葉酸聯(lián)合阿倫磷酸鈉對絕經后骨質疏松患者骨代謝、CCL4及纖維細胞生長因子水平的影響

廖 勇 ，郭一雲 ，周紅宇 ，馮海魄 ，陳根定 ，楊水清

（1）中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九二二醫(yī)院中醫(yī)內分泌科；2）病理科；3）消化內科；4）呼吸內科，湖南 衡陽 421002）

絕經后骨質疏松癥是指絕經后女性由于卵巢功能的退化，以及雌激素分泌的減少，進而引起骨組織結構異常、骨量下降的一種全身代謝性疾病[1-3]。流行病學調查顯示，超過50%的絕經后女性伴有骨質疏松，且隨著年齡的增加，其發(fā)病率也有所上升[4-6]。而當患者骨質疏松未得到及時治療，將導致骨折的風險增加，嚴重威脅患者的生命健康及生活質量。目前，臨床上主要以增加骨量、改善骨代謝為治療原則，常用藥物為鈣劑、維生素D、磷酸鹽等，該治療方式雖在短期內可取得一定效果，但長期服用的患者治療效果并不顯著[7]。研究表明，絕經期婦女同型半胱氨酸水平有所上升，而同型半胱氨酸水平上升是骨折的危險因素之一，補充葉酸可改善同型半胱氨酸濃度[8]。基于此，本研究通過探討葉酸聯(lián)合阿倫磷酸鈉對絕經后骨質疏松患者骨代謝、巨噬細胞炎癥蛋白-1β（CCL4）及纖維細胞生長因子水平的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2019年1月于中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九二二醫(yī)院收治的154例絕經后骨質疏松患者為研究對象，并采用隨機數字表法分為觀察組（77例）和對照組（77例）。本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 納入排除標準

納入標準[9]：（1）年齡在45～70歲之間，且停經1 a以上；（2）符合骨質疏松相關診斷標準[10]；（3）既往無骨折史；（4）未合并惡性腫瘤、自身免疫性疾病；（5）近半年未服用抗生素等可能影響實驗結果的藥物者；（6）患者及其家屬知情且同意。

排除標準[9]：（1）合并骨軟化癥；（2）合并糖尿病、甲亢等可能影響骨代謝速率相關疾病者；（3）近半年內服用過可能影響骨代謝藥物者；（4）合并卵巢、子宮、乳腺相關疾病者；（5）合并骨代謝性疾病者；（6）依從性差者。

1.3 方法

所有患者均給予綜合治療，并口服鈣劑（鈣爾奇，惠氏制藥有限公司，國藥準字：H10950029，每片含鈣600 mg），1日1次。對照組在此基礎上增加口服阿倫磷酸鈉（善美福，默沙東制藥有限公司，國藥準字：J20130085），每日1片，連續(xù)治療6個月。觀察組在對照組基礎上增加口服葉酸片（常喜，常州制藥廠有限公司，國藥準字：H20003134），每日2片。連續(xù)治療6個月。

1.4 觀察指標

2組患者于治療前及治療后通過骨密度儀（日立阿洛卡AOS-100SA超聲波骨密度測定儀）檢測腰椎正位（L1-4）、股骨頸及股骨粗隆骨密度。

所有研究對象均于治療前后清晨空腹抽取靜脈血5 mL，3 000 r/min離心5 min，分離血清。采用酶聯(lián)免疫吸附法（Spectra-MaxParadigm 多功能酶標儀，美國Molecular Devices 公司）檢測骨代謝指標（血清25-OHD、CTX、BALP、BGP）、CCL4、纖維細胞生長因子（FGF-21、FGF-23）水平。試劑盒均購于上海碧云天生物科技有限公司。

于治療前后采用VAS疼痛評分記錄2組治療前及治療后疼痛情況[11]：評分范圍為0～10分，0分為無痛，10分為劇烈疼痛。采用SF-36量表評價2組患者治療前后生活質量[12]：共包括8個內容，評分范圍為0～100分，分值越高代表患者生活質量越高。

