RA患者血清RF、MMP-3及抗CarP抗體聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值*

李小飛 高健 繆嫻靜 仲海峰 孟舒婷 陳宇

(南通大學(xué)附屬海安醫(yī)院1.腎內(nèi)科；2.檢驗(yàn)科，江蘇 海安 226600)

類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種常見(jiàn)的急性或慢性結(jié)締組織炎癥[1]。隨著病情的發(fā)展，逐漸會(huì)出現(xiàn)關(guān)節(jié)變形，具有很高的致殘率[2-3]。因此，有必要尋找特異性檢測(cè)指標(biāo)對(duì)RA進(jìn)行早期診斷。類(lèi)風(fēng)濕因子(Rheumatoid factor,RF)是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體[4]，目前在國(guó)內(nèi)廣泛地應(yīng)用于對(duì)RA的診斷[5]。基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinase-3，MMP-3)屬于基質(zhì)溶解酶中的一種，能夠降解多種基質(zhì)成分[6]，可作為RA患者滑膜損害和預(yù)后的指標(biāo)[7]。氨基甲?；?Carbamylated Proteins，CarP)是一種由氰酸鹽引起的化學(xué)反應(yīng)，近年來(lái)已作為臨床上發(fā)現(xiàn)的一種與RA相關(guān)的新自身抗體[8-10]。基于此，本研究通過(guò)檢測(cè)我院收治的RA患者血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平，探討其在RA疾病診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月～2019年12月我院收治的94例RA患者為觀察組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組所有患者均符合2010年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)制定的RA分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)[11]，經(jīng)臨床判斷受累關(guān)節(jié)數(shù)量和位置等得分≥6分時(shí)即可確診為RA。②入選對(duì)象精神行為無(wú)障礙者。③既往未接受過(guò)甲氨蝶呤和生物制劑等治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并血液系統(tǒng)疾病。②合并其他免疫系統(tǒng)疾病。③合并惡性腫瘤。④存在全身感染。另選取同期收治的92例患有非RA良性免疫性疾病患者作為對(duì)照組及同期健康體檢者96例作為健康組。本研究對(duì)象均自愿參與本研究，并經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法 在受試者空腹時(shí)于清晨采集其肘靜脈血8 mL，并在4℃的環(huán)境下放置20 min后，以3000 r/min離心10 min后取上清液，并置-80 ℃下保存，然后分別檢測(cè)血清RF、MMP-3以及抗CarP抗體水平。血清RF的檢測(cè)采用德國(guó)西門(mén)子BN ProSpec型全自動(dòng)特定蛋白分析儀，試劑盒等均為原裝配套測(cè)定試劑，采用免疫透射比濁方法進(jìn)行檢測(cè)，血清MMP-3以及抗CarP抗體的檢測(cè)采用美國(guó)BioTek ELx800型酶標(biāo)儀，采用酶聯(lián)吸附免疫方法(ELISA)進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒均來(lái)自英國(guó)Amersham Pharmacia公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。其中計(jì)數(shù)資料以例數(shù)(n)表示，組間比較采用2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以表示，組間比較采用F檢驗(yàn)，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析方法，多因素分析采用Logistic多元回歸分析，采用ROC受試者特征曲線評(píng)估中血清RF、MMP-3及抗CarP抗體指標(biāo)對(duì)RA疾病的診斷價(jià)值，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料比較 觀察組患者中男性31例，女性63例；年齡41～86歲，平均(63.1±13.3)歲。對(duì)照組中男性33例，女性59例，年齡38～85歲，平均(63.8±12.7)歲，其中系統(tǒng)性紅斑瘡患者43例，干燥綜合征28例，混合型結(jié)締組織病14例，多發(fā)性心肌炎5例，系統(tǒng)性硬化癥2例。健康組男性32例，女性64例，年齡40～87歲，平均(64.2±13.6)歲。三組納入研究者的一般資料均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。

2.2 三組血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平對(duì)比 三組研究對(duì)象血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。進(jìn)一步兩兩比較，觀察組患者的血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平均顯著高于對(duì)照組和健康組(P<0.05)，且對(duì)照組患者的血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平顯著高于健康組(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組研究對(duì)象血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平對(duì)比

2.3 三組間血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，三組血清RF與MMP-3及抗CarP抗體水平的相關(guān)性系數(shù)分別為0.416以及0.387，MMP-3與抗CarP抗體水平的相關(guān)性系數(shù)為0.464，均呈正相關(guān)(P<0.05)。

2.4 Logistic多因素回歸分析 將血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平作為自變量，分別以0代表對(duì)照組和健康組表示研究對(duì)象未患有RA疾病，1代表觀察組表示研究對(duì)象患有RA疾病作為因變量，建立Logistic多因素回歸模型，結(jié)果顯示血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平均是影響患者患有RA疾病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，見(jiàn)表2。

