甜茶素在大鼠體內的代謝產物鑒定與藥動學研究

姜蔓菁，蒙金英，顏夏晴，覃淑婷，李耀華，樊蘭蘭

甜茶素在大鼠體內的代謝產物鑒定與藥動學研究

姜蔓菁，蒙金英，顏夏晴，覃淑婷，李耀華*，樊蘭蘭*

廣西中醫藥大學藥學院，廣西 南寧 530200

對甜茶素在大鼠體內的代謝產物進行定性分析，并考察甜茶素在大鼠體內的藥動學特征。SD大鼠ig甜茶素（125 mg/kg），收集不同時間段的尿液、糞便、膽汁和血漿。采用超高效液相色譜-四級桿飛行時間質譜聯用技術（UPLC-Q-TOF-MS/MS）分析其在大鼠體內的代謝產物；基于超高效液相色譜串聯質譜（UPLC-MS/MS）建立一種測定大鼠血漿中甜茶素含量的方法，初步研究甜茶素的藥動學特征。大鼠ig甜茶素后，在尿液、糞便、膽汁和血漿中共檢測并初步鑒定了1種原型成分和58種代謝物，主要代謝途徑有脫氫化、羥基化、去葡萄糖基化、葡萄糖醛酸化、硫酸酯化等。甜茶素在大鼠體內的吸收較快，在0.12 h血藥濃度達到最大值，半衰期為4.20 h，較大的表觀分布容積提示甜茶素可能存在一定的組織分布。甜茶素在大鼠體內吸收迅速，并經歷廣泛的代謝反應，為進一步闡明甜茶素藥效物質基礎提供依據。

甜茶素；代謝產物；藥動學；UPLC-Q-TOF-MS/MS；UPLC-MS/MS

甜茶素又名甜茶苷、甜葉懸鉤子苷，是廣西甜茶的主要甜味及活性成分，廣西甜茶為薔薇科植物甜葉懸鉤子S. Lee的葉[1-3]。甜茶素是由斯替維醇和葡萄糖組成的四環二萜苷[4]，具有調節糖脂代謝紊亂[5-7]、抗過敏性哮喘[8]、抗齲齒[9-10]等藥理活性。甜茶素作為一種低熱量的天然非糖甜味劑被廣泛應用于各種食品的加工中[11-12]。因此，甜茶素在醫藥和食品領域具有良好的研究價值和廣闊的應用前景。目前研究主要集中在甜茶素的分離純化、含量測定和藥理活性等[3,13-15]，未見其體內代謝及藥動學的研究報道。為了更好地了解甜茶素在生物體內的吸收、轉化和排泄過程，本研究利用超高效液相色譜-四級桿飛行時間質譜聯用技術（UPLC-Q-TOF-MS/MS）鑒定并推測甜茶素在大鼠尿液、糞便、膽汁和血漿中的代謝產物，同時基于超高效液相色譜串聯質譜（UPLC-MS/MS）建立一種快速測定甜茶素的血漿藥物濃度的方法，探究其體內藥動學過程，為甜茶素的進一步研究提供依據。

1 材料

1.1 動物

SPF級雄性SD大鼠，7～14周齡，體質量180～200 g，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，動物許可證號SCXK（湘）2016-0002。動物飼養于溫度（20±2）℃、濕度40%的環境中。動物實驗符合動物倫理委員會標準，倫理批準號DW20200713-003。

1.2 藥品與試劑

對照品甜茶素（批號18053101）、甘草次酸（批號19011506）和甜菊醇（批號18121002）購自成都普菲德生物技術有限公司，質量分數均≥98%；烏拉坦（批號H1821067）購自上海阿拉丁生化科技股份有限公司；質譜級甲酸（批號186260）購自美國Thermo Fisher Scientific公司；色譜級甲醇、乙醇和乙腈購自西隴化工股份有限公司；超純水為實驗室自制；固相萃取小柱購自廣州費尼根儀器有限公司。

1.3 儀器

Dionex Ultimate 3000 UPLC（美國Thermo Fisher Scientific公司）；Bruker impact HD型Q-TOF-MS/MS（德國Bruker公司）；Acquity UPLC?I Class色譜儀和Xevo TQ-XS質譜儀（美國Waters公司）。

