3種交叉配血方法在輸血檢驗中的應用評價

吳文雁

（福建省人民醫院，福建 福州 350004）

輸血是現代醫療的一種重要方法，它能夠輔助治療疾病，并且在關鍵的時候能夠拯救患者生命。同時輸血又是一把雙刃劍，它在帶來諸多益處的同時也可能帶來風險，如它有可能傳播病毒，引起傳染病以及免疫性疾病。在血液輸入患者體內之前，必須經過嚴格的交叉配血試驗，確保受血者與供血者之間血液相合，最大程度地保障用血安全，否則在輸血的過程中極有可能出現不良反應，加重患者的負擔，嚴重時可能對患者的生命安全造成威脅。輸血前必須經過嚴格的交叉配血檢測，否則在輸血的過程中極有可能出現不良反應，加重患者的負擔。交叉配血的方法有多種，包括凝聚胺法、微柱凝膠法、鹽水法、木瓜酶法及抗人球蛋白法等。鹽水法是傳統的交叉配血方法，它能夠準確檢測出IgM類不規則抗體，卻難以檢測出IgG類不規則抗體，安全性較低[1]。隨著臨床輸血技術的進步，更多方法被用于臨床，凝聚胺法和微柱凝膠法都受到了青睞。本文將對凝聚胺法、微柱凝膠法和鹽水法交叉配血的靈敏度、準確度和穩定性進行分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年11月至2020年7月在我院輸血的165例患者作為主要研究對象，男79例，女86例；年齡16～93歲，平均年齡為（55.35±10.55）歲；包括40例血液病科患者、32例肛腸科患者、25例婦產科患者、21例骨科患者、18例普外科患者、13例脾胃病科患者、10例腎病科患者以及6例心血管科患者。

1.2 儀器與試劑 珠海貝索生物技術有限公司生產的凝聚胺介質試劑及BASO2005-1型號的血型離心機；伯樂生命醫學產品（上海）有限公司生產的低離子抗人球蛋白卡、ID-Centrifuge型號的卡片離心機及ID-Incubator 37 S I型號的保溫箱；金壇醫療生產XK-10型號的數顯三用恒溫水箱。

1.3 方法

1.3.1 凝聚胺法 抽取患者靜脈血3 mL于EDTA-K2管中，以3 000 r/min的速度離心3 min。取試管二支，標明主次側，主側管加患者血漿100 μL及供血者3%～5%紅細胞懸液50 μL。次側管加獻血者血漿100 μL及患者3%～5%紅細胞懸液50 μL。主次側管各加低離子溶液0.65 mL，混合均勻后，再各加凝聚胺溶液2滴，混合均勻。用離心機3 400 r/min離心10 s，棄去上清液，管底留約0.1 mL液體。輕輕搖動試管，觀察紅細胞有無凝集，如無凝集，則必須重做。最后加入懸浮液2滴，輕搖試管并觀察結果。如60 s內凝集散開，代表是由凝聚胺引起的特異性聚集，配血結果相合；如凝集不散開，則為紅細胞抗原抗體結合的特異性反應，配血結果不相合。為避免漏檢微小凝集，所有結果均倒在玻片上用顯微鏡觀察。

1.3.2 微柱凝膠法 抽取患者靜脈血3 mL于EDTA-K2管中，以3 000 r/min的速度離心3 min。卡片上注明主次側，主側加受血者血漿50 μL及獻血者1%的紅細胞懸液50 μL，次側加獻血者血漿50 μL及受血者1%紅細胞懸液50 μL。37 ℃孵育15 min，隨后在專用離心機上離心10 min后觀察結果。若微柱中的紅細胞與血漿發生了特異性抗原抗體反應，則紅細胞產生凝集，離心后凝集的紅細胞將不能夠通過凝膠下沉到底部，表明配血結果不相合；反之，若離心后微柱中的紅細胞下沉到了凝膠底部，則說明未發生抗原抗體反應，交叉配血結果相合。

1.3.3 鹽水法 抽取患者靜脈血3 mL于EDTA-K2管中，以3 000 r/min的速度離心3 min，取兩根試管標明主次側，主側加患者血漿100 μL及供血者3%～5%紅細胞懸液50 μL。次側加獻血者血漿100 μL及患者3%～5%紅細胞懸液50 μL。以1 000 r/min的速度離心1 min，離心后觀察試管中的上清液體，看是否存在溶血的情況，隨后傾斜試管輕彈試管底部，確認管底反應物是否存在凝集的狀況。未出現溶血或凝集的狀況，表明配血結果相合。若出現溶血或凝集的狀況，則表明配血結果不相合。

