TB-DNA、IgG、IgM 及血沉檢測在菌陰肺結核診斷中的應用價值探討

蘇俊梅 謝榮章 歐雅文

肺結核是一種慢性傳染病,是由肺部感染結核桿菌所致,會累及許多器官,重要傳染源為排菌者,主要經呼吸道傳播。近幾年,中國肺結核發病率開始逐年上升,其中痰菌陰性患者人數占60%～70%［1］。現階段,細菌學檢查仍為診斷結核病的金標準,傳統的抗酸染色涂片敏感性為19.5%～35%［2］,而普通培養分枝桿菌出報告的時間在6～8 周,且要求較高的培養條件,較低的陽性率,很多醫院在開展這一方法時條件不夠。因此,需深入探究有效的診斷形式,提升診斷效率。本文圍繞菌陰肺結核診斷中TB-DNA、IgG、IgM 及血沉檢測的應用價值展開研究,具體內容報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2019 年7 月～2020 年9 月收治的146 例肺部疾病患者,所有患者資料完整,經過相關及腫瘤標志物檢查排除腫瘤,根據痰涂片、常規檢查及臨床診斷將患者分為菌陽肺結核組(50 例)、菌陰肺結核組(46 例)及肺部其他疾病組(50 例)。菌陽肺結核組男26 例、女24 例；年齡21～72 歲,平均年齡(46.28±9.10)歲；納入標準：患者均有典型臨床表現,并符合國際傳染性肺結核診斷標準。菌陰肺結核組男26 例、女20 例；年齡22～73 歲,平均年齡(47.18±9.06)歲；納入標準：其他非結核性肺部疾病及其他部位肺結核除外,胸部CT 顯示存在活動性肺結核表現,支氣管或肺部組織病理證實結核病變,同時符合《肺結核診斷與治療指南》中有關活動性不排菌肺結核診斷標準。肺部其他疾病組男28 例、女22 例；年齡23～71 歲,平均年齡(47.59±8.36)歲；納入標準：肺膿腫、慢性阻塞性肺疾病、大葉性肺炎患者等,所有患者均經過確診并排除存在合并肺結核患者。三組患者一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05),具有可比性。見表1。本文研究通過倫理審核批準。

表1 三組患者一般資料比較(n,±s)

表1 三組患者一般資料比較(n,±s)

注：三組比較,P＞0.05

1.2 方法 三組患者均進行TB-DNA、IgG、IgM 及血沉檢測。患者入院后均采取晨痰標本,采用抗酸染色鏡檢痰涂片,痰涂片陽性：每100 個視野抗酸桿菌＞3 個；以TB-DNA 法測定同份晨痰,患者同時行IgG、IgM 及血沉檢測。菌陰判定標準［3］:支氣管或肺部組織病理證實結核病變、痰或支氣管肺泡灌洗液中未檢出抗酸分枝桿菌均可判斷確診。

1.2.1 TB-DNA 檢測 患者采取合格晨痰標本,用4%氫氧化鈉溶液稀釋液化痰液,混勻,靜置30 min～1 h,使其充分液化,待無明顯固狀物且吸出時無拖絲現象,取液化后痰標本離心處理,用于基因擴增。應用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(PCR)技術檢測標本中TB-DNA。實驗步驟及結果判讀嚴格按照試劑盒上的說明書實施操作,同時做好室內質量控制。

1.2.2 IgG、IgM 檢測 實行結核抗體膠體金IgG、IgM 檢測,按常規法采集、分離、貯存靜脈血清標本,按照各試劑盒說明書要求實施試驗步驟,嚴格按產品操作說明書開展試驗過程和判斷相關結果。

1.2.3 血沉檢測 采用魏氏(Westergren)法進行血沉檢測,男性正常值0～10 mm/h,女性正常值0～15 mm/h,大于正常值為陽性,小于正常值為陰性［4］。

1.3 觀察指標 比較三組TB-DNA、IgG、IgM、血沉的陽性檢出率,TB-DNA、IgG、IgM、血沉單項檢測及聯合檢測菌陰肺結核的敏感度。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0 統計學軟件進行數據統計分析。計量資料以均數±標準差 (±s)表示,采用t檢驗；計數資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三組陽性檢出率比較 菌陰肺結核組血沉、TB-DNA、IgG、IgM 陽性檢出率均明顯高于菌陽肺結核組和肺部其他疾病組,菌陽肺結核組血沉、TB-DNA、IgG、IgM 陽性檢出率高于肺部其他疾病組,差異有統計學意義(P＜0.05)。見表2。

表2 三組陽性檢出率比較［n(%)］

2.2 血沉、TB-DNA、IgG、IgM 單項檢測與聯合檢測菌陰肺結核的敏感度比較 聯合檢測菌陰肺結核的敏感度顯著高于血沉、TB-DNA、IgG、IgM 單項檢測,差異有統計學意義(P＜0.05)。見表3。

表3 血沉、TB-DNA、IgG、IgM 單項檢測與聯合檢測菌陰肺結核的敏感度比較(%)

3 討論

結核病是一種慢性感染性疾病,是由機體接觸感染結核分枝桿菌后引發,常見于青年群體,潛伏期為4～8 周,入侵肺部的結核菌感染超過80%被稱為肺結核［5］。結核病中常見肺結核,引發肺結核的病原體為結核分枝桿菌,現階段診斷結核分枝桿菌的主要手段包括免疫學診斷、分子生物學診斷、影像學診斷、細菌學診斷［6］。細菌學檢查為檢測傳染源的主要手段,與此同時,也是確診肺結核和制定化療方案的主要依據［7］。但由于肺結核患者痰液呈間歇排菌或處于不合格的痰標本質量,會導致痰涂片或分枝桿菌呈陰性培養結果,以至于部分肺結核患者無法證實病理學［8］。診斷菌陰肺結核除依據胸部影像學檢查和臨床表現外,實驗室的檢測指標對診斷可發揮良好作用。對菌陰肺結核采取多種方法聯合檢測可提升陽性檢出率［9］。

隨著分子生物技術不斷發展,且敏感度、特異度也較高,其快速進入結核病診斷領域。以往血沉在診斷結核病中可作為一種非特異性參考指標,在檢查過程中簡單易行,目前已經普遍應用于國內,但影響因素較多,從而引發假陽性或假陰性的幾率很高［10］。TB-DNA 具有較高的檢測敏感度,速度快,但僅能判斷是否有結核桿菌,無法對潛伏性感染、死菌及活動性感染行良好鑒別。現階段結核抗體IgG 主要選擇使用純化的結核菌細胞壁多糖,結核菌脂阿拉伯甘露糖(LAM)是最常用的［11］。患者在結核分枝桿菌感染早期以IgM 型結核抗體為體內主要的免疫球蛋白,中晚期主要為IgG 型。TB-DNA、IgG、IgM 及血沉聯合檢測可有效彌補單項檢測的不足,提升檢出率,發揮良好的檢測效果［12］。本次研究結果顯示,菌陰肺結核組血沉、TB-DNA、IgG、IgM 陽性檢出率均明顯高于菌陽肺結核組和肺部其他疾病組,菌陽肺結核組血沉、TB-DNA、IgG、IgM 陽性檢出率高于肺部其他疾病組,差異有統計學意義(P＜0.05)。聯合檢測菌陰肺結核的敏感度顯著高于血沉、TB-DNA、IgG、IgM 單項檢測,差異有統計學意義(P＜0.05)。

綜上所述,在菌陰肺結核診斷中應用TB-DNA、IgG、IgM 及血沉聯合檢測,有利于提升診斷率,增強特異性,為早期診斷菌陰肺結核提供有力依據。