CD14、HIF-1α、CX3CL1與兒童急性牙髓炎易感性關系及診斷價值

白冰 陳梅梅 黃海燕

急性牙髓炎（Acute pulpitis，AP）具有起病急驟、疼痛劇烈的特點，受乳牙纖維成分較小、血管分支較多、牙髓組織疏松等諸多因素影響，隨病情遷延可引起進食與睡眠質量障礙，影響恒牙胚發育［1-2］。研究認為［3］，炎癥介質蓄積于毛細血管中，導致牙髓組織壞死可能是AP 發生的重要原因。脂多糖信號受體（CD14）是單核細胞活化的標志，亦是一種重要促炎介質［4］；缺氧誘導因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）主要在缺氧條件下表達，可誘發炎癥，反映牙髓損傷程度［5］；趨化因子CX3C 的配體1（Chemokine C-X3-C motif ligand 1，CX3CL1）可能參與外周炎癥及疼痛發生、發展過程中［6］，但三者聯合對兒童AP 的診斷價值臨床缺乏相關循證支持。本研究嘗試探討血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 與兒童AP 易感性關系及診斷價值，旨在為臨床診治提供一種有效途徑。詳情如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取2018年1月至2020年12月本院收治的82 例兒童AP 患者（AP 組）及40 例健康兒童（對照組）。納入標準：①AP 組均符合《口腔內科學》［7］中相關診斷標準，并存在陣發性痛、溫度刺激痛、夜間痛、放散痛等臨床表現；經口腔檢查存在明顯深齲；②對照組無上述典型疼痛癥狀，經口腔檢查未發現明顯深齲；③兩組研究對象監護人均簽署知情同意書。排除標準：①合并嚴重自身免疫系統疾病者；②髓底嚴重損壞者；③牙根吸收超出根長的1/2 者；④嚴重營養不良者；⑤伴有神經系統體征、軀體畸形等者。本實驗經倫理委員會批準。

1.2 方法

①CD14、HIF-1α、CX3CL1 檢測：于入院時空腹取外周靜脈血4 mL，靜置32 min 后2 500 rpm 離心10 min，取上清液，-70℃低溫保存。采用上海江萊生物科技有限公司酶聯免疫吸附法試劑盒測定血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平。②疼痛程度：采用疼痛視覺模擬評分法（visual analogue scale，VAS）［8］進行評估，其中1～4 分為輕度疼痛，5～7 分為中度疼痛，8～10 分為重度疼痛。

1.3 統計學方法

采用統計學軟件SPSS 22.0 處理數據，計量資料以（）描述、兩組間比較用t檢驗；計數資料用n（%）表示、χ2檢驗；采用Logistic 多因素回歸分析兒童AP 易感性的相關影響因素；采用Pearson 相關系數模型分析CD14、HIF-1α、CX3CL1 與VAS 評分相關性；采用受試者工作特征（Receiver operating characteristic curve，ROC）曲線得到曲線下面積（areas under the curve，AUC），檢驗CD14、HIF-1α、CX3CL1 對兒童AP 的診斷價值。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組基線資料、CD14、HIF-1α、CX3CL1 比較

兩組年齡、性別、體質量比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；AP 組CD14、HIF-1α、CX3CL1高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組基本資料比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups［（±s），n（%）］

表1 兩組基本資料比較［（±s），n（%）］Table 1 Comparison of baseline data between 2 groups［（±s），n（%）］

組別AP 組對照組t/χ2值P 值n 女82 40年齡（歲）10.18±1.53 10.35±1.17 1.166 0.246性別男45（54.88）24（60.00）0.287 0.592 37（45.12）16（40.00）CD14（mg/L）4.98±1.55 1.70±0.52 13.007＜0.001 HIF-1α（pg/mL）456.89±103.35 345.17±92.26 5.800＜0.001 CX3CL1（ng/L）52.15±17.18 24.35±7.73 9.748＜0.001

2.2 不同CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平者VAS 評分比較

以AP 組CD14、HIF-1α、CX3CL1 均值為分界，將患者分為CD14、HIF-1α、CX3CL1 高水平與低水平者，結果顯示，CD14、HIF-1α、CX3CL1 高水平者VAS 評分高于低水平者，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平者VAS 評分比較（±s）Table 2 Comparison of VAS scores in patients with different levels of CD14，HIF-1 α and cx3cl1（±s）

表2 不同CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平者VAS 評分比較（±s）Table 2 Comparison of VAS scores in patients with different levels of CD14，HIF-1 α and cx3cl1（±s）

VAS 評分（分）t 值P 值CD14低水平（n=33）6.05±1.81 5.579＜0.001高水平（n=49）7.94±1.26 HIF-1α低水平（n=25）7.13±1.39 3.622 0.001高水平（n=57）8.14±1.05 CX3CL1低水平（n=21）6.56±1.27 6.000＜0.001高水平（n=61）8.32±1.12