于治療后對患者進行療效評價[13]：顯效，疼痛感消失，骨密度檢測顯示BMD顯著增加；有效，疼痛感有所改善，骨密度檢測顯示BMD有所增加；無效，患者疼痛感未改善，BMD未見增加。總有效率=（顯效+有效）/該組總人數 × 100%。

記錄治療期間2組不良反應發(fā)生情況。

1.5 統(tǒng)計學處理

采用SPSS22.0進行統(tǒng)計分析，計數資料用n（%）表示，2組間比較采用χ2檢驗；符合正態(tài)分布的計量數據用平均值±標準差（）表示，2組間比較采用獨立樣本的t檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 2組一般資料比較

結果顯示，2組在年齡、絕經時間、BMI、BMD等一般資料上比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05），見表1。

表1 2組一般資料比較（）Tab.1 Comparison of general information between the two groups（）

表1 2組一般資料比較（）Tab.1 Comparison of general information between the two groups（）

2.2 2組總有效率比較

結果顯示，觀察組及對照組總有效率分別為89.61%、67.54%，2組比較差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 2組總有效率比較[n（%）]Tab.2 Comparison of the total effective rate between the two groups [n（%）]

2.3 治療前后2組骨密度水平比較

結果顯示，治療前，2組L1-4、股骨頸、股骨粗隆骨密度比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。治療后，2組L1-4、股骨頸、股骨粗隆骨密度均有所上升，且相較于對照組，觀察組L1-4、股骨頸、股骨粗隆骨密度水平更高（P＜0.05），見表3。

表3 治療前后2組骨密度水平比較（）Tab.3 Comparison of bone mineral density between the two groups before and after treatment（）

表3 治療前后2組骨密度水平比較（）Tab.3 Comparison of bone mineral density between the two groups before and after treatment（）

*P＜0.05。

2.4 治療前后2組骨代謝指標水平比較

結果顯示，治療前，2組25-OHD、CTX、BALP、BGP水平比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。治療后，2組25-OHD水平有所上升，而CTX、BALP、BGP水平有所下降（P＜0.05）。且相較于對照組，觀察組25-OHD水平更高，而CTX、BALP、BGP水平更低（P＜0.05），見表4。

表4 治療前后2組骨代謝指標水平比較（）Tab.4 Comparison of bone metabolism index levels between the two groups before and after treatment（）

表4 治療前后2組骨代謝指標水平比較（）Tab.4 Comparison of bone metabolism index levels between the two groups before and after treatment（）

*P＜0.05。

2.5 治療前后2組CCL4、FGF-21及FGF-23水平比較

治療前，2組CCL4、FGF-21、FGF-23水平比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。治療后，2組CCL4、FGF-21、FGF-23水平均有所下降（P＜0.05）。且相較于對照組，觀察組CCL4、FGF-21、FGF-23水平更低（P＜0.05），見表5。

表5 治療前后2組CCL4、FGF-21及FGF-23水平比較（）Tab.5 Comparison of the levels of CCL4，FGF-21 and FGF-23 between the two groups before and after treatment（）

表5 治療前后2組CCL4、FGF-21及FGF-23水平比較（）Tab.5 Comparison of the levels of CCL4，FGF-21 and FGF-23 between the two groups before and after treatment（）

*P＜0.05。

2.6 治療前后2組VAS及SF-36量表評分比較

治療前，2組VAS及SF-36評分比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。治療后，2組SF-36評分有所上升，而VAS評分有所下降（P＜0.05）。且相較于對照組，觀察組SF-36評分更高，而VAS評分更低（P＜0.05），見表6。

表6 治療前后2組VAS及SF-36量表評分比較（）Tab.6 Comparison of VAS and SF-36 scale scores between the two groups before and after treatment（）

表6 治療前后2組VAS及SF-36量表評分比較（）Tab.6 Comparison of VAS and SF-36 scale scores between the two groups before and after treatment（）

*P＜0.05。

2.7 2組不良反應率比較

治療期間，觀察組出現惡心1例，頭暈2例，總不良反應率3.90%；對照組出現惡心1例，背痛1例，下肢痙攣1例，頭暈2例，總不良反應率6.49%，2組比較差異無統(tǒng)計學意義（χ2=0.527，P=0.468）。

