過敏性紫癜患兒呼吸道病毒感染特異性免疫球蛋白M檢測及血清炎性因子變化

劉力銘，張 穎，趙子年，楊金玉，焦麗華，劉建麗, 回廣飛

唐山市婦幼保健院1.兒科；2.血液科，河北 唐山 063000；3.灤州市衛生職業中等專業學校 教務處兒科教研室，河北 灤州 063700；4.北部戰區總醫院 藥學部，遼寧 沈陽 110016

過敏性紫癜(henoch schonlein purpura，HSP)是以過敏性血管炎性為主要病變的自身免疫性疾病，主要侵犯皮膚、黏膜和毛細血管等[1-2]。HSP發病機制至今尚不清楚。有研究報道，HSP被認為是由細菌、病毒或原生動物感染后形成的免疫復合物引起的，大約50%的HSP患者已感染上呼吸道感染，并已報告HSP與鏈球菌、腺病毒、細小病毒和支原體有關[3]。呼吸道病毒感染人體后1～2周內，免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)M急劇升高，2～3周達到高峰特異性，為臨床早期確診提供可靠依據[4]。王娟等[5]發現，腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)在HSP患兒急性期血清中的水平顯著上升，并可能引起血管炎。本研究旨在探討HSP患兒呼吸道病毒感染特異性IgM檢測及血清炎性因子水平的變化?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2015年1月至2018年8月于唐山市婦幼保健院住院治療的360例HSP患兒為研究對象。其中，男性210例，女性150例；年齡3～14歲，平均年齡(8.61±3.75)歲。納入標準：符合《諸福棠實用兒科學》關于HSP的診斷標準[6]；近2周內未服用抗過敏藥物；未患有其他合并影響結果的疾病。排除標準：有未知過敏原過敏病史；有嚴重基礎疾病(呼吸、神經、心腦血管等疾病)；存在IgA腎病、腎小球等原發或繼發性腎疾病。另選取同期于本院體檢的360例健康兒童作為健康組，其中，男性218例，女性142例；年齡2～15歲，平均年齡(8.09±4.26)歲。兩組研究對象的一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。所有患兒家屬均簽署知情同意書。

1.2 主要試劑及儀器 9項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒，鄭州安圖生物工程股份有限公司；白細胞介素-2(interleukin-2，IL-2)酶聯免疫吸附試驗(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)試劑盒(YM-QP10157)、白細胞介素-10(interleukin-10，IL-10)ELISA試劑盒(YM-QP10156)，上海遠慕生物科技有限公司；Hyperion MicroReader Ⅲ型酶標儀，美國Hyperion公司；BN 100特種免疫球蛋白檢測儀，德靈公司；萊卡DM500熒光顯微鏡，德國萊卡有限公司。

1.3 研究方法

1.3.1 血清中呼吸道病毒IgM檢測 所有受試者均空腹12 h后，清晨抽取靜脈血4～5 ml，裝于普通采血管中，靜置35 min后，4 000 r/min離心15 min，收集血清，保存于-20℃備用。采用間接免疫熒光法檢測受試者血清中腺病毒(adenovirus，ADV)、副流感病毒(parainfluenza，PIV)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytin virus，RSV)、甲型流感病毒(influenza a virus，IAV)、乙型流感病毒(influenza B virus，IBV)的特異性IgM水平，在熒光顯微鏡下觀察結果。陽性結果判讀嚴格按照說明書進行。2種以上病毒感染為混合感染。

1.3.2 血清中炎性因子水平檢測 采用ELISA法檢測TNF-α、IL-2、IL-10水平，分別選用TNF-α、IL-2、IL-10 ELISA試劑盒。

2 結果

2.1 HSP組患兒血清常見呼吸道病毒抗體IgM檢查情況 360例HSP患兒呼吸道病毒感染特異性IgM陽性標本118例，檢出率32.78%(118/360)。其中，IBV特異性IgM檢出64例，檢出率17.78%(64/360)，陽性檢出率最高；IAV特異性IgM檢出44例，檢出率12.22%(44/360)；RSV特異性IgM檢出42例，檢出率11.67%(42/360)；PIV特異性IgM檢出41例，檢出率11.39%(41/360)；ADV特異性IgM檢出24例，檢出率6.67%(24/360)。

2.2 呼吸道病毒混合感染情況 118例HSP呼吸道病毒感染特異性IgM陽性患兒血清同時檢出2種呼吸道病毒特異性IgM陽性59例，檢出率為50.00%(59/118)，分別為ADV+PIV 1例，ADV+ RSV 3例，ADV+ IAV 2例，ADV+ IBV 7例；PIV+ RSV 8例，PIV+IAV 10例，PIV+IBV 4例；RSV+ IBV 12例；IAV+IBV 12例。同時檢出3種呼吸道病毒特異性IgM陽性16例，檢出率為13.56%(16/118)，分別為IBV+PIV+RSV 4例，IBV+PIV+IAV 4例，IBV+ADV+RSV 3例，IBV+ADV+IAV 2例，IBV+ADV+PIV 1例，ADV+PIV+RSV 1例，ADV+PIV+IAV 1例。其中，IBV混合其他病毒感染共35例，檢出率為29.66%(35/118)。

2.3 HSP組及健康組血清TNF-α、IL-2、IL-10水平比較 HSP組患兒血清IL-2水平低于健康組，TNF-α、IL-10水平高于健康組，組間比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 HSP組及健康組血清TNF-α、IL-2、IL-10水平比較

3 討論

HSP是自身免疫性血管炎綜合征，可引起心、腦、腎等重要器官損壞，也可并發心律失常、肺出血、心肌炎、顱內出血等[7]。HSP在春冬季高發，呼吸道感染在此季節也是高發期，因此，推測呼吸道病毒感染可能與HSP發病密切相關。

HSP患兒臨床表現有急性上呼吸道或下呼吸道感染，常見的呼吸道病毒主要有ADV、PIV、RSV、IBV、IVA。國外研究報道，大約有50%的HSP患兒發病前有呼吸道感染[8]。因此推測呼吸道病毒感染與HSP發病之間可能存在一定關系。王亞坤等[9]研究發現，兒童急性呼吸道感染的病毒病原特征中，RSV在病毒陽性標本中占主要比例，約占65.6%；其次是PIV，約占19.1%。朱益飛等[10]研究報道，在150例急性呼吸道感染患兒中，陽性病毒檢出率為78.67%，其中，最為常見的是流感病毒，約占36.44%，RSV占26.27%，ADV占11.02%。本研究發現，360例HSP患兒血清中呼吸道病毒感染特異性IgM陽性檢出率為32.78%，其中，IBV陽性檢出率最高，其余依次為IAV、RSV、PIV及ADV。王加芬等[11]研究發現，在呼吸道感染患兒2種或3種呼吸道病毒特異性IgM陽性檢出率為26.24%，同時有3種呼吸道病毒特異性IgM陽性檢出率為4.18%。有研究報道，HSP患兒體內存在免疫功能紊亂現象[12]。T細胞在機體免疫功能中起中心調控作用。

綜上所述，HSP患兒血清炎性因子IL-2水平下降，IL-10、TNF-α水平升高，血清中常見呼吸道病毒感染，其中，IBV檢出率最高。但本研究由于研究區域和樣本數量有限，還需進一步加大樣本數量和研究區域進行研究，深入探討呼吸道病原感染影響HSP的發病機理。