2 方法

2.1 代謝產物的鑒定

2.1.1 色譜條件 Waters Acquity UPLC?BEH C18色譜柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），流動相為0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B），梯度洗脫：0～10 min，10%～24% B；10～18 min，24% B；18～19 min，24%～54% B；19～21 min，54%～95% B；21～24 min，95% B；24～25 min，95%～10% B；25～28 min，10% B。體積流量為0.3 mL/min；柱溫為40 ℃；進樣體積為5 μL。

2.1.2 質譜條件 電噴霧離子源（ESI）；負離子模式；霧化氣（N2）壓力為200 kPa；干燥氣溫度為200 ℃；氣體體積流量為8.0 L/min；毛細管電壓為3.5 kV；掃描范圍/50～1000。

2.2 血漿藥物濃度的測定

2.2.1 色譜條件 Waters Acquity UPLC?BEH C18色譜柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm），流動相為0.1%甲酸水溶液（A）-甲醇（B），梯度洗脫：0～0.5 min，30% B；0.5～1.0 min，30%～60% B；1.0～2.5 min，60%～90% B；2.5～5.0 min，90% B；5.0～6.5 min，90%～30% B。體積流量為0.3 mL/min；柱溫為40 ℃；進樣體積為5 μL。

2.2.2 質譜條件 ESI源；負離子多反應監測模式（MRM）；霧化氣（N2）壓力為700 kPa；溫度為550 ℃；體積流量為1000 L/h；毛細管電壓為3.5 kV；錐孔電壓為117 V；用于定量分析離子反應對為：甜茶素/641.3→317.2，碰撞能43 eV；甘草次酸/469.3→425.4，碰撞能40 eV。

2.3 溶液的配制

2.3.1 甜茶素藥液的配制 精密稱取適量甜茶素，溶于純水配制成質量濃度為12.50 mg/mL的溶液。

2.3.2 對照品、內標溶液的配制 精密稱取甜茶素和甘草次酸，以甲醇配制成質量濃度為16.80 mg/mL的對照品儲備液和20.80 μg/mL的內標儲備液。取甜茶素儲備液稀釋成質量濃度為6.72、5.05、3.36、1.26、0.84、0.42、0.17、0.08 μg/mL的系列對照品溶液；質控溶液高、中、低質量濃度分別為5.88、1.68、0.25 μg/mL；定量限溶液質量濃度為0.08 μg/mL。

2.4 生物樣品的收集

取SD大鼠隨機分為空白組、尿液糞便組、膽汁組和血漿組，每組8只，給藥前禁食不禁水12 h。空白組ig純水（10 mL/kg），其余各組ig甜茶素（125 mg/kg）[16-17]。尿液糞便組分別收集給藥后0～4、4～8、8～12和12～24 h尿樣和糞樣，尿樣記錄體積，3500 r/min離心10 min后取上清液；糞樣于50 ℃烘干后稱定質量。膽汁組ip 20%烏拉坦（1.1 g/kg）麻醉[18]，實施膽汁插管引流手術，分別收集給藥后0～2、2～4、4～6、6～8、8～10、10～12、12～24 h膽汁，記錄體積。血漿組ip 20%烏拉坦（1.1 g/kg）麻醉，于5、15、30 min以及1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0 h眼眶靜脈采血0.5 mL，置肝素化抗凝離心管3000 r/min離心15 min取上清。空白組收集尿液、糞便、血漿和膽汁。所有樣品于?20 ℃保存備用。

2.5 生物樣品的處理

2.5.1 尿液、糞便的處理 將各時間段尿液樣品混合后以3倍量甲醇稀釋，旋蒸蒸干，以25 mL甲醇超聲復溶。每克糞便以20 mL甲醇稀釋，旋蒸蒸干，以10 mL甲醇超聲復溶。復溶后的尿液和糞便樣品4 ℃、12 000 r/min離心10 min，取上清液分析。

2.5.2 膽汁的處理 將7個時間段膽汁樣品等體積混合，取1 mL加入到活化好的固相萃取小柱，依次用2 mL水和甲醇洗脫，收集甲醇洗脫液，于40 ℃氮氣流吹干，以100 μL甲醇復溶，4 ℃、12 000 r/min離心10 min，取上清液分析。

2.5.3 血漿的處理 方法1：將12個時間點血漿各取50 μL混合，按“2.5.2”項下方法處理，取上清液進行UPLC-Q-TOF-MS/MS分析。方法2：取各時間點血漿20 μL，加入內標20 μL、乙腈400 μL，渦旋混勻，4 ℃、12 000 r/min離心10 min，取上清液于40 ℃氮氣流吹干，以200 μL甲醇復溶，離心取上清液進行UPLC-MS/MS分析。

