RA患者血清RF、MMP-3及抗CarP抗體聯(lián)合檢測的診斷價值*

李小飛 高健 繆嫻靜 仲海峰 孟舒婷 陳宇

(南通大學附屬海安醫(yī)院1.腎內(nèi)科；2.檢驗科，江蘇 海安 226600)

類風濕關節(jié)炎(rheumatoid arthritis,RA)是一種常見的急性或慢性結(jié)締組織炎癥[1]。隨著病情的發(fā)展，逐漸會出現(xiàn)關節(jié)變形，具有很高的致殘率[2-3]。因此，有必要尋找特異性檢測指標對RA進行早期診斷。類風濕因子(Rheumatoid factor,RF)是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體[4]，目前在國內(nèi)廣泛地應用于對RA的診斷[5]。基質(zhì)金屬蛋白酶(Matrix metalloproteinase-3，MMP-3)屬于基質(zhì)溶解酶中的一種，能夠降解多種基質(zhì)成分[6]，可作為RA患者滑膜損害和預后的指標[7]。氨基甲酰化(Carbamylated Proteins，CarP)是一種由氰酸鹽引起的化學反應，近年來已作為臨床上發(fā)現(xiàn)的一種與RA相關的新自身抗體[8-10]。基于此，本研究通過檢測我院收治的RA患者血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平，探討其在RA疾病診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1月～2019年12月我院收治的94例RA患者為觀察組。納入標準：①觀察組所有患者均符合2010年美國風濕病學會制定的RA分類標準[11]，經(jīng)臨床判斷受累關節(jié)數(shù)量和位置等得分≥6分時即可確診為RA。②入選對象精神行為無障礙者。③既往未接受過甲氨蝶呤和生物制劑等治療。排除標準：①合并血液系統(tǒng)疾病。②合并其他免疫系統(tǒng)疾病。③合并惡性腫瘤。④存在全身感染。另選取同期收治的92例患有非RA良性免疫性疾病患者作為對照組及同期健康體檢者96例作為健康組。本研究對象均自愿參與本研究，并經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 檢測方法 在受試者空腹時于清晨采集其肘靜脈血8 mL，并在4℃的環(huán)境下放置20 min后，以3000 r/min離心10 min后取上清液，并置-80 ℃下保存，然后分別檢測血清RF、MMP-3以及抗CarP抗體水平。血清RF的檢測采用德國西門子BN ProSpec型全自動特定蛋白分析儀，試劑盒等均為原裝配套測定試劑，采用免疫透射比濁方法進行檢測，血清MMP-3以及抗CarP抗體的檢測采用美國BioTek ELx800型酶標儀，采用酶聯(lián)吸附免疫方法(ELISA)進行檢測，試劑盒均來自英國Amersham Pharmacia公司。

1.3 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 23.0軟件進行統(tǒng)計分析。其中計數(shù)資料以例數(shù)(n)表示，組間比較采用2檢驗，計量資料以表示，組間比較采用F檢驗，兩兩比較采用LSD-t檢驗，血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平相關性分析采用Pearson相關性分析方法，多因素分析采用Logistic多元回歸分析，采用ROC受試者特征曲線評估中血清RF、MMP-3及抗CarP抗體指標對RA疾病的診斷價值，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料比較 觀察組患者中男性31例，女性63例；年齡41～86歲，平均(63.1±13.3)歲。對照組中男性33例，女性59例，年齡38～85歲，平均(63.8±12.7)歲，其中系統(tǒng)性紅斑瘡患者43例，干燥綜合征28例，混合型結(jié)締組織病14例，多發(fā)性心肌炎5例，系統(tǒng)性硬化癥2例。健康組男性32例，女性64例，年齡40～87歲，平均(64.2±13.6)歲。三組納入研究者的一般資料均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)，具有可比性。

2.2 三組血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平對比 三組研究對象血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平比較有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。進一步兩兩比較，觀察組患者的血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平均顯著高于對照組和健康組(P<0.05)，且對照組患者的血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平顯著高于健康組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組研究對象血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平對比

2.3 三組間血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平的相關性分析 相關性分析結(jié)果顯示，三組血清RF與MMP-3及抗CarP抗體水平的相關性系數(shù)分別為0.416以及0.387，MMP-3與抗CarP抗體水平的相關性系數(shù)為0.464，均呈正相關(P<0.05)。

