宮頸管分泌物Th1/Th2亞群與高危型HPV感染相關性研究

毛佩瑜 張晨

女性陰道是一個特異的、結構復雜的、動靜態結合的微生態體系[1]。女性陰道內的益生菌在周期性的性激素作用下，分泌各種細菌素和細胞因子，維持陰道酸性環境，使得陰道內不同種類和數量的微生物能與宿主、環境彼此協調、互相制約，共同維持著陰道微生態體系的動態平衡及穩態[2]。這種平衡狀態一旦被破壞，條件致病菌過度生長，人體就可能罹患各種生殖道疾病。女性感染HPV后宮頸組織可發生病變，這種病變是否會進展至宮頸高級別病變，主要取決于3個方面：病毒的致病能力、陰道微生態及宿主自身免疫狀態。目前，Th1/Th2亞群檢測多采用外周血為檢測標本，HPV感染女性宮頸管局部分泌物Th1/Th2亞群是否存在異常報道不多。本研究擬通過檢測宮頸管分泌物Th1/Th2亞群水平的變化，探討宮頸管分泌物Th1/Th2亞群與高危型HPV感染的相關性，為及時糾正生殖道高危型HPV感染患者的陰道不良環境及提高HPV轉陰率提供理論參考，現報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2018年3月至2019年3月在浙江省中醫院檢測宮頸管分泌物顯示高危型HPV陽性的60例患者為觀察組，陰性的受檢者60例為對照組，年齡均為 18～35 歲。觀察組納入標準：（1）有性生活史；（2）受檢者在檢查前48 h無性生活史及陰道灌洗放藥史，非月經期，就診時陰道無異常出血；（3）HPV-16、18、52、58型HPV檢測陽性，未進行治療者；（4）經薄層液基細胞學檢測（thinprep cytologic test，TCT）或陰道鏡檢查及宮頸組織活檢確定是否存在外陰、陰道、宮頸器質性病變（如濕疣、上皮內瘤樣病變、癌變），其中存在宮頸病變的患者，按子宮頸上皮部分被異型細胞所取代的面積嚴重程度，分為宮頸上皮內瘤變Ⅰ級（CIN Ⅰ級）、CIN Ⅱ級和CIN Ⅲ級（包括宮頸原位癌），不存在宮頸病變的患者標記為正常宮頸；（5）非妊娠及哺乳期；（6）除外影響免疫狀態的內外科疾病；（7）近1個月內無其他特殊食物或藥物服用史。對照組納入標準：女性體檢者中HPV檢測陰性者。對照組納入標準除上述（3）、（4）外，余同觀察組。觀察組年齡18～35（29.05±4.90）歲，對照組年齡18～35（29.45±4.64）歲，兩組患者年齡比較差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 宮頸HPV分型檢測 使用專用宮頸刷在宮頸鱗-柱狀上皮交界處輕輕刷取數圈，獲得適量分泌物及細胞，取出宮頸刷，將刷頭拔下并迅速放入保存液中，送檢驗科進行HPV分型檢測。

1.2.2 宮頸管Th1/Th2亞群檢測 使用專用宮頸刷刷取宮頸管分泌物，加入至1 ml 0.9%氯化鈉溶液中，采用流式熒光法，使用人Th1/Th2亞群檢測試劑盒進行細胞因子檢測。選取Th1家族中的IL-2及Th2家族中的IL-10作為觀測指標（即IL-2/IL-10）。

2 結果

2.1 兩組受檢者宮頸管分泌物IL-2、IL-10、IL-2/IL-10水平比較 與對照組相比，觀察組患者IL-2、IL-2/IL-10水平均降低，IL-10水平升高，差異均有統計學意義（均 P＜0.05），見表 1。

表1 兩組受檢者宮頸管IL-2、IL-10、IL-2/IL-10水平比較

2.2觀察組患者宮頸病變嚴重程度與宮頸管分泌物IL-2、IL-10、IL-2/IL-10水平的相關性分析 觀察組患者正常宮頸27例，CINⅠ級17例，CINⅡ級9例，CINⅢ級5例，宮頸原位癌患者2例。相關性分析發現，觀察組患者宮頸病變越嚴重，宮頸管IL-2水平越低，IL-10水平越高，IL-2/IL-10水平越低，見表2。

表2 觀察組患者宮頸病變嚴重程度與宮頸管IL-2、IL-10、IL-2/IL-10水平的相關性分析

3 討論

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，發病率呈上升趨勢，在中國女性生殖道惡性腫瘤中居首位，嚴重威脅女性健康。高危型HPV感染是宮頸癌發生的重要原因之一[3]。HPV主要通過性接觸傳播，尤其是在人體一些特異性部位的皮膚和黏膜，如宮頸柱狀上皮和鱗狀上皮交界處感染，因而女性更易成為攜帶者。大部分女性在感染HPV后不出現明顯的臨床癥狀，因而很難對HPV感染患者作一個全方位的風險因子評估。

陰道局部免疫環境中的免疫反應在宿主抗高危型HPV感染和宮頸病變進展中起重要作用[4]。在宮頸癌發生早期，機體并未呈現出明顯的免疫狀態改變，但陰道局部免疫微環境已因高危型HPV的持續感染而發生變化。可見，高危型HPV的持續感染可能與陰道免疫微環境改變密切相關[5]。

本研究中，通過對兩組患者宮頸管分泌物IL-2、IL-10、IL-2/IL-10檢測發現，觀察組宮頸管分泌物IL-2、IL-2/IL-10水平比對照組下降，IL-10水平上升。同時在觀察組患者中隨著宮頸病變嚴重程度加重，宮頸管分泌物IL-2水平呈下降趨勢，IL-10呈上升趨勢，IL-2/IL-10呈下降趨勢。由此可知，高危型HPV感染的宮頸病變嚴重程度與IL-2水平呈負相關，與IL-10水平呈正相關，與IL-2/IL-10水平呈負相關。這表明在感染狀態下，Th1和Th2分別促進自我分泌，試圖消除病毒的持續感染，抑制疾病的進一步發生。然而，當Th1/Th2平衡失常，不能消除持續性感染時，疾病逐漸發展，并且發生Th1向Th2漂移，機體處于Th2型細胞優勢狀態，這導致細胞免疫缺陷并逃脫腫瘤監視而致宮頸癌。

綜上所述，高危型HPV感染患者宮頸管Th1/Th2亞群失衡，Th1向Th2漂移，且宮頸病變嚴重程度與Th1/Th2亞群失衡相關。