2.6 方法學考察

2.6.1 專屬性考察 分別取空白血漿、加入對照品和內標的血漿、給藥后大鼠血漿按“2.5.3”項下方法2處理后進行UPLC-MS/MS分析。

2.6.2 標準曲線和定量限 分別取20 μL空白血漿，加入“2.3.2”項下系列對照品溶液20 μL，按“2.5.3”項下方法2處理，制備分別含672.00、504.50、336.00、126.00、84.00、42.00、16.80、8.40 ng/mL甜茶素及2.08 μg/mL內標的血漿樣品。以待測物和內標的峰面積比值為橫坐標（），血漿中待測物的濃度為縱坐標（），用加權（W＝1/x）最小二乘法進行回歸運算。取定量限溶液同上述處理平行制備3份定量限樣品（含8.40 ng/mL甜茶素），連續測定3 d，并隨行當天標準曲線計算濃度。

2.6.3 準確度和精密度 取20 μL空白血漿和質控溶液制備質量濃度分別為25.20、168.00、588.00 ng/mL的低、中、高濃度質控樣品，各濃度平行6份，連續測定3 d，計算準確度與精密度。

2.6.4 回收率和基質效應 取20 μL空白血漿和低、中、高濃度質控溶液，按“2.5.3”項下方法2制備低、中、高濃度質控樣品（A）；空白血漿按“2.5.3”項下方法2處理（不加內標），再加入內標、質控溶液各20 μL，甲醇200 μL，離心取上清液（B）；以甲醇制備與上述質控樣品等濃度的工作液（C）。以相同質量濃度A與B溶液的峰面積比值計算提取回收率；以B與C溶液的峰面積比值計算基質效應。

2.6.5 穩定性試驗 取20 μL空白血漿和質控溶液制備低、中、高濃度質控樣品，每個濃度平行制備6份，分別于室溫放置12 h、?20 ℃至室溫反復凍融3次、?80 ℃放置20 d后進樣分析，每次測定隨行標準曲線。

3 結果

3.1 甜茶素對照品的質譜裂解途徑分析

甜茶素的[M－H]?離子/641.317 2，同時存在[M＋HCOO]?離子/687.323 0（圖1-A）以及特征碎片離子/479.264 6 [M－H－C6H10O5]?、317.211 1 [M－H－2C6H10O5]?（苷元甜菊醇），/317.211 1繼續失去H2O、－COOH產生碎片離子/273.222 1，255.209 9（圖1-B），推測的裂解途徑見圖2。

3.2 甜茶素在大鼠體內代謝產物的結構分析

運用Metabolite Predict 2.0結合常規I相、II相代謝反應規律預測甜茶素可能的代謝產物，基于UPLC-QTOF-MS分析給藥后大鼠尿液、糞便、血漿和膽汁樣品。通過對比保留時間（R）和多級質譜信息，共鑒定和推測了1種原型成分和58種代謝物。各生物樣品的總離子流圖見圖3，由于膽汁中雜質較多，以提取離子流圖代替，代謝物信息見表1。

尿液、糞便、膽汁和血漿樣品的R為20.3 min時，均檢測L0準分子離子峰/641 [M－H]?以及特征碎片離子/479 [M－H－C6H10O5]?、317 [M－H－2C6H10O5]?，與甜茶素對照品一致，以此鑒定L0為甜茶素。L1-1/L1-2的準分子離子峰為/639 [M－H]?，較L0少2，產生碎片離子/479、317、273，推測L0葡萄糖基上的羥基發生了脫氫化反應。L2-1/L2-2、L3準分子離子峰/657 [M－H]?均較L0多16，產生碎片離子/495 [M－H－C6H10O5]?、333 [M－H－2C6H10O5]?。L3二級質譜中檢測到/629，比[M－H]?離子少28 [C≡O]?，為環氧乙烷開環特征碎片，環氧化位點推測是L0的C16位雙鍵[19]，L2-1/L2-2無此碎片，推測為L0羥基化產物，羥基化位點推測為母核的－CH2。L4準分子離子峰[M－H]?為/789，較L0多148（C5H8O5），碎片離子/641、627、479、317，推測為L0葡萄糖基上的－OH與五碳糖結合的糖基化產物，但無法確定糖基構型及連接位點。L5-1/L5-2準分子離子峰[M－H]?為/817，較L0多176（C6H8O6），推測為L0的葡萄糖醛酸化產物。L6-1/6-2準分子離子峰/479 [M－H]?，與L0特征碎片一致，推測為L0的去葡萄糖基化產物。L7-1/L7-2準分子離子峰/721 [M－H]?，較L0多80，推測由L0葡萄糖基上的羥基發生硫酸酯化反應得到。L8～L25的代謝產物中，大部分由上述同種或兩種I相、II相代謝反應結合得到。其中，L12準分子離子峰/675 [M－H]?，較L3多18，失去葡萄糖產生碎片離子/513、351，推測L12為L3的C16位連接的環氧乙烷基發生開環反應得到[19]。L17和L21的準分子離子峰[M－H]?分別為/874、536，分別較L6和L5多57，推測為L6的C18位上和L5葡萄糖醛酸基上的－COOH與甘氨酸結合的產物。同理，推測L22為L6的谷氨酸化產物。