3 討論

絕經期及絕經后的女性由于機體雌性激素分泌不足，導致骨量大量丟失，而自身骨質吸收能力又有所減退，最終引起單位體積的骨基質、骨礦含量減少，肢體出現疼痛、脊柱結構異常，最終增加骨折的風險[14]。

阿倫磷酸鈉作為臨床上治療骨質疏松癥常用藥物之一，對鈣具有較好的親和力。藥物進入機體后可被骨吸收，進而沉積于骨質中，且抑制破骨細胞的生長。而當破骨細胞破骨后，藥物則被釋放，從而再次被機體破骨細胞吸收，抑制其活性，形成循環(huán)，最終促進骨密度的增加[15]。研究表明，阿倫磷酸鈉對骨質疏松癥患者短期內具有較好的治療效果，但長久用藥的治療效果并不明顯[16-17]，因此臨床上往往需結合其他藥物聯(lián)合治療。資料顯示，葉酸在預防骨質疏松中具有重要的臨床意義。其作用機制可能為[18]：（1）防止細胞內遺傳物質被破壞，減輕細胞氧化應激，從而減少細胞凋亡；（2）葉酸可通過改善細胞同型半胱氨酸的代謝，并促進一氧化氮合酶和一氧化氮的表達，進而糾正機體成骨細胞和破骨細胞的偶聯(lián)失衡，減少骨量丟失。既往已有研究表明，葉酸聯(lián)合阿倫磷酸鈉可改善老年人骨質疏松情況[19]。筆者在此基礎上，進一步對特定人群-絕經后骨質疏松患者進行葉酸聯(lián)合阿倫磷酸鈉治療，并評價其效果。25-OHD、CTX、BALP、BGP為骨代謝指標之一，可反映機體骨細胞、破骨細胞的活性以及骨轉換率。而疼痛感及生活質量是評估骨質疏松及骨折患者康復效果最直觀的評價指標之一。故筆者采用骨代謝生物學指標以及，VAS、SF-36量表作為評估療效指標之一。結果顯示，單純阿倫磷酸鈉或葉酸聯(lián)合阿倫磷酸鈉治療均可顯著改善患者的骨密度、骨代謝情況以及疼痛感和生活質量，且聯(lián)合治療的改善效果更為明顯。這說明葉酸聯(lián)合阿倫磷酸鈉治療可增加絕經后骨質疏松患者的骨密度，并緩解患者的疼痛感，促進其生活質量的改善。此外，不良反應結果顯示，兩組患者均有較低比例的不良反應現象，通過對癥治療后即有所緩解，說明該方式的安全性較高。

研究表明，CCL4與破骨細胞的活性密切相關，并與骨代謝疾病的發(fā)展存在一定聯(lián)系[20]。CCL4對多種細胞均具有潛在趨化作用，而破骨細胞的遷移則是骨質疏松的發(fā)生發(fā)展關鍵過程之一。已有研究證實，骨質疏松患者CCL4水平顯著上升[21]。而FGF家族具有廣泛的生物學功能。FGF-23主要由成骨細胞分泌，其主要通過調節(jié)骨代謝中鈣、磷的水平從而參與骨質疏松的發(fā)生發(fā)展[22]，而FGF-21主要參與血管硬化、脂質代謝等過程[23]。基于此，本研究以CCL4、FGF-21及FGF-23作為評價指標之一。結果顯示，2種治療方式均可顯著改善患者CCL4、FGF-21及FGF-23水平，且聯(lián)合治療的改善效果更為明顯。這也為葉酸聯(lián)合阿倫磷酸鈉治療絕經后骨質疏松的具體機制提供了依據。

綜上所述，葉酸聯(lián)合阿倫磷酸鈉治療絕經后骨質疏松患者臨床效果顯著，并能改善患者骨密度、骨代謝、CCL4以及纖維細胞生長因子水平。但本研究也存在以下不足：未動態(tài)觀察各指標變化情況，納入樣本為單中心小樣本。因此，仍需后續(xù)研究進一步加以證實。