2.4 Logistic多因素回歸分析 將血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平作為自變量，分別以0代表對照組和健康組表示研究對象未患有RA疾病，1代表觀察組表示研究對象患有RA疾病作為因變量，建立Logistic多因素回歸模型，結(jié)果顯示血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平均是影響患者患有RA疾病的獨立危險因素，見表2。

表2 Logistic多因素回歸分析

2.5 血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平聯(lián)合檢測對RA疾病的診斷效能對比 ROC曲線圖顯示血清RF檢測患有RA疾病的ROC曲線下面積為0.769；血清MMP-3檢測患有RA疾病的ROC曲線下面積為0.871；血清抗CarP抗體檢測患有RA疾病的ROC曲線下面積為0.835，聯(lián)合檢測的ROC曲線下面積為0.903，均高于單獨的指標檢測，見圖1。此外除特異度稍低于MMP-3指標檢測外，聯(lián)合檢測的敏感度及約登指數(shù)均高于三者的獨立檢測，見表3。

圖1 RA患者血清RF、MMP-3、抗CarP抗體指標及聯(lián)合檢測的ROC曲線圖

表3 RA患者血清RF、MMP-3及抗CarP抗體指標及聯(lián)合檢測的診斷效能對比

3 討論

RA作為一種反復發(fā)作性疾病，致殘率較高，預后不良，若不及時診斷治療，任其發(fā)展將很快出現(xiàn)不可逆的關節(jié)損傷以及全身多系統(tǒng)的損害[12]。目前RA的診斷主要依據(jù)臨床表現(xiàn)、X線改變以及聯(lián)合類風濕因子檢測等，通常患者確診時多已發(fā)展至RA疾病的中晚期，骨關節(jié)已發(fā)生不可逆的損壞，因而對RA疾病進行盡早的篩選診斷顯得越來越重要[13-14]。

RF作為最早在RA患者血清中發(fā)現(xiàn)的因子[15]，主要為IgM類自身抗體，但也有IgG類、IgA類、IgD類和IgE類，RA患者陽性檢出率可達50%～90%[16]。雖然RF診斷的陽性率一般較高，但在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、硬化病、多發(fā)性心肌炎等其他免疫性疾病中其也常呈現(xiàn)出陽性特征，并且某些健康者中會出現(xiàn)血清RF陽性，因此臨床中不適宜單獨應用[17]。MMP-3是基質(zhì)金屬蛋白酶家族的重要成員,能夠降解多種細胞外基質(zhì)成分，參與組織形態(tài)發(fā)生、損傷修復、炎癥反應等一系列生理、病理過程[18-19]。抗Carp抗體主要識別氨基甲酰化的蛋白，抗Carp抗體能夠隨著疾病的活動度增加造成更加嚴重的關節(jié)損傷[20]。本研究結(jié)果顯示三組血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平比較差異統(tǒng)計學意義(P<0.05)，且觀察組高于對照組和健康組，對照組高于健康組(P<0.05)。說明血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平的變化與RA疾病密切相關。

RF被認為是臨床上最早于診斷RA疾病的檢測指標之一，目前也是最常用的判斷檢測指標[21]。血清MMP-3被認為是一個系統(tǒng)性炎癥反應的標志物，其不僅是RA早期診斷指標，而且還是反映RA患者再次發(fā)作的特異性指標[22]。抗CarP抗體與RA疾病的關系近年來逐漸成為國內(nèi)外研究的熱點，對RA的早期診斷及輔助判斷具有比較重要的價值。相關分析結(jié)果顯示血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平間呈正相關(P<0.05)。由Logistic回歸分析結(jié)果顯示血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平均是影響RA疾病發(fā)生的獨立危險因素，表明隨著血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平的增高患者發(fā)生RA疾病的風險大大增加，這進一步揭示了血清RF、MMP-3及抗CarP抗體水平與RA疾病的密切關系。本文研究結(jié)果表明MMP-3指標檢測具有較高的特異度，MMP-3濃度與RA病情進展密切相關，這與孫艷艷[23]等的研究相一致。本研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測的敏感度、特異度、約登指數(shù)及ROC曲線下面積均高于三者檢測，譚柏松等[24]的研究結(jié)果與本文類似。因此三者聯(lián)合診斷有利于RA疾病的早期診斷，減少漏診率，可在臨床實踐中進行應用推廣，以利于盡早對患者進行治療，提高其臨床療效。

4 結(jié)論

RF、MMP-3及抗CarP抗體聯(lián)合檢測在RA疾病診斷中具有較高敏感性和特異性，具有較好的臨床應用價值。