圖1 負離子模式下甜茶素的一級質譜圖(A) 和二級質譜圖 (B)

圖2 甜茶素可能的裂解途徑

圖3 大鼠ig甜茶素后尿液(A)、糞便 (B)、膽汁(C) 和血漿 (D) 樣品總離子流圖或提取離子流圖

表1 甜茶素在大鼠體內代謝物的鑒定

“＋”表示檢測到；“－”表示未檢測到

“+” means detected; “—” means not detected

尿液、糞便、膽汁和血漿樣品的R為21.5 min處均檢測到L26準分子離子峰為/317 [M－H]?，其二級碎片特征與甜菊醇對照品一致，故鑒定為甜菊醇。根據甜茶素對照品的裂解規律，推測L26由L0在大鼠體內發生糖苷鍵水解而得到。L27、L28準分子離子峰均為/333 [M－H]?，較L26多了16，與L12和L13類似，L28存在環氧乙烷開環特征碎片離子/305 [M－H－CO]?，L27無此碎片，推測L27和L28分別為L26的羥基化產物和環氧化產物[19-21]。L29、L30、L31和L32的準分子離子峰[M－H]?分別較L26多148、176、57、129，根據二級碎片信息，分別推測為L26的C13位羥基糖基化和葡萄糖醛酸化產物、C18位的羧基甘氨酸化和谷氨酸化產物。L33～L45由以上同種或2種I相、II相代謝反應結合而得到。

3.3 甜茶素在大鼠體內的代謝產物信息總結

本研究檢測和鑒定了甜茶素在大鼠體內的1種原型、20種I相和38種II相代謝產物，其中尿液38個、糞便38個、膽汁37個、血漿35個。I相代謝包括脫氫化、羥基化、環氧化和去葡萄糖基化等，II相代謝包括糖基結合、葡萄糖醛酸結合、硫酸化、谷氨酸結合和甘氨酸結合等。甜茶素中的代謝反應位點主要有母核的－CH2、－OH、C＝C及葡萄糖基上的－OH。羥基化反應主要發生在母核環上的幾個－CH2，C16位的雙鍵是環氧化和開環反應發生的位點。脫氫化和II相代謝反應中的各種結合反應主要發生于葡萄糖上的－OH或糖基水解后苷元暴露出的－OH。由于質譜提供的信息有限，許多代謝反應無法確定具體位點。另外，糖基化產物如L4等所結合的糖基均推測為五碳糖（C5H8O5），而非較常見的葡萄糖基結合，但未能確定構型，初步推斷其反應發生位點在－OH上。

比較各化合物峰面積，尿液中主要檢測到L27（甜菊醇＋羥基化產物）和一部分L0（原型）、L26（甜菊醇）；糞便中主要檢測到L0、L26和L27。膽汁中檢測到的各代謝物含量較低，以L0的硫酸酯化產物（L7-1）、羥基化＋硫酸酯化產物（L11-2/L11-3）、L26的環氧化＋谷氨酸產物（L40）為主，只檢測到了少量的L0和L26；血漿中主要檢測到了L0、L26及L26的葡萄糖醛酸化產物（L30）、脫氫化＋羥基化產物（L33）。結果表明甜茶素在大鼠體內能夠直接以原型被吸收，經歷的主要代謝途徑有糖苷鍵水解（去葡萄糖基化）產生苷元甜菊醇，苷元的脫氫化、羥基化、葡萄糖醛酸化、環氧化和谷氨酸化，以及原型直接發生羥基化和硫酸酯化反應。甜茶素在大鼠體內大部分以原型、苷元和苷元的羥基化產物經尿液或糞便排泄，但主要排泄途徑為糞便。

