不同保護劑對大鼠腎臟凍融法脫細胞的影響

羅嗣昌，胥義

上海理工大學生物系統熱科學研究所，上海200093

前言

器官移植已成為治療器官疾病末期最有效的方法之一，每年都能拯救無數的患者。但當前供體器官不足的共性問題導致許多患者在等待供體過程中死亡［1］。另外，異體移植也可能因免疫系統的反應，致使移植患者需要長期服用免疫抑制劑［2］。隨著組織工程和再生醫學的發展，利用干細胞與器官支架再生器官可能能夠成為器官移植的來源［3‐4］。Meezan等［5］首先提出去污劑脫細胞的方法，并證實脫細胞后的細胞外基質能保留超微結構的不溶性成分。Ott等［6］通過在脫細胞大鼠腎臟接種干細胞構建具有一定功能的腎臟，讓再生腎臟作為供體器官成為可能。脫細胞支架已將細胞及DNA 等物質洗脫干凈，再生器官后能夠避免腎臟移植所引發的免疫抗原反應［7‐9］。

常用的脫細胞方法有洗脫劑洗脫法［10］、酶處理法［11］、凍融法［12］等。離子型洗脫劑SDS對細胞的洗脫效果較好，但同時會將腎臟內的許多其他物質一起洗脫，造成細胞外基質各成分的損失［13］；非離子型洗脫劑Triton‐100對細胞外基質的損傷較小，但細胞的洗脫效果不佳，很難將腎臟內部的細胞成分完全洗脫干凈［14］。酶解法利用生物酶進行洗脫工藝處理，但研究表明，盡管酶解法能夠特異性去除細胞中DNA等成分，其單獨洗脫效果不好［15］。凍融法脫細胞利用凍融過程溶解細胞，再通過洗脫劑進行細胞的洗脫。凍融法能更有效地溶解組織和器官內的細胞，凍融過程不會顯著增加組織中細胞外基質蛋白的損失［12］。……