Nesfatin-1在不同糖耐量病人血清中的水平差異分析

李婉婉，鄧月珍，葉 飛，朱 亭

2型糖尿病(T2DM)是目前內分泌代謝領域的常見病。預計到2045年，超過7億人可能患有糖尿病[1]。然而，探索其發病機制，并尋找有效的診斷及治療方案，仍然是目前學術界的主要難題。Nesfatin-1是一種飽食分子，參與能量調節[2]。研究表明，Nesfatin-1除能抑制食欲外，還能改善外周組織胰島素敏感性[3]，增加胰島素分泌[4-5]。減少白色脂肪分布[6-7]，然而Nesfatin-1與T2DM的關系至今尚不明確。本研究旨在通過觀察不同糖耐量狀態的病人血清中Nesfatin-1的水平差異，初步探討血清Nesfatin-1水平與T2DM之間的關聯。為臨床診斷提供更為早期的生物學指標，并為T2DM及其慢性并發癥的治療提供更好的靶點。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年6月至2018年5月在我院內分泌科門診新診斷的血糖異常者作為研究對象。納入標準：(1)初次發現血糖異常；(2)自愿參加本研究，簽署知情同意書；(3)診斷參照WHO于1999年制定的糖尿病診斷標準[1]。排除標準：(1)運動員、重量及力量訓練者；(2)懷孕、哺乳者；(3)合并心腦血管疾病者；(4)肝腎功能不全者；(5)有反復發作的胰腺炎或胰腺手術病史者；(6)近3個月接受過糖皮質激素治療者；(7)合并嚴重感染者；(8)有自身免疫性疾病者；(9)惡性腫瘤病人。根據口服葡萄糖耐量試驗分為糖尿病前期(PreDM)組包括空腹血糖受損(IGT)及糖耐量異常(IFG)60例、T2DM組60例。并選擇同期體檢健康人員52名作為健康對照組。

1.2 方法 所有研究對象均測量身高、體質量、腰圍、臀圍，計算腰臀比(WHR)、體質量指數(BMI)。并均于禁食8～12 h后,清晨抽取肘靜脈血5 mL，采用放射免疫法測定空腹胰島素(FIns)水平、日立7080型全自動生化儀測定空腹血糖(FPG)、高效液相色譜法測糖化血紅蛋白(HbA1c)。另采集清晨空腹靜脈血5 mL,于4 000 r/min離心機中離心10 min,留取血清,剔除溶血標本,-80 ℃冰箱保存,ELISA法測定血清中Nesfatin-1，試劑盒采購于德國RayBiotech公司。所有操作均嚴格按照說明書進行。胰島β細胞功能指數(HOMA-β)=[20×FIns(μU/mL)]/[FPG(mmol/L)-3.5]。

1.3 統計學方法 采用χ2檢驗、方差分析和q檢驗、Pearson相關性分析和多重線性回歸分析。

2 結果

2.1 3組一般情況比較 各組間的性別構成比差異無統計學意義(P>0.05)，健康對照組和T2DM組年齡均大于PreDM組，差異均有統計學意義(P<0.01)(見表1)。

2.2 3組相關觀察指標比較 與健康對照組比較，PreDM組BMI、FPG、FIns、Nesfatin-1、HbA1c升高，HOMA-β下降，T2DM組BMI、FPG、FIns、HbA1c升高，HOMA-β、Nesfatin-1下降，差異均有統計學意義(P<0.01)；與PreDM組比較，T2DM組BMI、FPG、HbA1c升高，HOMA-β、Nesfatin-1、FIns下降，差異均有統計學意義(P<0.01)(見表1)。

表1 各指標在健康對照組、PreDM組及T2DM組中的比較

2.3 Nesfatin-1與其余各指標的相關性分析 所有受試者血清Nesfatin-1與WHR、BMI、FIns、HOMA-β呈正相關，與FPG呈負相關(P<0.05～P<0.01)，與HbA1c無相關性(P>0.05)(見表2)。

表2 Nesfatin-1與其余各指標的相關性分析

2.4 FPG與BMI、WHR、FIns、Nesfatin-1多重線性回歸分析 以FPG作為因變量，BMI、WHR、FIns、Nesfatin-1作為自變量進行多重線性回歸分析，結果顯示，FPG值隨著BMI、WHR、FIns值升高而增高，隨著Nesfatin-1值的升高而降低(P<0.05～P<0.01)(見表3)。