3.4 方法學考察

3.4.1 專屬性試驗 空白血漿、加入對照品工作液和內標的空白血漿、給藥后大鼠血漿樣品色譜圖見圖4。表明在該實驗條件下，甜茶素與內標可以得到較好分離，血漿中的內源性物質不會影響甜茶素和內標的測定，該方法專屬性良好。

3.4.2 標準曲線和定量限 標準曲線回歸方程為＝1 408.4－14.873（2＝0.996 6），表明甜茶素在8.40～672.00 ng/mL線性關系良好，定量限血漿樣品日間精密度為0.90%。

I-空白血漿樣品 II-空白血漿＋待測物（168 ng/mL甜茶素）和內標（2.08 μg/mL甘草次酸）樣品 III-給藥后30 min的血漿樣品

3.4.3 精密度和準確度 如表2所示，甜茶素各濃度質控樣品日內和日間精密度的RSD為2.51%～10.51%，準確度為?1.78%～4.81%，表明該方法精密度和準確度良好。

3.4.4 回收率和基質效應 基質效應考察中，甜茶素各濃度樣品基質效應為88.63%～98.57%，RSD在11.08%以下；回收率為90.18%～95.41%，RSD在6.68%以下。表明該條件下，基質幾乎不干擾待測物的測定，且對待測物具有足夠的提取回收率。

表2 甜茶素質控樣品的日內、日間精密度和準確度

3.4.5 穩定性試驗 3個濃度質控樣品于室溫放置12 h后的準確度為?5.87%～3.14%；于?20 ℃反復凍融3次的準確度為 ?8.03%～5.21%；于?80 ℃存放20 d后，準確度為0.90%～3.34%，表明血漿樣品穩定性良好。

3.5 甜茶素在大鼠體內的藥動學研究

按“2.5.3”項下方法2處理血漿樣品，每次檢測隨行標準曲線和質控樣品。采用Phoenix WinNonlin 8.1藥動學軟件計算大鼠血漿中的藥動學參數，結果見表3，藥-時曲線見圖5。大鼠ig甜茶素（125 mg/kg）后，吸收較快，達峰時間（max）為（0.12±0.08）h，達峰濃度（max）為（2 196.13±472.36）ng/mL，消除半衰期（1/2）為（4.20±1.38）h。同時，表觀分布容積大，提示甜茶素可能具有較大程度的組織分布。

表3 大鼠ig甜茶素后的藥動學參數()

圖5 大鼠ig甜茶素后在體內的平均血藥濃度-時間曲線()

4 討論

本研究分析了ig甜茶素后大鼠的尿液、糞便、膽汁和血漿中的代謝產物，發現各生物樣品在ESI負離子模式下響應優于正離子模式，因此選用負離子模式檢測代謝產物。在對樣品處理方法進行考察時，發現膽汁和血漿樣品經固相萃取小柱預處理后進樣時可以較大程度地減少雜質干擾，用乙腈代替甲醇沉淀蛋白質可以消除內源性雜質對甜茶素血藥濃度測定的干擾。在測定血藥濃度時，一級質譜中除了準分子離子峰[M－H]?外，還可觀察到[M＋HCOO]?的加合離子。

甜茶素在大鼠體內經歷了廣泛的I相和II相代謝反應，以脫氫化、羥基化、去葡萄糖基化、葡萄糖醛酸化等為主。此前已有不少關于甜菊醇及其苷類代謝和藥動學研究的報道。Koyama等[19]研究甜葉菊提取物（主要含rebaudioside A、rebaudioside C、甜菊苷等）及甜菊醇在大鼠體內和體外肝微粒體的生物轉化及藥動學，發現甜菊醇能夠被快速吸收，而以甜菊醇為苷元的苷類較難被直接吸收，主要被腸道菌群降解為苷元才能重新被小腸吸收。Roberts等[22]的研究中也得到了類似的結果，且發現大鼠膽汁中大部分甜菊醇會與葡萄糖醛酸結合，但糞便中主要以原型排泄，表明在經糞便排泄前葡萄糖醛酸基又會被水解而釋放出原型。本研究中，甜茶素雖與上述苷類結構類似，但經大鼠口服后能夠快速以原型被吸收，推測是由于甜茶素結構中糖基數量較上述苷類少。大鼠尿液和糞便中主要檢測到甜茶素原型、苷元和苷元的羥基化產物，極少或未檢測到葡萄糖醛酸化、硫酸酯化和環氧化等結合型代謝產物，推測這些產物在排泄前可能被降解而失去結合基團，更容易進入尿液或糞便。另外，葡萄糖醛酸結合反應主要發生在肝臟，產物主要經膽汁排泄，本研究中的葡萄糖醛酸結合產物主要在血漿中被檢測到，并且該基團大部分與苷元甜菊醇結合，與Geuns等[23]的甜菊苷體內代謝研究結果相似，推測甜茶素在大鼠體內產生的葡萄糖醛酸結合產物會經膽汁排泄至胃腸道，重新進入血液循環。

