BRCA1、DACH1及S100A4在子宮內膜癌病情進展及治療預后中的預測價值

潘月 鄭振榮 張開紅 劉雪琴 王敏

在女性生殖系統惡性腫瘤中，子宮內膜癌（Endometrial Cancer，EC）最為常見，臨床治療以手術為主，但對于晚期EC 患者來說，術后5年生存率較差，僅為5%～15%［1］。EC 的確切發病原因尚未完全闡明，但有相關研究報道，EC 的發生可能與內外源性雌激素刺激、體質因素、遺傳因素等因素有關［2］。乳腺癌基因-1（breast cancer susceptibility gene 1，BRCA1）為抑癌基因，在乳腺癌、卵巢癌等惡性腫瘤中發揮負性調節作用［3］。胞命運決定因子（Cell fate determination factor Dachshund，DACH1）是近年來新發現的乳腺癌抑制基因，與乳腺癌患者不良預后有著密切聯系［4］。S100A4 蛋白是鈣離子結合家族成員之一，參與細胞生長、分化、凋亡等多種細胞進程［5］。有學者研究發現，S100A4 在結直腸癌、乳腺癌、胃癌等惡性腫瘤的發生、發展中發揮重要作用［6］。本研究重點分析BRCA1、DACH1 及S100A4 在EC 病情進展及治療預后中的預測價值。現研究報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年3月至2018年9月收治的127 例EC 患者（127 份EC 組織）設為EC 組。納入標準：①符合手術指征，入院后進行經腹廣泛或次廣泛性全子宮切除+雙附件切除＋盆腔淋巴結清掃；②均經病理檢查確診為EC［7］；③治療配合度佳，隨訪資料完整。排除標準：①精神障礙者、因語言障礙無法配合的作者；②合并其他婦科惡性腫瘤、其他系統惡性腫瘤者；③復發的EC 患者；④術前接受過放化療治療及激素治療者。平均年齡（53.41±5.19）歲；根據國際婦產科聯盟（International Federation of Gynaecology and Obstetrics，FIGO）分期［8］：Ⅰ～Ⅱ期69 例，Ⅲ～Ⅳ期58 例。選取同期于本院進行手術治療的133 例子宮內膜非典型增生患者（133 份子宮內膜不典型增生標本）設為對照組，平均年齡（53.25±5.07）歲。2 組患者基線資料比較差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經醫院醫學倫理委員會批準通過，受試者或家屬均簽署知情同意書。

1.2 方法

采用S-P 免疫組化染色。將EC 組、對照組標本經常規石蠟切片、脫水。BRCA1、DACH1 及S100A4 兔多克隆抗體均采購自美國Epitomics 公司。免疫組化染色結果判定［8］：結合陽性細胞百分比和染色強度判定對結果進行判定。陽性細胞百分比為0 計0 分，≤10%計1 分，＞10%～25%計2分，＞25%～50%計3 分，＞50%計4 分；細胞質無染色計0 分，淡黃色計1 分，棕黃色計2 分，棕褐色計3 分；兩項評分之和≤2 分為陰性，≥3 分為陽性。

1.3 隨訪

自127 例EC 患者出院后開始隨訪，隨訪方式以電話隨訪、患者自行來院復查為主，上門隨訪為輔。術后1年內隨訪12 次，隨訪截止時間為2019年9月，平均隨訪時長（10.12±1.15）月。如患者死亡，終止隨訪。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0 軟件進行統計分析，計量資料采用（）表示，采用t檢驗；計數資料采用n（%）表示，采用χ2檢驗；繪制ROC 曲線，計算曲線下面積（AUC），以分析不同BRCA1、DACH1 及S100A4 表達對EC預后的預測價值；以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同組織中BRCA1、DACH1 及S100A4 表達情況

EC 組BRCA1、DACH1 陰性率以及S100A4 陽性率顯著高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1、圖1。

圖1 BRCA1、DACH1 及S100A4 在EC 組織及子宮內膜非典型增生中的免疫組化染色圖（SP，× 500）Figure 1 immunohistochemical staining of BRCA1，Dach1 and S100A4 in EC and endometrial atypical hyperplasia（SP，× 500）

表1 不同組織中BRCA1、DACH1 及S100A4 表達情況［n（%）］Table 1 expression of BRCA1，Dach1 and S100A4 in different tissues［n（%）］

