三丁酸甘油酯對育成期母貂生長性能、營養物質表觀消化率及十二指腸消化酶活性的影響

李丹丹 宇曉軍 王 群 王 光 王利華

(青島農業大學動物科技學院，青島266109)

三丁酸甘油酯(TB)是丁酸和甘油酯化后的產物，是一種穩定的、快速吸收的丁酸前體物，可以被動物腸道中的胰脂肪酶分解產生3分子丁酸和1分子甘油，然后被運送至機體各組織器官發揮作用[1]。相比于丁酸及其衍生物，TB具有脂肪香味、不易被胃液分解、代謝速度慢等特點，已被廣泛應用于畜牧業養殖中[2]。飼糧中添加TB可以改善動物的生長性能，促進腸道發育，改善腸道組織形態，提高動物的免疫力，優化腸道菌群，提高營養物質表觀消化率，保障動物機體的健康[3-6]。水貂是肉食性動物，具有獨特的消化道結構及特性，食糜通過胃腸道的時間非常短，維持腸道健康對于提高水貂生長性能、營養物質的消化吸收和毛皮品質尤為重要[7]。因此，本試驗在育成期母貂飼糧中添加不同水平的TB，探究TB對育成期母貂生長性能、營養物質表觀消化率及十二指腸消化酶活性的影響，以確定TB在水貂飼糧中的適宜添加水平。

1 材料與方法

1.1 試驗設計

將120只65日齡體重相近的健康白色母貂隨機分為6組，每組10個重復，每個重復2只(飼養在1籠內)。各組飼糧中分別添加0(Ⅰ組，對照組)、0.1%(Ⅱ組)、0.2%(Ⅲ組)、0.3%(Ⅳ組)、0.4%(Ⅴ組)和0.5%(Ⅵ組)的TB(純度≥50%，其余部分為載體二氧化硅)。基礎飼糧參照NRC(1982)和生產實踐中飼喂效果較好的配方配制，其組成及營養水平見表1。試驗于2019年7月3日至2019年9月10日在山東省諸城市某水貂養殖場進行，預試期7 d，正試期60 d，前30 d為Ⅰ期，后30 d為Ⅱ期。水貂采用棚舍飼養，已完成犬瘟熱和細小病毒疫苗接種，每天05：00和17：00各飼喂1次，自由飲水，自然光照。

表1 基礎飼糧組成及營養水平(干物質基礎)

續表1項目 Items含量 Content預混料 Premix1)3.19雞肝 Chicken liver2.68膨化小麥 Extruded wheat1.61魚粉 Fish meal1.34雞蛋 Egg0.81合計 Total100.00營養水平 Nutrient levels2)代謝能 ME/(MJ/kg)16.83粗脂肪 EE19.09粗蛋白質 CP29.97粗灰分 Ash9.44鈣 Ca2.35磷 P1.13

1.2 測定指標及方法

1.2.1 生長性能的測定

試驗正式開始時和每期結束后對水貂逐只進行空腹體重，記錄每天采食量，計算每期平均日增重、平均日采食量、料重比。

1.2.2 營養物質表觀消化率的測定

分別在試驗第3周和第6周，每組選6個重復進行消化試驗。消化試驗采用內源指示劑法收集新鮮的水貂糞便，用10%的鹽酸固氮，同時采集每組飼糧樣品。將3 d收集的糞便、飼糧樣品分別混合均勻后于65 ℃烘至恒重，制成風干樣，并測定初水分。樣品粉碎過40目篩，參照相應標準測定糞樣和飼糧樣品中的鹽酸不溶灰分(GB/T 23742—2009)、粗蛋白質(GB/T 6432—2018)、粗脂肪(GB/T 6433—2006)、水分(GB/T 6435—2014)、粗灰分(GB/T 6438—2007)、鈣(GB/T 6436—2018)、磷(GB/T 6437—2018)、氨基酸(GB/T 5009.124—2016)含量，并計算營養物質表觀消化率。

1.2.3 十二指腸消化酶活性的測定

飼養試驗結束后，每組選擇6個重復，從每個重復中取1只水貂進行屠宰試驗，取十二指腸于-80 ℃保存。測定前將腸道樣品4 ℃解凍，稱取0.5～1.0 g腸道內容物，按重量1∶9的比例制作組織勻漿(α-淀粉酶和脂肪酶活性測定用生理鹽水進行冰水浴勻漿，胰蛋白酶活性測定用勻漿介質進行冰水浴勻漿)，低溫離心機2 500 r/min離心10 min，取上清液用試劑盒(南京建成生物工程研究所)測定，α-淀粉酶和脂肪酶活性用酶標儀(RZ-9618)比色測定，胰蛋白酶活性用紫外可見分光光度計(UV-6200)比色測定。