1.4 觀察指標 分別對3種檢測方法的靈敏度、準確度和穩定性進行比較。

1.5 統計學方法 采用SPSS22.0統計學軟件對此次研究數據進行分析，使用χ2檢驗計數資料（%），若檢驗結果為P＜0.05，則差異具有統計學意義。

2 結果

低離子凝聚胺法及微柱凝膠法的靈敏度、準確度和穩定性均高于鹽水法，差異具有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 3種交叉配血試驗的靈敏度、準確度、穩定性結果比較[n（%）]

3 討論

合理用血能夠幫助各種疾病導致重度貧血的患者改善自身病情，提高生存質量。但輸血也有風險，機體的免疫系統可能對抗原細胞造成一定的損傷，造成溶血等輸血不良反應，嚴重者可危及生命[2]。醫院輸血科作為把控臨床用血質量的重要部門，必須十分嚴格地執行輸血前相容性檢測，交叉配血作為關鍵步驟有著十分重要的作用。交叉配血的方法多樣，了解常用方法的特點，根據臨床需要選擇合適的配血方法十分重要。鹽水法操作簡單，對設備的要求低，成本低廉，但該方法對IgG抗體的檢測能力不佳，靈敏度欠佳，容易導致患者出現輸血不良反應，威脅患者健康[3]。隨著輸血技術的發展以及臨床對輸血安全意識的提高，凝聚胺法與微柱凝膠法應用越來越廣泛，相比于鹽水法，它們更能夠保障輸血檢驗的可靠性[4]。凝聚胺法的原理為：凝聚胺是一種高價離子季胺鹽多聚物，經溶解后可出現大量的正電荷，能夠有效中和紅細胞表面的唾液酸所帶有的負電荷，形成非特異性凝集，在低離子的作用下，紅細胞Zeta電位降低，有利于增加抗原抗體間的引力，促進特異性凝集。凝聚胺法能夠提高IgG抗體的檢出率，其檢測準確性較高，且該方法還能在檢測后快速得出結果，非常適合運用在急診搶救用血中[5-6]。但凝聚胺法由手工操作，需要嚴格按比例加樣，其結果容易受到人為操作因素的影響，還容易受到溫度、藥物、抗凝劑等影響，漏檢一些抗體效價低的不完全抗體。而鹽水法雖然漏檢率高，但在檢測ABO弱抗原抗體反應能力方面靈敏度相對高，同時它還能夠發現凝聚胺法的假陰性[7]，所以鹽水法在某些情況下有其應用價值，在適當情況下，聯合運用鹽水法進行交配配血，能夠提升用血安全性。微柱凝膠法在檢測過程中不易受到人為因素的干擾，其結果與標準化要求更符合。微柱凝膠在微柱中進行抗原抗體反應，每個微柱內都有預先裝入的抗人球蛋白和凝膠，凝膠的實質是無數個微玻璃珠，玻璃珠的間隙被設定為只允許單個紅細胞通過，若微柱內發生抗原抗體反應導致紅細胞凝集，離心后凝集的紅細胞將不能通過凝膠沉到微柱底部。相比于凝聚胺法，用微柱凝膠法做交叉配血不僅有更高的靈敏度，而且輸血后發生溶血或者非溶血性的不良反應較少[8]，在時間充裕的情況下，選用微柱凝膠法做交叉配血可以更大程度地保障用血安全。但微柱凝膠法也有缺點，血液中纖維蛋白的析出對它影響較大，紅細胞濃度過高、血液抗凝或離心不充分、細胞受到污染或凝塊等都容易造成假陽性[9]。同時，微柱凝膠法在檢測致敏紅細胞與Ig-抗-AB的過程中檢出能力不足[10-11]。

本文研究結果顯示，凝聚胺法與微柱凝膠法的靈敏度、準確度和穩定性均明顯高于鹽水法，差異具有統計學意義（P＜0.05）。總體而言，3種交配配血方法各有優缺點，在選用其中一種方法進行交叉配血時，要充分了解該方法的適宜性和不足之處，根據臨床實際情況靈活選用合適的方法，可以提高交叉配血效率并保證臨床用血安全。必要的時候，同時進行鹽水法、凝聚胺法及微柱凝膠法可以最大程度地檢出抗原抗體反應，保障臨床輸血的安全性。