檢測血清sIL-2R和HBME-1 mRNA的表達在鑒別診斷甲狀腺結節性質中的應用價值

崔 含，張秀薇

（廣東省東莞市人民醫院，廣東 東莞 523000）

甲狀腺結節是臨床上發病率較高的一種內分泌系統疾病。根據病情的性質，可將此病分為惡性甲狀腺結節和良性甲狀腺結節兩種類型[1]。流行病學研究發現[2]，甲狀腺結節在我國成年人中的發病率高達32.4%，其中有5%～10%的患者病情為惡性。在臨床上，如何在無損傷的情況下對甲狀腺結節的性質進行鑒別一直是一個難題。近年來的研究發現，甲狀腺結節的性質與患者體內免疫炎癥反應的程度密切相關。在此研究的基礎上，臨床上曾通過檢測甲狀腺結節患者血清白細胞介素-35（Interleukin-35,IL-35）和白細胞介素-17（Interleukin-17,IL-17）的水平來鑒別其病情的性質，但此檢測方法的敏感性和特異性均不理想[3]。因此，臨床上開始考慮通過檢測甲狀腺結節患者血清中溶性白介素-2 受體（oluble interleukin-2 receptor，SIL-2R）mRNA 和人骨髓內皮細胞標記 物-1(humanbonemarrowendothelialcell-1，HBME-1)mRNA的表達來鑒別其病情的性質。本次研究主要探討檢測血清中SIL-2R mRNA 和HBME-1 mRNA 的表達在鑒別診斷甲狀腺結節性質中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次研究的對象為2019 年6 月至2021 年1 月期間廣東省東莞市人民醫院收治的136 例甲狀腺結節患者及同期在該醫院接受體檢的50 例健康人作為研究對象。136 例甲狀腺結節患者的納入標準為：1）經影像學檢查和病理檢查被確診患有甲狀腺結節。2）在參與本次研究前未進行過任何針對甲狀腺結節的治療。3）未患有其他免疫系統疾病或血液系統疾病。4）精神狀態良好。5）臨床資料完整。6）簽署了自愿參加本次研究的知情同意書。其排除標準為：1）患有其他惡性腫瘤。2）在參與本次研究前1 個月內使用過免疫抑制劑或抗生素。3）患有嚴重的心、肝、腎功能障礙或腦血管疾病。根據病理檢查的結果，將136 例甲狀腺結節患者分為惡性組（50 例）和良性組（86 例）。將50 例健康人作為對照組。三組研究對象的一般資料見表1。三組研究對象的一般資料相比，P＞0.05，存在可比性。本次研究符合《赫爾辛基宣言》中的相關內容。

表1 三組研究對象一般資料的比較

1.2 方法

使用qPT-PCR 法檢測三組研究對象血清中sIL-2R mRNA 和HBME-1 mRNA 的表達情況。具體的檢測方法為：在患者入院次日的清晨，使用EDTA 抗凝管（生產廠家：北京科美信生物科技有限公司）采集其空腹狀態下的外周肘靜脈血5 mL。對取得的血液標本進行細胞分離處理，提取其中單個的核細胞。參考周靜等[4]使用的方法進行引物設計，向提取到的核細胞中滴入1 mL 的 TRLzol （生產廠家：武漢科昊佳生物科技有限公司），然后提取其中的mRNA。使用熒光側流免疫分析法檢測136 例甲狀腺結節患者IL-35和IL-17 的水平。具體的檢測方法為：在患者入院次日的清晨，抽取其空腹狀態下的外周肘靜脈血5 mL。對取得的血液標本進行離心處理，提取其上層的血清。將取得的血清標本放入血液生化分析儀中，檢測其中IL-35 和IL-17的水平。

1.3 觀察指標

比較三組研究對象血清中sIL-2R mRNA 和HBME-1 mRNA 的表達情況，觀察惡性甲狀腺結節患者血清中sIL-2R、HBME-1 mRNA 的表達與IL-17 水平、IL-35 水平、甲狀腺結節病灶個數、癌細胞發生淋巴結轉移情況和病情分期的相關性，采用logistics 回歸模型檢測血清sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA 等指標與惡性甲狀腺結節患者病情嚴重程度的相關性。

1.4 統計學方法

應用SPSS 22.0 統計軟件對本次研究中的數據進行分析，正態分布的計量資料用均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗，分類變量采用χ2 檢驗或Fisher 檢驗。采用Pearson 對獲得數據的相關性進行分析，采用多元回歸及logistic 回歸模型進行回歸分析。P＜0.05 表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三組研究對象血清中sIL-2R mRNA 和HBME-1 mRNA表達情況的比較