1.3 數據分析

試驗數據采用SAS 9.4軟件中MIXED過程進行單因素方差分析，計算最小二乘均值及標準誤，用Tukey法對最小二乘均值進行多重比較，并用REG過程對TB添加水平與生長性能、營養物質表觀消化率及十二指腸消化酶活性各指標進行線性和二次曲線回歸分析，P<0.05為差異顯著。

2 結 果

2.1 TB對育成期母貂生長性能的影響

由表2可知，TB對育成期母貂試驗Ⅱ期的末重、平均日增重和平均日采食量有顯著影響(P<0.05)，對試驗Ⅰ期的生長性能無顯著影響(P>0.05)。試驗Ⅱ期，與對照組相比，Ⅱ、Ⅲ組的末重顯著升高(P<0.05)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的平均日采食量顯著升高(P<0.05)；末重與TB添加水平呈二次曲線相關(P<0.05)。

表2 TB對育成期母貂生長性能的影響

2.2 TB對育成期母貂營養物質表觀消化率的影響

由表3可知，TB對育成期母貂試驗Ⅰ期和Ⅱ期的干物質、粗蛋白質、鈣、磷表觀消化率有顯著影響(P<0.05)。試驗Ⅰ期，與對照組相比，Ⅱ組的粗蛋白質表觀消化率顯著升高(P<0.05)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的鈣表觀消化率顯著升高(P<0.05)，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組的磷表觀消化率顯著升高(P<0.05)；其中，Ⅱ組的粗蛋白質、鈣、磷表觀消化率較對照組分別提高了10.69%、33.16%、23.24%；粗蛋白質和磷表觀消化率與TB添加水平呈二次曲線相關(P<0.05)。試驗Ⅱ期，與對照組相比，Ⅱ、Ⅲ組的干物質、粗蛋白質表觀消化率顯著升高(P<0.05)，Ⅱ組的鈣表觀消化率顯著升高(P<0.05)，Ⅲ、Ⅳ組的磷表觀消化率顯著升高(P<0.05)；磷表觀消化率與TB添加水平呈二次曲線相關(P<0.05)。

表3 TB對育成期母貂營養物質表觀消化率的影響

由表4可知，TB對育成期母貂試驗Ⅰ期和Ⅱ期的氨基酸(除試驗Ⅰ期蛋氨酸和半胱氨酸外)及總氨基酸表觀消化率有顯著影響(P<0.05)。試驗Ⅰ期，與對照組相比，Ⅱ組的組氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、苯丙氨酸表觀消化率顯著升高(P<0.05)；精氨酸、半胱氨酸表觀消化率與TB添加水平呈線性和二次曲線相關(P<0.05)。試驗Ⅱ期，與對照組相比，Ⅱ組的氨基酸(除賴氨酸、半胱氨酸、纈氨酸外)表觀消化率均顯著升高(P<0.05)；半胱氨酸、賴氨酸表觀消化率與TB添加水平呈二次曲線相關(P<0.05)。

表4 TB對育成期母貂氨基酸表觀消化率的影響

續表4項目Items組別 GroupsⅠ(對照 Control)ⅡⅢⅣⅤⅥ標準誤SEP值 P-value三丁酸甘油酯TB線性Linear二次Quadratic蛋氨酸 Met93.50bc94.89a93.10c94.47ab92.48c93.12c0.39<0.010.080.13異亮氨酸 Ile88.85bc91.02a87.84c90.21ab88.72bc89.63abc0.650.030.930.99亮氨酸 Leu90.07bc91.81a88.89c91.30ab89.36c90.42abc0.52<0.010.570.85蘇氨酸 Thr85.31b88.87a85.29b88.17a85.48b85.95b0.68<0.010.770.73苯丙氨酸 Phe93.72bc95.16a93.13c94.53ab93.45c93.98bc0.29<0.010.480.77半胱氨酸 Cys81.68ab82.77a78.31c79.40bc78.53c80.67abc0.980.020.090.04纈氨酸 Val86.43a87.49a82.38b87.77a85.53a87.69a1.050.010.600.31總氨基酸 TAA90.02bc91.75a88.64c91.09ab88.97c89.93bc0.52<0.010.270.56

