特殊醫學用途嬰兒配方食品中氯的國標檢測方法適用性

吳 昊，張 斌，劉曉光，郭美娟，張蘭天，張 巖

（河北省食品檢驗研究院，河北省食品安全重點實驗室，河北 石家莊 050200）

特殊醫學用途嬰兒配方食品指針對患有特殊紊亂、疾病或醫療狀況等特殊醫學狀況嬰兒的營養需求設計制成的粉狀或液態配方食品。在醫生或臨床營養師的指導下，單獨食用或與其他食物配合食用時，其能量和營養成分能夠滿足0～6 月齡特殊醫學狀況嬰兒的生長發育需求[1-2]。氯是人體必需元素，血液中的氯等電解質離子比例失調時，輕者使人疲乏無力、厭食嗜睡、消化不良，重者導致嘔吐、抽搐、昏迷不醒、心律失常等癥狀[3]。特殊醫學用途嬰兒配方食品中的氯主要來自加工過程中加入的食鹽[4]。GB 25596—2010《食品安全國家標準 特殊醫學用途嬰兒配方食品通則》規定，特殊醫學用途嬰兒配方食品中氯的含量范圍為12～38 mg/100 kJ。

GB 25596—2010指定特殊醫學用途嬰兒配方食品中氯的檢測方法為GB 5413.24—2010《食品安全國家標準 嬰幼兒食品和乳品中氯的測定》。目前，GB 5413.24—2010已被廢止，現行國標為GB 5009.44—2016《食品安全國家標準 食品中氯化物的測定》[5]。GB 5009.44—2016規定了食品中氯化物的3 種檢測方法，分別為電位滴定法、佛爾哈德法（間接沉淀滴定法）、銀量法（摩爾法或直接滴定法）。目前嬰幼兒配方乳粉中氯采用GB 5009.44—2016第三法，即銀量法（摩爾法或直接滴定法）進行檢測，而對于種類繁多、基質不同的特殊醫學用途嬰兒配方食品，該方法的適用性仍需進一步驗證。

作為乳蛋白過敏嬰幼兒的唯一食物來源，特殊醫學用途嬰幼兒蛋白質水解配方和氨基酸配方產品的質量控制尤為重要[6-9]。本研究共有7 家實驗室參與，依據GB 5009.44—2016對3 類不同配方特殊醫學用途嬰兒配方食品、共8 種產品中的氯進行測定，研究特殊醫學用途嬰兒配方食品中氯國標檢測方法的適用性，期望能夠為建立特殊醫學用途嬰兒配方食品中氯的檢測方法提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

目前因無法得到特殊醫學用途嬰兒配方食品的參考樣品，代以市售嬰兒配方乳粉作為參考樣品，參考值由具有ISO 17043資質的實驗室基于AOAC 986.26的內部檢測方法，依據能力驗證統計方法計算得出。

本研究選用市售不同品牌、不同配方的特殊醫學用途嬰兒配方食品為樣品，具體為4 種乳蛋白部分水解配方產品、2 種乳蛋白深度水解配方產品及2 種氨基酸配方產品。樣品信息詳見表1。

表1 特殊醫學用途嬰兒配方食品樣品信息Table 1 Information about samples tested in this study

本研究中各實驗室所用儀器、試劑及標準溶液配制均參照GB 5009.44—2016要求進行。

1.2 儀器與設備

855型全自動電位滴定儀 瑞士萬通有限公司。

1.3 方法

樣品前處理及氯的檢測分析采用GB 5009.44—2016第三法銀量法（摩爾法或直接滴定法）和GB 5009.44—2016第一法電位滴定法。

1.4 數據處理

使用Microsoft Office Excel 2007軟件和SPSS軟件進行數據處理。

2 結果與分析

2.1 嬰兒配方乳粉參考樣品中氯含量測定結果

本研究參加比對的7 家實驗室使用GB 5009.44—2016第三法對參考樣品中的氯進行檢測。由表2可知，參考值為423 mg/100 g，各實驗室檢測值為412～490 mg/100 g，相對標準偏差為6.17%。直接滴定法的終點是靠肉眼進行判斷，而且在滴定管的估讀上可能存在誤差，從而導致結果出現差異[10]。

表2 嬰兒配方乳粉參考樣品中氯含量測定結果（GB 5009.44 —2016第三法）Table 2 Results of silver nitrate titration for chlorine in infant formula reference samples