藥動學結果表明，甜茶素在大鼠體內能夠被迅速吸收，表觀分布容積較大，提示其可能存在較大程度的組織分布，課題組前期在ig甜茶素的大鼠心、肝、脾、肺、腎、腦組織中均檢測到甜茶素，但還有待深入研究。本研究在大鼠膽汁中主要檢測到一些結合型代謝產物，尿液和糞便中主要檢測到甜茶素原型、苷元和羥基化產物，對比峰面積，糞便中的原型、苷元和苷元的羥基化產物含量較高，但排泄速率和累積排泄量還有待進一步研究，甜茶素中苷元甜菊醇的藥動學過程也有待深入探究。

綜上，本研究利用UPLC-Q-TOF-MS方法對大鼠ig甜茶素后的尿液、糞便、膽汁及血漿樣品進行分析，共鑒定出1種原型成分和58種代謝物，涉及廣泛的I相和II相代謝反應。甜茶素在大鼠體內能夠直接以原型被吸收，經歷的主要代謝途徑有脫氫化、羥基化、環氧化、去糖基化、葡萄糖醛酸結合、硫酸酯化等。甜茶素大部分以原型、苷元和苷元的羥基化產物經尿液和糞便排泄，主要排泄途徑為糞便。本研究還建立了基于UPLC-MS/MS測定大鼠血漿中甜茶素的方法，并以該方法初步研究甜茶素在大鼠體內的藥動學過程，發現甜茶素能夠被快速吸收，為甜茶素的體內轉化過程和藥理作用提供依據，為其開發利用提供科學依據。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Identification of metabolites and pharmacokinetic study of rubusoside in rats

JIANG Man-jing, MENG Jin-ying, YAN Xia-qing, QIN Shu-ting, LI Yao-hua, FAN Lan-lan

School of Pharmacy, Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530200, China

To identify the metabolites and study the pharmacokinetic characteristics of rubusoside in rats.SD rats were ig rubusoside (125 mg/kg), metabolites in their urine, feces, bile and plasma collected at different time periods were identified by ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry (UPLC-QTOF-MS/MS). A UPLC-MS/MS method was developed and validated for determination of rubusoside in rat plasma. The pharmacokinetic characteristics of rubusoside in rats were investigated.One prototype component and 58 metabolites were detected. The main metabolic pathways of rubusoside were dehydrogenation, hydroxylation, deglucosylation, glucuronic acid conjugation, sulfation, etc. Rubusoside was absorbed rapidly into the blood after intragastric administration. Maximum concentration (max) and the half-life (1/2) of rubusoside were 0.12 h and 4.20 h, respectively. Meanwhile, the large apparent volume of distribution indicated possible tissue distribution of rubusoside.Rubusoside was absorbed fast and experienced extensive metabolismin rats, which provide a reference for further investigation on therapeutic material basis of rubusoside.

rubusoside; metabolites; pharmacokinetics; UPLC-Q-TOF-MS/MS; UPLC-MS/MS

R285.61

A

0253 - 2670(2021)13 - 3914 - 09

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.13.015

2020-12-31

國家自然科學基金資助項目（31660095）；國家自然科學基金資助項目（81903918）；廣西自然科學基金資助項目（2019JJA140644）；廣西中醫藥大學一流學科項目（2019XK117）；廣西中醫藥大學研究生創新項目（YCSZ2020011，YCSZ20190028）[1]

姜蔓菁（1997—），女，碩士研究生，主要從事中藥民族藥物質基礎研究。

樊蘭蘭（1980—），研究員，碩士生導師，主要從事中藥民族藥質量控制研究。Tel: (0771)4953513 Email: fanll2015@gxtcmu.edu.cn

李耀華（1978—），高級實驗師，碩士生導師，主要從事中藥質量控制研究。Tel: (0771)4953513 E-mail: liyh2001@gxtcmu.edu.cn

[責任編輯 李亞楠]