惡性組患者血清中sIL-2R mRNA 和HBME-1 mRNA的表達顯著高于良性組患者和對照組健康人，P ＜0.05。良性組患者血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA 的表達顯著高于對照組健康人，P＜0.05。詳見表2。

表2 三組研究對象血清中sIL-2R mRNA 和HBME-1 mRNA 表達情況的比較（U/mL，± s）

表2 三組研究對象血清中sIL-2R mRNA 和HBME-1 mRNA 表達情況的比較（U/mL，± s）

惡性組（n=50） 2.35±0.52 2.43±0.41良性組（n=86） 1.67±0.32 1.72±0.31對照組（n=50） 1.01±0.27 1.03±0.21 t 值 7.65 5.56 P 值 0.00 0.00

2.2 惡性甲狀腺結節患者血清中sIL-2R mRNA 等指標的表達與IL-17 等指標的相關性

惡性甲狀腺結節患者血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA 的表達與其血清中IL-17 的水平、IL-35 的水平、甲狀腺結節病灶的個數、癌細胞發生淋巴結轉移的情況和病情的分期呈正相關性。詳見表3。

表3 惡性甲狀腺結節患者血清中sIL-2R mRNA 等指標的表達與IL-17 等指標的相關性

2.3 惡性甲狀腺結節患者病情嚴重程度的logistics 回歸分析結果

血清sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA 呈高表達狀態是導致惡性甲狀腺結節患者病情加重的獨立危險因素。詳見表4。

表4 甲狀腺結節患者病情嚴重程度的logistics 回歸分析結果

3 討論

甲狀腺結節有良性和惡性兩種類型。其中良性甲狀腺結節主要包括甲狀腺瘤和甲狀腺囊腫，惡性甲狀腺結節多為甲狀腺癌。目前，臨床上多使用穿刺抽吸活檢法、甲狀腺彩超、血清促甲狀腺素水平監測等方法鑒別甲狀腺結節的性質。不過，上述檢查方法容易受到患者個體的差異、病灶的大小及部位等因素的影響，因此不適合在甲狀腺結節患者發病的早期使用。周偉清等[5-6]的研究發現，血清中的IL-35 和IL-17 與惡性甲狀腺結節的發生和發展存在密切的關系，因此提出可以通過檢測甲狀腺結節患者血清中IL-35 和IL-17 的水平來鑒別其病情的性質。不過，大量臨床試驗發現，該檢測方法的效果并不理想。

HBME-1 是一種與間皮瘤有關的抗體，其在腫瘤細胞的浸潤和轉移過程中具有重要的推動作用。因此。HBME-1 mRNA 在良性甲狀腺結節患者的血清中處于無表達或低表達的狀態，在惡性甲狀腺結節患者的血清中可出現高表達的狀態。許文瓊等[7]的研究結果顯示，HBME-1 mRNA 在甲狀腺乳頭癌患者血清中的陽性率高達90.60%。張素芳等[8]的研究指出，可以通過檢測血清中HBME-1 mRNA 的表達來鑒別甲狀腺結節的性質。SIL-2R 是一種重要的腫瘤標志物。它是由腫瘤病灶分泌的，與腫瘤病灶的活動存在密切的關系。大量的研究證實，SIL-2R 可通過抑制免疫細胞的活化使T 淋巴細胞進入休眠期，從而為腫瘤細胞的惡性增值提供支持。因此，檢測甲狀腺結節患者血清中SIL-2R 的表達有助于鑒別其病情的性質。

本次研究的結果顯示，惡性甲狀腺結節患者血清中sIL-2R mRNA、HBME-1 mRNA 的表達與IL-17 的水平、IL-35 的水平、甲狀腺結節病灶的個數、癌細胞發生淋巴結轉移的情況和病情的分期呈正相關性。這說明，sIL-2R和HBME-1 在惡性甲狀腺結節病灶的增值、侵襲和浸潤過程中都具有推動的作用。這種推動的作用與sIL-2R 和HBME-1 抑制了T 淋巴細胞的活化作用有關。

綜上所述，惡性甲狀腺結節患者血清中HBME-1 mRNA 和SIL-2R mRNA 的表達可明顯高于良性甲狀腺結節患者和正常人，而且血清sIL-2R mRNA 和HBME-1 mRNA呈高表達狀態是導致惡性甲狀腺結節患者病情加重的獨立危險因素。因此，血清sIL-2R mRNA 和HBME-1 mRNA可作為臨床上鑒別診斷甲狀腺結節性質的重要指標。