無創產前基因檢測應用于胎兒染色體非整倍體篩查中的價值研究

鄭敏華 謝潤桂 婁季武

胎兒染色體非整倍體是一種染色體異常,是由一個或者多個染色體丟失或者增加導致的疾病［1］。常見的有唐氏綜合征、Turner 綜合征等,臨床上患者的智力、身材、生理功能都會產生異常。因此對于該病主要是預防為主,進行產前檢查,勸導孕婦對于染色體非整倍體胎兒進行引產,從根源上減少遺傳病的發生率。非整倍體染色體異常產前篩查檢查的目的是通過化驗孕婦的血液,來判斷胎兒患病的危險程度,如果結果顯示高風險,就應進行確診性的檢查。研究表明［2］,NIPT相比較傳統檢測方法,具有無創、高度敏感的優點,能夠大大降低侵入性診斷造成的流產、感染等影響,保證檢測結果的準確率。為研究NIPT 應用于胎兒染色體非整倍體篩查中的價值,本院共選取4500 例孕婦進行研究,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018 年1 月～2019 年1 月4500 例于本院行NIPT 的孕婦。年齡23～48 歲,平均年齡(27.56±6.32)歲；體重47～96 kg,平均體重(63.45±10.85)kg；孕周13～35 周,平均孕周(16.23±3.32)周；孕次1～6 次,平均孕次(2.5±1.2)次。

1.2 納入及排除標準

1.2.1 納入標準 ①年齡23～48 歲；②孕12～32 周；③孕20 周以上,錯過血清學篩查最佳時間,但要求評估21 三體綜合征、18 三體綜合征、13 三體綜合征風險者［3］；④患者及家屬簽署知情同意書。

1.2.2 排除標準 ①孕周<12 周；②夫婦一方有明顯的染色體異常；③1 年內接受過異體輸血、移植手術、異體細胞治療等；④胎兒超聲檢查提示有結構異常須進行產前診斷；⑤有基因遺傳病家族史或提示胎兒罹患遺傳基因高風險；⑥孕期合并惡性腫瘤；⑦醫師認為有明顯影響結果準確性的其他情形［3］。

1.3 方法

1.3.1 標本制備 抽取孕婦外周血5 ml 于EDTA-K2抗凝管中,2～8℃環境下保存,要求8 h 內用4℃冷凍離心機H2050R(廈門市寶能科技有限公司)離心10 min分裝分離血漿-20℃保存備用,提取DNA。

1.3.2 NIPT 檢測 用PCR 擴增儀9902(ABI)擴增、BES4000 高通量基因測序儀(博奧生物)通過實時檢測DNA 復制時產生的H+離子流導致的pH 值變化,從而得到堿基序列,再以無創產前數據分析軟件(博奧生物)獲得23 對染色體的Z 值進行結果判讀。

1.3.3 染色體核型分析 以羊水培養基(廣州和能生物)作細胞培養,以英國GSL-120 全自動染色體掃描平臺行染色體核型分析。

1.4 觀察指標 NTPT 檢測、染色體核型分析結果。染色體異常有T21、T18、T13、性染色體異常、7 號染色體異常、其他染色體異常、微重復、微缺失。

2 結果

2.1 NTPT 檢測 共檢出81 例(1.80%)高風險,包括T21 19 例(0.42%),T18 5 例(0.11%),T13 4 例(0.09%),性染色體異常19 例(0.42%),7 號染色體異常5 例(0.11%),其他染色體異常11 例(0.24%),微重復、微缺失18 例(0.40%)。見表1。

表1 NTPT 檢測［n(%)］

2.2 染色體核型分析 81 例高風險孕婦,其中71 例經產前診斷,確診T21 16 例,T18 4 例,T13 3 例,性染色體異常9 例,7 號染色體異常2 例,其他染色體異常3 例,微重復、微缺失8 例。陽性預測值分別為T21：88.89%,T18：80.00%,T13：75.00%,性染色體異常：56.25%,7 號染色體異常：50.00%,其他染色體異常：30.00%,微重復、微缺失：57.14%。見表2。

表2 染色體核型分析(n,%)

3 討論

近些年來外界環境的變化,輻射、化學物質、藥物等因素都會造成胎兒染色體非整倍體的發生率逐年增高。研究表明［4］,年齡也是其中重要的因素,近年來,隨著高齡產婦的不斷增多,胎兒染色體非整倍體的發生率在高齡產婦中較高。胎兒出現染色體非整倍數將會導致各種遺傳病的發生。常會涉及全身各個系統,導致結構畸形、組織和器官功能障礙,病死率和殘疾率均較高［5］。對于胎兒染色體非整倍體,進行產前篩查,及時發現此病,勸導孕婦進行引產,減少畸形胎兒的出生是極其重要的。

產前診斷是指根據特定的遺傳性疾病或者先天缺陷,可用不同的產前診斷方法進行診斷,篩查出胎兒是否患有染色體異常疾病［6］。NIPT 是應用高通量基因測序等分子生物學技術檢測孕婦外周血中胎兒游離DNA片段,以評估胎兒常見染色體非整倍體(T21、T18、T13)風險的一種產前篩查方式,其對胎兒染色體非整倍體疾病的篩查具有重要意義［7-10］。

本次結果中陽性預測值分別是T21：88.89%,T18：80.00%,T13：75.00%,性染色體異常：56.25%,7 號染色體異常：50.00%,其他染色體異常：30.00%,微重復、微缺失：57.14%。NIPT 對T21、T18、T13 的陽性預測值較高,對性染色體異常,7 號染色體異常及其他染色體異常,微重復、微缺失的陽性預測值偏低,假陽性的例數較多。與文獻報道相符合［11］。這些數據都證明了NTPT 對于染色體非整倍體具有較高的檢出率,可降低患有染色體異常胎兒的出生率,提升新生兒質量水平。相關文獻［12］中也證實了,NTPT 可以有效篩查出染色體非整倍體,減少畸形胎兒、患有染色體異常遺傳病胎兒的出生,減輕其帶給家庭和社會的經濟負擔和精神痛苦。因此,NIPT 的應用會對產前檢測工作作出極大的貢獻。

綜上所述,NIPT 對于胎兒染色體非整倍體篩查有理想的檢出率,可降低胎兒缺陷性疾病的發生,值得推廣。