表3 FPG與BMI、WHR、FIns、Nesfatin-1多重線性回歸分析

3 討論

T2DM在世界范圍內以驚人的速度增長，已成為全球主要的健康問題[8]。BMI是肥胖的預測因子，而肥胖又是糖代謝異常的危險因素。流行病學研究[9]顯示，肥胖的程度與T2DM的發病有關。本研究證實，隨著血糖的不斷惡化，BMI、HbA1c%呈逐漸升高趨勢，HOMA-β呈逐步下降趨勢，且組間比較差異均有統計學意義，符合血糖代謝異常、糖尿病的代謝性改變規律。

Nesfatin-1最初是2006年由日本科學家OH-I等[10]在大鼠的下丘腦中發現。研究[11-12]顯示，Nesfatin-1在胰腺、胃腸、脂肪、心血管等外周組織中也有表達，且在糖代謝中起著重要作用。

動物實驗顯示Nesfatin-1可改善葡萄糖代謝。如YANG等[13]發現腦室內注射Nesfatin-1，抑制糖異生和外周葡萄糖攝取；NAKATA等[4]發現Nesfatin-1增加Ca2+內流，促進胰島素釋放；LI等[14]發現外周注射Nesfatin-1可增加蛋白激酶B磷酸化和葡萄糖轉運蛋白4膜轉位，改善胰島素抵抗。

在人類，Nesfatin-1與T2DM之間的關系尚不完全明確。LIU等[15]的研究提示，T2DM病人血清Nesfatin-1水平較健康人降低。而ZHANG等[16]對新診斷的T2DM病人的研究卻認為T2DM病人血清Nesfatin-1水平明顯高于正常對照組，且與BMI、HOMA-IR、FPG呈顯著負相關。由此可見，目前的研究中，Nesfatin-1在T2DM病人的血清水平高低結果不一，且與BMI、HOMA-IR的相關性分析結果也不一致。本研究發現，與健康對照組比較，PreDM組血清Nesfatin-1水平明顯上升；而T2DM組較健康對照組血清Nesfatin-1水平明顯下降。在所有的受試者中，Nesfatin-1與BMI、WHR、FIns、HOMA-β呈顯著正相關，與FPG呈顯著負相關。

從上述Nesfatin-1的變化趨勢發現，Nesfatin-1在血糖升高的早期出現了一過性升高，同時，FIns與Nesfatin-1有相同的變化規律，也呈現出先升高后降低的變化趨勢，推測Nesfatin-1、FIns水平的一過性升高可能是機體對于血糖升高而表現出的代償性機制。當血糖水平繼續惡化，這種保護作用進入失代償，從而在糖尿病組，Nesfatin-1、FIns水平出現了顯著下降，Nesfatin-1水平下降可能在T2DM的發生中起著重要作用。RIVA等[17]研究發現，Nesfatin-1的前體蛋白NUCB2在T2DM病人胰島β細胞中的表達顯著下降，NUCB2 mRNA的表達與胰島素分泌能力呈顯著正相關。這與本研究中Nesfatin-1與HOMA-β正相關、T2DM組Nesfatin-1水平明顯下降的結果一致。以此結果推斷，正是由于處于不同病情階段的病人Nesfatin-1表現出高低不一的水平，從而導致了之前對于Nesfatin-1的研究得到了不一致的結果。

進一步行多重線性回歸分析亦證實，Nesfatin-1為影響FPG的因素之一。其原因可能與Nesfatin-1能促進胰島素分泌及改善外周組織的胰島素敏感性有關。CHEN等[18]的臨床試驗發現，沙格列汀能上調Nesfatin-1的分泌，改善T2DM病人的胰島素抵抗和代謝狀況，并且認為沙格列汀除了通過抑制胰高血糖素樣肽-1的降解來降糖外，還可能通過上調Nesfatin-1的分泌發揮基礎作用。

總之，血清Nesfatin-1是影響血糖代謝的因素之一，其水平在糖尿病前期呈代償性升高，進入糖尿病階段后Nesfatin-1水平的下降很有可能參與了T2DM的發生發展，有可能成為T2DM早期診斷指標和治療的新策略，但具體機制有待進一步研究。