2.2 BRCA1、DACH1 及S100A4 與EC 患者病理特征的關系

組織學分級為G1、FIGO 分期為Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴結轉移的EC 患者BRCA1、DACH1 陰性率、S100A4 陽性率更高（P＜0.05）。不同年齡、組織類型、肌層浸潤深度、病理類型的EC 患者BRCA1、DACH1、S100A4 陽性表達率及陰性表達率比較差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

表2 BRCA1、DACH1 及S100A4 與EC 患者病理特征的關系［n（%）］Table 2 Relationship between BRCA1，Dach1，S100A4 and pathological features of EC patients［n（%）］

2.3 BRCA1、DACH1 及S100A4 不同表達的患者預后情況

隨訪結果顯示：127 例EC 患者術后1年生存率為82.67%（105/127）。BRCA1 及DACH1 陰性表達、S100A4 陽性表達死亡率顯著高于BRCA1 及DACH1 陽性表達、S100A4 陰性表達死亡率，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 BRCA1、DACH1 及S100A4 不同表達的患者預后情況［n（%）］Table 3 prognosis of patients with different expression of BRCA1，Dach1 and S100A4［n（%）］

2.4 BRCA1、DACH1 及S100A4 聯合檢測對EC患者預后的預測價

聯合BRCA1、DACH1、S100A4 檢測靈敏度、特異度、AUC 分別為89.65%、90.73%、0.962，各指標檢測靈敏度、特異度、AUC 以三者聯合檢測最大（P＜0.05）。見表4。

表4 BRCA1、DACH1 及S100A4 聯合檢測對EC 患者預后的預測價值Table 4 the predictive value of combined detection of BRCA1，Dach1 and S100A4 in the prognosis of EC patients

3 討論

EC 是女性生殖系統最常見的惡性腫瘤之一，大多數早期EC 患者在經過手術治療后預后較好，但晚期EC 患者因存在淋巴結轉移后較差，術后復發率較高［9］。EC 的病因曾引起廣泛深入的探索，但尚難得到肯定的結論。隨著分子生物學的進展，有學者發現EC 的發生可能與癌基因、抑癌基因等異常表達有關［10］。

本研究中，EC 組BRCA1、DACH1 陰性率以及S100A4 陽性率顯著高于對照組，與既往研究結果相符［11］。BRCA1 于1990年首次被發現后，廣大學者立即對BRCA1 進行研究，發現BRCA1 的結構、功能、突變與卵巢癌、乳腺癌等聯系密切［12］。以往文獻分析了DACH1 與乳腺組織、前列腺組織等多種惡性腫瘤的關系，發現DACH1 與多種腫瘤相關信號傳導途徑耦聯，并對腫瘤細胞生長、分化發揮重要作用［13］，但DACH1 與EC 病情進展的關系尚不清楚。S100A4 蛋白被稱為鈣離子結合蛋白，主要存在于細胞內，能通過與靶蛋白相結合發揮相應的生物學效應［14］。既往研究發現，S100A4 在多種腫瘤組織中均存在高表達，包括膀胱癌、胰腺癌等，并可作為有價值的腫瘤預后標志物［15］。

國外學者發現，BRCA1 作為基因組的看護者，可通過多種途徑發揮抑制腫瘤生長、增殖、轉移，并可修復DNA 雙鏈斷裂，調節細胞周期，參與基因轉錄活化及抑制等，具有多種生物功能［16］。劉建捷等［17］報道，S100A4 可通過與細胞凋亡、增殖相關蛋白相互作用，調控細胞存活、凋亡、增殖、遷移等功能。本研究結果進一步證實BRCA1、DACH1、S100A4 對腫瘤細胞異常增殖、惡性轉化的過程發揮重要作用，三者可作為評估EC 病情進展的主要生化指標。

隨訪結果表明，BRCA1、DACH1、S100A4 在EC 的發生、發展、浸潤轉移及預后中發揮著重要的作用，三者均可作為評估EC 侵襲轉移能力、評估預后的重要生物學指標。通過比較單一指標及聯合三項指標檢測，表明聯合三項指標檢測可評估提高評估EC 患者病情的準確性，可有效預測EC 患者預后情況。

綜上所述，BRCA1、DACH1 及S100A4 與EC發生、發展、預后關系密切，臨床可通過聯合三項指標檢測評估EC 患者病情，預測預后。