對GLU 的需要量。血液中的TG是被儲藏起來的能量源,來自食物的分解吸收和肝細胞的合成。Stanley 等[12]研究表明,血漿BUN 濃度可以反映動物體內可消化蛋白質的利用率和飼糧中氨基酸的平衡狀況。本研究中,2 組犢牛GLU、TG 和BUN 濃度差異均不顯著,表明補飼復合B 族維生素對糖類等主要營養物質消化代謝影響不大。血清ALB 作為營養物質的載體,具有維持血漿滲透壓、提供機體蛋白質等功能;血漿GLO 反映機體的免疫能力。動物體氨基酸攝入不足或吸收發生障礙時可以影響血漿ALB 含量[13]。本研究發現,補飼復合B 族維生素可以顯著提高32 日齡犢牛血漿ALB 含量和白球比,表明試驗組犢牛攝入的營養用于生長的比例較對照組多,這可能是試驗組哺乳前期生長性能高于對照組的原因。
3.3 補飼復合B 族維生素對犢牛糞便含水率和淀粉含量的影響 犢牛哺乳期間消化酶活性較低,尤其是淀粉酶,犢牛初生時胰淀粉酶活性很低,之后隨日齡增長而增高,故犢牛對飼料淀粉的消化率較低。糞便含水率和淀粉含量在一定程度上可以反映奶牛的腸道健康狀況,腹瀉或消化不良的犢牛糞便含水率和淀粉含量往往偏高[14]。泌乳牛糞便淀粉含量大于5%,提示腸道發生炎癥[15]。本研究中,2 組犢牛糞便含水率和淀粉含量無顯著差異,且在正常范圍,表明試驗犢牛胃腸道發育正常,補飼復合B 族維生素對犢牛消化性能影響不大。
本研究結果表明,哺乳犢牛補飼復合B 族維生素可顯著促進出生至1 月齡犢牛的胸圍發育和體重增長;補飼復合B 族維生素具有提高犢牛斷奶時血漿TP 水平的趨勢,可顯著或極顯著增加1 月齡犢牛血漿ALB 水平和白球比。綜上,建議哺乳犢牛1 月齡內補飼復合B族維生素,適宜補飼量有待進一步研究。