上皮性卵巢癌中FAT4、YAP1表達及臨床意義

劉彪

山東省單縣中心醫院婦產科，山東單縣274300

上皮性卵巢癌的發病率和病死率均明顯的上升，流行病學研究表明[1]，上皮性卵巢癌的發病率可達（495～694）/1萬人左右。臨床上上皮性卵巢癌的發生，能夠導致患者5年生存率和無瘤生存時間的縮短，導致患者短期內生存預后的惡化[2]。生物學實驗研究顯示，上皮性卵巢癌的增殖、凋亡過程與生物因子改變有關，生物因子通過調節腫瘤相關信號通路，促進卵巢癌的病情進展和阻斷。果蠅ft同源基因（FAT4）是重要的腫瘤瘤的發展，提高癌細胞的mRNA轉錄水平，進而持續性促進上皮性惡性腫瘤的擴增和轉錄過程，促使腫瘤細胞增殖，提高癌細胞的異變和遠端轉移的風險[3-4]。該文選取2018年2月—2020年2月該院保存的卵巢癌組織標本92例，探討了FAT4、YAP1的表達與上皮性卵巢癌發展的臨床相關性及內部機制，為臨床上皮性卵巢癌治療提供參考和提示，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以該院檢驗科室保存的卵巢癌組織標本為研究對象，總樣本數為92例，將其納入觀察組，年齡26～65歲，平均年齡（50.15±9.81）歲。納入標準：①均經病理學確診；②術前未行放化療等抗腫瘤治療；③醫院倫理會同意，且與家屬簽訂知情同意書。排除標準：①合并有其他惡性腫瘤者；②臨床資料不完整。同時選取卵巢良性腫瘤標本90例作為對照組，年齡28～68歲，平均年齡（50.10±10.24）歲。兩組瘤患者年齡比較差異無統計學意義（t=-1.312，P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

將樣本進行石蠟固定，脫水切片，然后脫蠟并在20℃環境下的H2O2中孵育10 min，用緩沖液（磷酸鹽）沖洗3次。每日用封閉液（8%蛋白粉）進行封閉2 h，然后進行抗原拮抗（兔來源濃度1:1 000～1 500）；拮抗后用用緩沖液（磷酸鹽）沖洗3次，并在4℃冰箱靜待12 h；取出樣品，并進行二次抗原拮抗（鼠來源1:400～500），然后在20℃環境下孵育20～30 min，用緩沖液（磷酸鹽）沖洗3次；然后，進行標記物標記（辣根酶或堿性磷酸酶），室溫孵育在20℃環境下孵育10 min，用緩沖液（磷酸鹽）沖洗3次，最后加入著色劑，并進行二次復染，脫水和封片。

1.3 處理結果判斷標準

FAT4、YAP1陽性表達主要定位于胞質，呈黃色顆粒狀物質，每張切片取出>10個視野（隨機且無重復），每個目鏡下統計>100個腫瘤細胞，①著色效果評分：陽性細胞比例＜10%為0分，10%～25%為1分，＞25%～75%為2分，＞75%為3分；②染色強度評分：無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩項評分之和，≤3分為陰性表達，≥3分為陽性表達。

1.4 觀察指標

觀察兩組的FAT4、YAP1陽性率、年齡、腫瘤直徑、FIGO分期、病理分級、病理類型和淋巴結轉移，以及FAT4與YAP1相關性。

1.5 統計方法

利用SPSS 21.0統計學軟件進行數據分析，計數資料以[n(%)]表示，組間比較采用χ2檢驗。采用Spearman相關系數進行相關分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組FAT4、YAP1表達比較

觀察組的FAT4和YAP1蛋白陽性率高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。卵巢癌與卵巢良性腫瘤的免疫組化見圖1。

圖1 卵巢癌與卵巢良性腫瘤的免疫組化組Figure 1 Immunohistochemistry of ovarian cancer and benign ovarian tumors

表1 兩組FAT4、YAP1表達比較[n(%)]Table 1 Comparison of FAT4 and YAP1 expression between the two groups[n(%)]

2.2 FAT4陽性率與卵巢癌臨床資料關系

病理分級為低分化的患者中，FAT4蛋白陽性率與高分化+中分化組患者對比差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 FAT4陽性率與卵巢癌臨床資料關系[n(%)]Table 2 Relationship between the positive rate of FAT4 and the clinical data of ovarian cancer[n(%)]

2.3 YAP1陽性率與卵巢癌臨床資料關系

低分化、漿液類型的患者中，YAP1蛋白陽性率與高分化+中分化、黏液類型的患者對比差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 YAP1陽性率與卵巢癌臨床資料關系[n(%)]Table 3 Relationship between the positive rate of YAP1 and the clinical data of ovarian cancer[n(%)]

2.4 FAT4與YAP1表達率的相關性分析

將卵巢癌患者FAT4與YAP1表達進行相關分析，結果顯示：FAT4與YAP1表達呈正相關（rs=0.479，P<0.05），見表4。

表4 FAT4和YAP1表達率的相關性分析Table 4 Correlation analysis of expression rate of FAT4 and YAP1