2.3 CD14、HIF-1α、CX3CL1 與VAS 評分相關性

采用Pearson 進行相關性分析，結果分顯示，CD14（r=0.769，P＜0.001）、HIF-1α（r=0.684，P＜0.001）、CX3CL1（r=0.709，P＜0.001）與VAS 評分呈正相關。見圖1。

圖1 CD14、HIF-1α、CX3CL1 與VAS 評分相關性Figure 1 CD14，HIF-1 α、Correlation between cx3cl1 and VAS score

2.4 兒童AP 易感性的相關影響因素

以是否發生AP 為因變量（0=無，1=有），納入CD14、HIF-1α、CX3CL1 作為自變量（1=低水平，2=高水平），采用多因素Logistic 回歸方程分析，結果顯示，CD14、HIF-1α、CX3CL1 與兒童AP 的易感性相關（P＜0.05）。見表3。

表3 兒童AP 易感性的Logistic 回歸方程分析Table 3 logistic regression equation analysis of AP susceptibility in children

2.5 CD14、HIF-1α、CX3CL1 的診斷價值

以AP 組為陽性樣本，以對照組為陰性樣本，繪制各指標診斷AP 的ROC 曲線顯示，CD14、HIF-1α、CX3CL1 診斷兒童AP 的AUC 分別為0.860、0.757、0.805（P＜0.05）；應用SPSS 軟件的聯合應用ROC 理論模式，建立各指標聯合診斷的ROC 模型，結果顯示，CD14、HIF-1α、CX3CL1 聯合診斷兒童AP 的AUC 為0.926（P＜0.05）。見表4、圖2。

表4 ROC 分析結果Table 4 ROC analysis results

圖2 CD14、HIF-1α、CX3CL1 的診斷價值Figure 2 CD14，HIF-1 α、Diagnostic value of cx3cl1

3 討論

據報道［9］，細菌感染可能是牙髓病發生、發展的重要因素，而脂多糖是誘發牙髓組織感染的主要細菌毒力因子。CD14 是革蘭陰性菌細胞壁主要致病成分脂多糖的結合受體，具有高親和性，與脂多糖結合可刺激炎癥級聯反應，參與細胞損傷、炎癥因子釋放進程。本研究結果顯示，血清CD14水平在AP 患兒中過度高表達，結合王曉敏等［10］研究考慮機制可能在于CD14 過度表達，可引起脂多糖對牙髓成纖維細胞的直接毒性，促使牙髓成纖維細胞大量釋放腫瘤壞死因子-α、白細胞介素等炎性因子，從而導致AP 發生、發展。HIF-1α 是檢測組織缺氧程度的重要指標，相關研究表明［11-12］，在炎癥反應過程中，可作為重要炎癥因子，在相關基因表達調控中起著重要作用。本研究中AP 患兒血清HIF-1α 水平顯著升高，這可能歸因于牙髓炎癥可增加牙髓內壓力，降低氧代謝，加重牙髓組織低氧情況，促進局部牙髓形成缺氧環境，從而刺激HIF-1α 表達，直接參與調控炎癥微環境，最終形成惡性循環。CX3CL1 是一種CX3CL 趨化因子，主要存在于中樞神經系統小膠質細胞及周圍神經巨噬細胞中，可誘導白細胞黏附，趨化B 細胞、T 細胞等，調控炎癥進程［13］。本研究發現，AP 患兒血清CX3CL1 水平明顯高于健康兒童，這可能是由于CX3CL1 表達升高利用T 細胞、嗜酸性粒細胞及單核細胞上表達受體，可促進肥大細胞活化，刺激白細胞介素等促炎因子釋放，提高炎性介質含量，最終導致牙髓組織受損，引起AP。由此推測下調血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 表達有望成為阻斷兒童AP 發生、發展的潛在靶點。

另有學者指出［14-15］，牙髓內炎癥細胞浸潤、組織液滲出及組織破壞是造成AP 疼痛的主要因素。VAS 評分是目前廣泛應用的評估機體疼痛程度的重要指標。本研究經Pearson 線性相關性分析結果推測血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 有助于評估兒童AP 疼痛程度。進一步經Logistic 多因素回歸分析，血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 升高可能會上調兒童AP 的易感性，再次佐證了血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 在兒童AP 診斷方面具有一定作用。本研究通過繪制聯合ROC 曲線發現，血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 聯合診斷兒童AP 的AUC 值優于上述指標單一診斷，特異度可達97.50%。提示共同檢測血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 有望為臨床兒童AP提供一種新的診斷手段，指導臨床擬定個性化治療方案。

綜上所述，血清CD14、HIF-1α、CX3CL1 水平升高可能增加兒童AP 易感性，并與疼痛程度存在良好的線性關系，聯合檢測上述指標有助于提高兒童AP 診斷價值。但受年齡限制本研究納入樣本量較少，研究結果可能存在一定偏倚，今后需擴大樣本量進一步深入分析。