2.3 TB對育成期母貂十二指腸消化酶活性的影響

由表5可知，TB對育成期母貂十二指腸胰蛋白酶活性有顯著影響(P<0.05)，對十二指腸脂肪酶、α-淀粉酶活性無顯著影響(P>0.05)。Ⅱ組的十二指腸胰蛋白酶活性顯著高于其他各組(P<0.05)，十二指腸胰蛋白酶活性與TB添加水平呈線性和二次曲線相關(P<0.05)。

表5 TB對育成期母貂十二指腸消化酶活性的影響

3 討 論

3.1 TB對育成期母貂生長性能的影響

本試驗結果表明，TB可有效改善育成期母貂的生長性能，這與白國勇等[8]在保育豬上得到的結果一致，即TB可改善平均日增重和平均日采食量。采食量在一定程度上可反映飼糧的適口性，因為TB略具有香味，且能夠增加水貂的采食量，可以推斷TB可以改善飼糧的適口性，增進食欲。有研究表明，TB可以促進營養物質的消化，從而改善動物的生長性能[9]。另外，TB還可以緩解高溫熱應激。水貂育成期正值一年中氣溫最高的夏季，高溫可影響水貂的采食量和免疫功能，造成水貂的應激損傷，飼糧添加TB可維持內環境穩定，減少應激損傷[10]，改善水貂生長性能。

3.2 TB對育成期母貂營養物質表觀消化率的影響

本試驗結果表明，TB可提高育成期母貂干物質、粗蛋白質、鈣和磷表觀消化率，與劉統等[11]在仔豬上的研究一致。水貂對于營養物質的消化吸收主要依賴于腸道發育的健康水平[12]，動物在攝入TB后，在小腸中受到胰脂肪酶的分解作用，釋放1分子甘油和3分子丁酸，其中甘油會被酯化生成甘油三酯，大部分以乳糜微粒的形式經過淋巴進入血液循環，丁酸則是通過肉堿轉運途徑進入到腸黏膜上皮細胞中，并在線粒體中發生β-氧化同時釋放大量能量，腸腔中的丁酸不僅可以酸化環境，阻止病原菌的增殖，還可以改善腸道結構與屏障功能[13]。另外，TB可調節腸道微生態平衡，促進腸道對營養物質消化吸收[14]，營養物質表觀消化率的提高促進了育成期水貂的生長。

水貂作為一種肉食性動物，較其他動物蛋白質需求量大[15]。水貂對蛋白質的需要最終表現在對氨基酸的需要，氨基酸對水貂的健康及毛皮品質至關重要。精氨酸是廣泛存在于哺乳動物機體組織蛋白和體液中的一種基礎氨基酸，在促進生長、參與脂質代謝、改善腸道健康、增強免疫功能等方面發揮著重要作用。精氨酸在水貂的皮毛發育過程中起著至關重要的作用，并可能影響后期毛皮品質[16]。蛋氨酸作為一種含硫氨基酸，參與機體內眾多代謝過程，為動物體內合成胱氨酸和蛋白質提供原料，從而促進毛皮生長，提高毛皮品質[17]。本試驗結果表明，TB可提高母貂的精氨酸、蛋氨酸和賴氨酸等必需氨基酸表觀消化率。這說明TB提高粗蛋白質表觀消化率主要是因為提高了必需氨基酸表觀消化率，而必需氨基酸表觀消化率的提高有利于促進水貂生長及毛皮品質的改善。

3.3 TB對育成期母貂十二指腸消化酶活性的影響

本試驗結果表明，TB可提高育成期母貂十二指腸胰蛋白酶活性。水貂以高脂肪、高蛋白質飼糧為主，主要是依靠腸道分泌的酶進行消化，胰蛋白酶活性的提高有利于母貂對粗蛋白質和氨基酸的消化吸收。由此可以推斷，消化試驗中TB改善粗蛋白質和氨基酸表觀消化率可通過胰蛋白酶活性的提高來實現，從而達到促進母貂生長的作用。該結果與鐘翔等[18]在仔豬、楊在賓等[19]在肉雞上的研究結果一致?？赡苁怯捎赥B在十二指腸經胰脂肪酶初步消化分解，釋放丁酸，降低腸道pH,提高胃腸道酸度,激活蛋白酶原,提高消化酶活性。另外，丁酸還可以誘導胰島素和胰高血糖素，并通過和胰腺腺泡細胞上的特異受體結合，起到調節消化酶生物合成的作用[2]。

4 結 論

在本試驗條件下，TB添加水平為0.1%時可改善育成期母貂生長性能，提高營養物質表觀消化率和十二指腸胰蛋白酶活性。