2.2 特殊醫學用途嬰兒配方乳粉中氯含量測定結果

由表3可知，各樣品檢測結果的相對標準偏差為12.7%～32.9%。蛋白質水解配方和氨基酸配方樣品中含有氨基酸，酸性較強，在此條件下，會轉化為從而指示終點的Ag2CrO4沉淀出現延遲。此外，樣品中的氨基酸還有可能會與銀離子發生反應，形成有色（如紅棕色）物質，影響終點判定，最終導致檢測結果偏高[11-13]。而GB 5009.44—2016第三法是在堿性環境（pH 6.5～10.5）中用硝酸銀進行滴定，通過目測顏色變化來判定終點，因此采用GB 5009.44—2016第三法檢測蛋白質水解配方和氨基酸配方樣品中氯時，樣品基質影響終點判斷，導致檢測結果差異性較大。

表3 特殊醫學用途嬰兒配方乳粉中氯含量測定結果（GB 5009.44—2016第三法）Table 3 Results of silver nitrate titration for chlorine content in infant formula for special medical purposes

2.3 各實驗室測定結果的ZB值

ZB值即實驗室間Z比分數（Z值），用來衡量實驗室間測試結果的系統誤差[14]。Z值用來衡量某一測試結果在一組數據中相對于中位值的偏離程度，Z絕對值越小，表明該結果的偏離程度越低。Z值的計算公式為：Z=（測試結果－中位值）/測試結果的標準四分位數間距。依據CNAS-GL02《能力驗證結果的統計處理和能力評價指南》中對Z比分數評價準則的規定，|Z|≤2為滿意結果，2＜|Z|＜3為可疑或有問題結果，|Z|≥3為不滿意結果。

由表4可知，實驗室4氨基酸配方樣品D、乳蛋白部分水解配方樣品E，實驗室7乳蛋白部分水解配方樣品B、F和氨基酸配方樣品H 5 個樣品檢測結果的|ZB|大于2，其余51 個檢測結果的|ZB|≤2，說明檢測結果精密度符合實驗要求。

表4 各實驗室測定結果的ZB值Table 4 ZB values obtained in seven laboratories

2.4 回收率測定結果

為了進一步驗證GB 5009.44—2016第三法的方法適用性，選擇乳蛋白深度水解配方樣品C、氨基酸配方樣品D、乳蛋白部分水解配方樣品E進行加標回收實驗，考察方法的準確性。GB/T 27404—2008《實驗室質量控制規范 食品理化檢測》規定，含量大于100 mg/kg的被測組分，其加標回收率應為95%～105%。

由表5可知：對于乳蛋白深度水解配方樣品C，實驗室2的加標回收率為108%，略高于105%，實驗室4的加標回收率高達125%；對于氨基酸配方樣品D，實驗室1的加標回收率為106%，略高于105%；對于乳蛋白部分水解配方樣品E，實驗室1、2的加標回收率為108%，略高于105%，其他實驗室加標回收率檢測結果均符合GB/T 27404—2008要求。

表5 各實驗室加標回收率測定結果Table 5 Spiked recoveries of silver nitrate titration obtained in different laboratories

2.5 方法間比對

GB 5009.44—2016第一法（電位滴定法）是在酸性（硝酸）環境中用硝酸銀進行滴定，銀離子和氯離子生成白色沉淀，經硝酸酸化后，硝酸銀可排除多種雜質離子的干擾，從而能夠準確測定溶液中的含氯離子。田洪蕓等[9]報道，電位滴定法測定結果準確度好、精密度高，能避免基質干擾，因此，采用電位滴定法來進一步驗證國標方法的適用性。采用電位滴定法重新檢測8 種特殊醫學用途嬰兒配方乳粉樣品中的氯，并進行加標回收實驗。

由表6可知，GB 5009.44—2016第一法檢測結果低于GB 5009.44—2016第三法，乳蛋白深度水解配方樣品C、氨基酸配方樣品D的加標回收率均符合GB/T 27404—2008要求，但乳蛋白部分水解配方樣品E的加標回收率偏低，僅75.6%，不符合GB/T 27404—2008要求。

表6 特殊醫學用途嬰兒配方乳粉中氯含量測定結果（GB 5009.44 —2016第三法和第一法）Table 6 Results of silver nitrate titration and potentiometric titration for chlorine contents in real samples of infant formula for special medical purposes

3 結 論

采用GB 5009.44—2016第三法銀量法（摩爾法或直接滴定法）檢測特殊醫學用途嬰兒配方食品中乳蛋白部分水解配方、乳蛋白深度水解配方、氨基酸配方樣品中氯含量，得到的樣品加標回收率分別為95%～108%、98%～125%、100%～106%，相對標準偏差為12.7%～32.9%。采用GB 5009.44—2016第一法電位滴定法得到的檢測結果低于第三法檢測結果，電位滴定法檢測乳蛋白部分水解配方樣品的回收率較低，后期需進一步對該方法進行驗證。