3 討論

上皮性卵巢癌的病情進展率較高，短期內可合并有明顯的遠處轉移或者盆腔腹腔轉移，長期的臨床隨訪觀察研究發現，上皮性卵巢癌的3年生存率不足40%，綜合性治療措施治療后，上皮性卵巢癌患者的無瘤生存時間不足18個月[5-6]。現階段臨床上缺乏上皮性卵巢癌可靠性分子標志物，雖然癌胚抗原或者糖鏈抗原125能夠在上皮性卵巢癌的診療過程中發揮重要的參考作用，但一項囊括了204例樣本量的上皮性卵巢癌分子生物學相關研究證實，依靠癌胚抗原或者糖鏈抗原評估卵巢癌發生風險或者臨床預后靈敏度仍然較低，其對于卵巢癌的標志性作用仍然不足。而該次研究中觀察組的FAT4和YAP1蛋白陽性表達率分別為73.91%和76.09%，明顯高于對照組（P<0.05）,胡紫薇等[7]認卵巢癌組中FAT4的陽性表達率為（72.23±1.22）%，大于70%,YAP1蛋白陽性表達率為（76.82±0.32）%，大于75%，且YAP1蛋白陽性表達率大于FAT4的陽性表達率，與該文研究保持一致，也提示上皮性卵巢中的FAT4、YAP1可以作為臨床上卵巢癌診療提供理論方面的參考。國內研究認為FAT4是果蠅ft基因家族成員，其能夠通過對于癌細胞內轉錄調控因子的磷酸化修飾作用，提高核轉錄基因的激活程度，促進癌細胞的變形能力、浸潤能力等能力的改變。FAT4使癌變細胞周圍組織出現mRNA轉錄異常，促進癌細胞對附近正常組織的浸潤，實現癌細胞的轉移[8]；YAP1是yes相關蛋白，其作為HIPPO信號通路上重要的效應分子，能夠通過誘導下游腫瘤相關蛋白的上調，促進癌細胞細胞周期的調控紊亂，抑制癌細胞的凋亡[9]。基礎方面的研究也認為，YAP1的表達上升能夠促進癌細胞內下游cycclin D1的表達，進而抑制癌細胞的分化，導致癌細胞異型性的顯著改變[10]，上述分析進一步驗證該文研究結果。

國內外研究資料顯示[11-13]：FAT4、YAP1參與上皮性卵巢癌的發展：①FAT4的上升能夠促進癌細胞基因錯配修復能力的下降，導致癌基因的激活程度的上升，影響到了癌細胞的正常分化成熟過程；②YAP1陽性率的升高，可以活化HIPPO下游信號通路，增強周圍正常組織的mRNA的異化程度，持續性促進卵巢上皮細胞的增殖。羅曉等研究者[14]也認為，卵巢癌病變組織中，YAP1蛋白的陽性率高于正常組織30%以上，良性病變組織20%以上。部分出現遠端轉移的合并有盆、腹腔癌的患者，遠端病變組織中YAP1蛋白的陽性率是原發病變組織中陽性率的20%，進一步說明YAP1蛋白的陽性率與上皮性卵巢癌的增殖、凋亡和轉移有關。該文的免疫組化染色分析結果顯示：病變組織中FAT4、YAP1蛋白集中于間質，或者細胞膜，提示FAT4、YAP1參與細胞間或者癌細胞內信號的傳遞，進而影響到卵巢癌的病情進展過程。在探討FAT4、YAP1的表達與卵巢癌臨床病理特征的關系過程中，可以發現在臨床病理分級較差的患者中，FAT4蛋白的表達明顯上升，胡紫薇等[7]認為FAT4蛋白的表達明與病理分級存在正相關性，與該文相關研究結果一致。同時，該文研究結果也提示了FAT4的表達與卵巢癌患者臨床病理特征的關系，提示FAT4蛋白陽性率參與周圍組織，或者癌變組織mRNA的轉錄異化，促進周圍細胞的癌變，或者加劇癌細胞病理分級的進展程度，相關研究認為[15-17]，FAT4參與卵巢癌組織的mRNA轉錄，促進細胞癌變和分級，與該文研究結果一致；而病理分級為低分化、漿液性癌患者YAP1蛋白陽性表達率明顯的上升，提示了YAP1蛋白的表達與卵巢癌患者病情的關系，提示YAP1蛋白陽性率上述，加速癌細胞的分化，促使其增殖、惡化，甚至遠端轉移，相關研究結果顯示[18-21]，YAP1在卵巢癌分化、轉移過程中，呈現陽性表達，與遠端轉移相關，與該文研究結果一致。卵巢癌組織FAT4與YAP1表達呈正相關（rs=0.479，P<0.05）可 見，FAT4與YAP1表 達 呈 正 相 關，提 示 了FAT4、YAP1在促進卵巢癌病情進展的過程中可能發揮了一定的協同作用，相關研究結果顯示[22-24]，FAT4、YAP1與卵巢癌的嚴重程度存在正相關性，并參與卵巢癌病情的發展，與該文相關研究結果一致。

綜上所述，上皮性卵巢癌中FAT4、YAP1表達明顯升高，與患者臨床病理特征有一定關聯，值得進一步研究。該次研究的局限性在于未能探討FAT4、YAP1的表達與卵巢癌的生存預后的關系。