免疫組織化學法檢測結直腸癌四種DNA錯配修復蛋白表達缺失對判斷腫瘤微衛星狀態的價值

張銀

摘 ?要：目的 ?分析免疫組織化學法檢測結直腸癌四種DNA錯配修復蛋白表達缺失在腫瘤微衛星狀態判斷中的價值。方法 ?選擇云南省紅河州第三人民醫院2018年9月～2019年9月收治的37例結直腸癌患者，對其病灶組織行切片處理，所有患者先行免疫組織化學法檢測，后行PCR-毛細管電泳法檢測，觀察兩種方式的診斷結果。結果 ?常規切片免疫組織化學法檢測結果：31例患者四種MMR蛋白呈現出彌漫強陽性表達，5例患者至少存在一種蛋白陰性表達，1例患者至少存在一種蛋白局灶陽性表達。組織芯片PCR-毛細管電泳法檢測結果：30例患者四種MMR蛋白呈現出彌漫強陽性表達，6例患者至少存在一種蛋白陰性表達，1例患者至少存在一種蛋白局灶陽性表達。兩種檢測方式準確度、敏感度及特異度未有明顯的組間差異（P>0.05）。結論 ?通過免疫組織化學法檢測結直腸癌四種DNA蛋白表達情況，在結直腸癌腫瘤微衛星狀態的預測中敏感度和特異度較高，且具有一定的經濟性，可有效篩選出結直腸癌，其較高的準確性能對優化治療方案有關鍵作用。

關鍵詞：腫瘤微衛星狀態;免疫組織化學法;DNA錯配修復;結直腸癌;蛋白表達

中圖分類號：R730.23 ? ?文獻標識碼：A ? ?文章編號：1009-8011（2021）-4-0040-03

結直腸癌是消化系統癌癥，其中DNA錯配修復蛋白表達缺失引起微衛星不穩定（MSI）導致的癌癥區別于其他癌癥，其發生部位、組織形態有較強的特殊性，需采取針對性的治療措施及預后護理，否則會影響恢復效果，故早診斷尤為重要[1]。近年來，MSI發病機制較為明確，PCR能對結直腸癌分子進行鑒別，但準確性較低，而免疫組織學檢測結果具有較高的準確率，且有機體損傷小、操作方便、結果獲取速度快的優勢，可應用于疾病的篩查診斷。故本研究選擇了我院2018年9月～2019年9月收治的37例直腸癌患者，旨在分析免疫組織化學法檢測結直腸癌四種DNA錯配修復蛋白表達缺失在腫瘤微衛星狀態判斷中的價值。

1 ?資料與方法

1.1 ?一般資料

選擇云南省紅河州第三人民醫院于2018年9月～2019年9月收治的37例結直腸癌患者，所有患者先行免疫組織化學法檢測，后行毛細管電泳法檢測，觀察兩種方式的診斷結果。在37例患者中，有男性21例，女性16例;年齡36～74歲，平均年齡為（58.79±4.32）歲。本研究獲得倫理委員會批準。

1.2 ?納入及排除標準

納入標準：①患者經病理學確診為結直腸癌，未合并其他腫瘤或癌癥;②患者在同意書上簽字;③對免疫組織化學法檢測高度依從，精神狀態較好。

排除標準：①一般資料不完整者;②有毛細管電泳法檢測禁忌者;③預計生存期不足3個月者。

1.3 ?方法

將患者病灶組織行切片處理，通過甲醛（濃度為4%）固定標本，行石蠟包埋、HE染色處理。所有患者先行免疫組織化學法檢測，后行毛細管電泳法檢測。

1.4 ?觀察指標

觀察兩種方式的診斷結果。觀察兩組方式的特異度、敏感度、準確度。

1.5 ?統計學分析

實驗以SPSS21.0進行統計學分析，計量資料在數據中用（x±s）表示，使用t檢驗，計數資料在數據中用[n（%）]表示，使用χ2 檢驗，P<0.05時表示研究有統計學意義。

2 ?結果

2.1 ?檢測結果分析

37例結直腸癌常規切片免疫組織化學法檢測結果：31例患者四種MMR蛋白呈現出彌漫強陽性表達，5例患者至少存在一種蛋白陰性表達，1例患者至少存在一種蛋白局灶陽性表達。其中缺失MLH1和PMS2的患者共28例，缺失MSH2和MSH6的患者共5例，單獨缺失PMS2的患者共2例，單獨缺失MSH6的共1例，單獨缺失MSH2的共1例。

