血p-Tau181、Aβ1-42與老年阿爾茨海默病病人認知關系的研究

尹倩然 郝敬波 盧海龍 呂麗麗 周曉兵 楊榮禮

作者單位：221000 江蘇省徐州市，徐州醫科大學附屬醫院老年科

AD是老年人癡呆的主要種類。癡呆的治療目前尚無特效藥物，早發現、早干預從而減慢癡呆進程具有重要臨床意義。研究表明，AD病人腦脊液中磷酸化Tau181(p-Tau181)；β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)水平明顯高于正常病人，且上述2項指標的水平可以用來區分AD和其他形式的癡呆[1-2]。但是，腦脊液檢查是一種有創檢查，大多數病人不愿意配合。本研究旨在分析血漿中p-Tau181、Aβ1-42濃度和AD病人認知之間的關系，供臨床參考，報道如下。

1 資料與方法

1.1 病例資料 選取2019年1月至2020年1月在徐州醫科大學附屬醫院神經內科和老年科住院的≥60歲老年病人123例，分為3組。無AD且無輕度認知功能障礙(MCI)的病人(對照組)33例，男20例，女13例，平均年齡(72.27±6.80)歲；AD組45例，男30例，女15例，平均年齡(74.51±9.82)歲；MCI組45例，男31例，女14例，平均年齡(71.17±10.89)歲。3組病人性別、年齡、教育程度等一般資料比較差異無統計學意義 (P>0．05)。見表1。本研究已通過醫院倫理委員會審查。

1.2 納入標準 (1)所有病人年齡均>60歲。(2)AD組符合美國國立神經語言障礙卒中研究所和AD及相關疾病學會 (NINCDS-ADRDA)制定的AD診斷標準。均已完善頭顱CT或MRI及神經影像學檢查。(3)MCI病人：根據2006年歐洲阿爾茨海默病協會制定的MCI定義，結合MMSE量表，且病人Hachinski缺血評分<4分。(4)正常組均無神經精神疾病病史，無癡呆及中樞神經系統疾病表現，常規實驗室檢查均處于正常范圍，并經MMSE量表和臨床癡呆評定量表(CDR)證實。

1.3 排除標準 (1)嚴重的心肺疾病；(2)惡性腫瘤；(3)腦血管病、帕金森病、正常顱壓腦積水、腦瘤、脫髓鞘疾病、精神疾病等、糖尿病控制不良(HbA1c>8.0)、心肌梗死(過去6個月內);(4)老年抑郁量表(GDS-S)>9分或改良Rankin量表(GRS)>3分。

1.4 方法

1.4.1 試驗方法：所有分組病人進行MMSE量表及CDR量表評估。所有病人采用有惰性分離膠或促凝劑的黃蓋采血管采集血液，抽血后放置15 min使之凝固，再離心分離血清，4 ℃保持待測。采用全自動酶標儀(帝肯奧地利有限責任公司)，ELISA法測定p-Tau181、Aβ1-42的含量，試劑盒由深圳市安群生物工程有限公司提供。以校準品濃度取對數作橫坐標，OD值取對數作縱坐標，進行直線擬合，繪制標準曲線。通過待測樣本的 OD值在標準曲線上查出其對應濃度值。

1.4.2 觀察指標：記錄3組病人的MMSE和CDR評分，并檢測3組病人血漿p-Tau181、Aβ1-42水平。

2 結果

2.1 各組觀察指標比較 MCI組和AD組CDR評分明顯高于對照組，MMSE評分顯著低于對照組，差異均有統計學意義(P<0.05)。AD組及MCI組血漿p-Tau181和Aβ1-42水平明顯高于對照組，且AD 組上述指標水平高于MCI組，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組一般資料及檢測結果比較

2.2 血漿生物標記物濃度與MMSE評分之間的關系 血漿p-Tau181和Aβ1-42與MMSE評分之間均呈顯著負相關(r=-0.898，-0.523，P均<0.01)。

3 討論

我國作為人口大國，老年人在我國人口占比中越來越大，作為發病率較高的老年癡呆，給社會和家庭都帶來了經濟和照顧的壓力。很多老年癡呆患者發病過程比較隱匿，癥狀不典型，診斷比較困難。發現把癡呆血漿生物標志物檢測作為老年癡呆的篩查手段具有重要意義。

我們研究發現血漿Aβ1-42水平與老年病人認知障礙的嚴重程度呈顯著負相關。本研究結果表明，血漿水平Aβ1-42能有助于確定認知損害的嚴重程度。大腦中的淀粉樣斑塊是AD的病理特征之一，血漿中的Aβ1-42水平可用于評估大腦中淀粉樣斑塊的形成[3-4]。PET顯示，血漿Aβ1-42水平與額葉、頂葉、顳葉和丘腦前葉的淀粉樣斑塊面積中度相關[5]。Aβ的高積累會增加大腦的毒性，并可能導致嚴重的認知障礙或下降[6]。有部分研究者發現AD組MMSE評分與總Aβ水平之間的相關性[7]，還有一些研究已經通過IMR檢測方法對MCI及AD病人的血漿生物標記物進行了探索，并得出結論：血漿Aβ1-42是一種有用的AD生物標記物[8]，這些發現與我們的發現相同。但是有部分研究發現，Aβ1-42只是與AD有一定負相關趨勢，不是有用的AD生物學標記物[9]，可能是使用不同的生物分析方法試劑，或者是不同Aβ聚集或Aβ與其他蛋白質結合的分析能力，導致了研究結果之間的差異。

在本研究中，老年AD病人血漿p-Tau181水平較正常病人升高，并且與MMSE評分呈現顯著負相關。Tau蛋白纏結在大腦中的積聚是AD另外一個病理特征，t-Tau主要起穩定軸突微管的作用。在AD病人中，Tau蛋白在腦中大量表達，導致腦脊液和血漿中t-Tau濃度的變化。這種變化通常伴隨著神經損傷和疾病后期的腦萎縮[10]。研究表明，灰質、海馬和杏仁核體積的減少有助于t-Tau血漿水平的升高。腦萎縮與認知功能障礙有關，因此血漿t-Tau濃度隨著認知能力下降的進展而增加。生物學上，Tau蛋白的高磷酸化可直接導致AD病人的神經元或軸突死亡，因此，p-Tau也被認為是AD早期檢測的潛在生物標記物[11]。研究表明AD病人腦脊液中p-Tau水平明顯高于正常病人。腦脊液中p-Tau的水平也可以用來區分AD和其他形式的癡呆[1-2]。測定腦脊液中p-Tau水平可提高AD診斷的敏感性和特異性，提高診斷的準確性。此外，最近的發展促進了對血液樣本中p-Tau水平的評估，表明血漿p-Tau水平可用于監測AD病人的神經變性。事實上，一項研究指出，p-Tau181水平可用于早期AD病人疾病嚴重程度的分類[11]。

我們的結果支持這樣的觀點：血漿中的生物標記物水平p-Tau181和Aβ1-42蛋白的組合可用于區分AD的前驅期和癡呆期，血漿p-Tau181、Aβ1-42水平可用于分析早期AD病人的嚴重程度。

總之，MCI和AD病人的血漿p-Tau181、Aβ1-42與MMSE評分相關。血漿p-Tau181、Aβ1-42水平可用于評估老年MCI及AD病人認知障礙的嚴重程度及其變化。本研究局限于有認知測試結果的臨床病人，我們沒有獲得腦脊液樣本或淀粉樣蛋白或Tau-PET掃描，以研究認知變化與其他生物標記物(如腦脊液標記物和成像)之間的相關性，下一步加強這方面研究。