表2 Logistic多因素回歸分析

2.5 血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平聯(lián)合檢測(cè)對(duì)RA疾病的診斷效能對(duì)比 ROC曲線圖顯示血清RF檢測(cè)患有RA疾病的ROC曲線下面積為0.769；血清MMP-3檢測(cè)患有RA疾病的ROC曲線下面積為0.871；血清抗CarP抗體檢測(cè)患有RA疾病的ROC曲線下面積為0.835，聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線下面積為0.903，均高于單獨(dú)的指標(biāo)檢測(cè)，見(jiàn)圖1。此外除特異度稍低于MMP-3指標(biāo)檢測(cè)外，聯(lián)合檢測(cè)的敏感度及約登指數(shù)均高于三者的獨(dú)立檢測(cè)，見(jiàn)表3。

圖1 RA患者血清RF、MMP-3、抗CarP抗體指標(biāo)及聯(lián)合檢測(cè)的ROC曲線圖

表3 RA患者血清RF、MMP-3及抗CarP抗體指標(biāo)及聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能對(duì)比

3 討論

RA作為一種反復(fù)發(fā)作性疾病，致殘率較高，預(yù)后不良，若不及時(shí)診斷治療，任其發(fā)展將很快出現(xiàn)不可逆的關(guān)節(jié)損傷以及全身多系統(tǒng)的損害[12]。目前RA的診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)、X線改變以及聯(lián)合類(lèi)風(fēng)濕因子檢測(cè)等，通常患者確診時(shí)多已發(fā)展至RA疾病的中晚期，骨關(guān)節(jié)已發(fā)生不可逆的損壞，因而對(duì)RA疾病進(jìn)行盡早的篩選診斷顯得越來(lái)越重要[13-14]。

RF作為最早在RA患者血清中發(fā)現(xiàn)的因子[15]，主要為IgM類(lèi)自身抗體，但也有IgG類(lèi)、IgA類(lèi)、IgD類(lèi)和IgE類(lèi)，RA患者陽(yáng)性檢出率可達(dá)50%～90%[16]。雖然RF診斷的陽(yáng)性率一般較高，但在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬化病、多發(fā)性心肌炎等其他免疫性疾病中其也常呈現(xiàn)出陽(yáng)性特征，并且某些健康者中會(huì)出現(xiàn)血清RF陽(yáng)性，因此臨床中不適宜單獨(dú)應(yīng)用[17]。MMP-3是基質(zhì)金屬蛋白酶家族的重要成員,能夠降解多種細(xì)胞外基質(zhì)成分，參與組織形態(tài)發(fā)生、損傷修復(fù)、炎癥反應(yīng)等一系列生理、病理過(guò)程[18-19]。抗Carp抗體主要識(shí)別氨基甲?；牡鞍?，抗Carp抗體能夠隨著疾病的活動(dòng)度增加造成更加嚴(yán)重的關(guān)節(jié)損傷[20]。本研究結(jié)果顯示三組血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平比較差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且觀察組高于對(duì)照組和健康組，對(duì)照組高于健康組(P<0.05)。說(shuō)明血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平的變化與RA疾病密切相關(guān)。

RF被認(rèn)為是臨床上最早于診斷RA疾病的檢測(cè)指標(biāo)之一，目前也是最常用的判斷檢測(cè)指標(biāo)[21]。血清MMP-3被認(rèn)為是一個(gè)系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)的標(biāo)志物，其不僅是RA早期診斷指標(biāo)，而且還是反映RA患者再次發(fā)作的特異性指標(biāo)[22]?？笴arP抗體與RA疾病的關(guān)系近年來(lái)逐漸成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)，對(duì)RA的早期診斷及輔助判斷具有比較重要的價(jià)值。相關(guān)分析結(jié)果顯示血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平間呈正相關(guān)(P<0.05)。由Logistic回歸分析結(jié)果顯示血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平均是影響RA疾病發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，表明隨著血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平的增高患者發(fā)生RA疾病的風(fēng)險(xiǎn)大大增加，這進(jìn)一步揭示了血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平與RA疾病的密切關(guān)系。本文研究結(jié)果表明MMP-3指標(biāo)檢測(cè)具有較高的特異度，MMP-3濃度與RA病情進(jìn)展密切相關(guān)，這與孫艷艷[23]等的研究相一致。本研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度、約登指數(shù)及ROC曲線下面積均高于三者檢測(cè)，譚柏松等[24]的研究結(jié)果與本文類(lèi)似。因此三者聯(lián)合診斷有利于RA疾病的早期診斷，減少漏診率，可在臨床實(shí)踐中進(jìn)行應(yīng)用推廣，以利于盡早對(duì)患者進(jìn)行治療，提高其臨床療效。

4 結(jié)論

RF、MMP-3及抗CarP抗體聯(lián)合檢測(cè)在RA疾病診斷中具有較高敏感性和特異性，具有較好的臨床應(yīng)用價(jià)值。