37例結直腸癌組織芯片PCR-毛細管電泳法檢測結果：30例患者四種MMR蛋白呈現出彌漫強陽性表達，6例患者至少存在一種蛋白陰性表達，1例患者至少存在一種蛋白局灶陽性表達。其中缺失MLH1和PMS2的患者共27例，缺失MSH2和MSH6的患者共4例，單獨缺失PMS2的患者共3例，單獨缺失MSH6的共2例，單獨缺失MSH2的共1例。

2.2 ?分析兩種方式檢驗準確度、敏感度及特異度

兩種檢測方式準確度、敏感度及特異度所獲取的結果數據，未有明顯的組間差異（P>0.05）。見表1。

3 ?討論

衛星是生物基因組中重復串聯系列，易出現DNA復制錯誤情況，需通過DNA錯配修復系統進行糾正，當四種DNA基因出現體細胞MLH1啟動過度甲基化或胚系突變時，不能再進行微衛星復制錯誤糾正[2]。相關研究發現，MSI腫瘤細胞核仍有表達，但其與內對照細胞相比仍舊較弱，在內對照細胞良好著色的條件下，多數細胞表達強度較弱可被提示為MSI腫瘤，在此之后需再次進行PCR-毛細管電泳法進行腫瘤MSI狀態的檢測[3]。由于IHC染色結果影響因素較多，包括預處理、組織固定、抗體克隆號不同等，故在判讀結果時應關注內對照細胞核的著色狀態。此外在常規切片染色結果的觀察中，若腫瘤組織塊中央無著色或著色強度較弱，且對照細胞核著色度較弱，可推測其原因是組織脫水處理不足或固定不正確等[4]。所以在判讀常規切片結果時，需將內對照陰性區域避開，繼而準確判讀出MMR蛋白表達情況，若病例不可判讀，其原因可能是內對照細胞核未成功著色，或前期處理較差，要求在檢測過程中嚴格遵循程序，把控各個環節[5]。此外在腫瘤MSI狀態預測中，小塊組織的MMR蛋白IHC檢測結果具有一定的參考意義，不管是采取新輔助治療，亦或是晚期結直腸癌患者均可采用活檢檢測MMR蛋白IHC，從而推斷出腫瘤MSI的狀態[6]。

本研究中，常規切片免疫組織化學法檢測結果：31例患者四種MMR蛋白呈現出彌漫強陽性表達，5例患者至少存在一種蛋白陰性表達，1例患者至少存在一種蛋白局灶陽性表達。組織芯片PCR-毛細管電泳法檢測結果：30例患者四種MMR蛋白呈現出彌漫強陽性表達，6例患者至少存在一種蛋白陰性表達，1例患者至少存在一種蛋白局灶陽性表達。兩種檢測方式各指標組間差異小（P>0.05）。可見兩組檢測方式均能實現優異的檢出效果，且具有較高的檢出準確度、敏感度及特異度，應用價值顯著。

綜上所述，通過免疫組織化學法檢測結直腸癌四種DNA蛋白表達情況的檢測價值高。

參考文獻

[1]程世芳，毛永蕓，唐生業.癌組織及外周血中CD44、PLCEl、甲基化Sept9基因及DNA錯配修復蛋白表達水平與結直腸癌病理分期及預后的相關性分析[J].胃腸病學和肝病學雜志，2020，29（2）：183-188.

[2]郭春梅，吳靜，劉紅.免疫組織化學法檢測散發性結直腸癌DNA錯配修復蛋白質：內鏡活組織檢查與手術標本的一致性[J].中華消化雜志，2018，38（12）：841-844.

[3]胡阿錦，張暢，龔苗子，等.結直腸CAR-T細胞治療相關腫瘤靶點的篩選：CEA、EGFR、HER2、Mesothelin、MUC1和EpCAM的表達及共表達狀況[J].消化腫瘤雜志（電子版），2019，11（3）：225-230.

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[5]劉師宏，汪威，穆小松.高爾基體磷蛋白3在結直腸癌組織中表達及其對結直腸癌細胞增殖、侵襲和遷移的影響[J].解剖學報，2018，49（4）：461-468.

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